关于组织块培养法的概述

一、翻转干涸 1、将组织剪成1mm3左右的组织块 2、用PBS缓冲液清洗组织块3次 3、将组织块按照一定间距转入培养瓶内 4、轻轻将培养瓶翻转过来,将适量培养液加到非细胞生长面上,注意翻瓶时勿令组织小块流动,塞好瓶塞置36.5℃温箱培养2小时左右(勿超过4小时),使小块微干涸 5、从微箱中取出培养瓶,开塞,46度斜持培养瓶,箱瓶底脚部轻轻注入培养液少许,然后缓缓再把培养瓶翻转过来,让培养液慢慢覆盖附于瓶底上的组织小块置温箱中静止培养 6、待细胞从组织块游出量增后,再补加培养液 二、薄层培养 1、将组织剪成1mm3左右的组织块 2、用PBS缓冲液清洗组织块3次 3、将组织块按照一定间距转入培养瓶内4、静置30分钟(使组织块更好的贴壁) 5、每瓶加入2.0mL新鲜培养液(缓慢,防止组织块浮起),塞好瓶塞置37oC恒温培养箱内培养 6、根据培养液的颜色变化,更换培养液(每天进行细胞形态观测,细胞计数,测上清......阅读全文

关于组织块培养法的概述

  一、翻转干涸  1、将组织剪成1mm3左右的组织块  2、用PBS缓冲液清洗组织块3次  3、将组织块按照一定间距转入培养瓶内  4、轻轻将培养瓶翻转过来,将适量培养液加到非细胞生长面上,注意翻瓶时勿令组织小块流动,塞好瓶塞置36.5℃温箱培养2小时左右(勿超过4小时),使小块微干涸  5、从微

传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法

一、初代消化培养法 1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的

常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与...

常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与传代培养法 1)初代消化培养法: 1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液

细胞原代培养实验——组织块直接培养法

实验材料孕鼠新生小鼠试剂、试剂盒RPMI1640培养基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素链霉素仪器、耗材培养瓶青霉素瓶废液缸血球计数板蜡盘手术器械大头针离心管小玻璃漏斗三角烧瓶平皿吸管试管移液管无菌纱布无菌眼科剪实验步骤 一、将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死,置75%酒精泡2-3秒钟(时间不能过长、以免

初代细胞培养实验——组织块培养法

实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1.  剪切把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止;2.  摆布用弯头吸管吸取若干小块,置入培养

肿瘤细胞原代培养实验——组织块法

肿瘤细胞原代培养可以:(1)研究癌变机理;(2)研究抗癌药检测;(3)研究癌分子生物学;(4)用于阐明和解决癌症。实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)

原代细胞组织块培养法,细胞一直未爬出

这个可能和你用的酶液浓度、消化时间有关,消化不足或消化过头,都会导致细胞出不了,齐氏生物建议您从酶液浓度、消化时间上重新摸索一下。

徕卡显微镜关于组织块的体积

徕卡生物显微镜到目前为止,冰凉固定,冰冻超薄切片及冰冻干操是组织及细胞x线微区的常规方法。对该方法的细节做以下几点说明: 徕卡生物显微镜有聚光镜的显微镜则可将聚光镜作上下移动使其亮度适中,另外也可以改变可变光阐的孔径以达到适中9b亮度。如果光线太阳时,则可将聚光镜作适当的向上升,可变光闹的孔径作适当

常规组织培养法

一、初代消化培养法1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3、 处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分

家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法

家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台

组织芯片的制备——石蜡块组织芯片

实验方法原理首先制作模具蜡块(受体,recipient)。从供体蜡块(donor)上取样,取样针分别有 0.6 mm、1.0 mm、1.5 mm 和 2.0 mm 几种,在 1 个大小 45 mm×20 mm 的模具蜡块上,以 0.6 mm 取样针间隔 0.1 mm,可排列 1000 余个位点,如取

徕卡生物显微镜关于组织块的体积

徕卡生物显微镜到目前为止,冰凉固定,冰冻超薄切片及冰冻干操是组织及细胞x线微区的常规方法。对该方法的细节做以下几点说明: 徕卡生物显微镜有聚光镜的显微镜则可将聚光镜作上下移动使其亮度适中,另外也可以改变可变光阐的孔径以达到适中9b亮度。如果光线太阳时,则可将聚光镜作适当的向上升,可变光闹的孔径作适当

生化培养箱对鸡胚背根神经节组织块的培养

 主要用于神经生长因子(NGF)等神经营养因子的生物活性测定。在差倒置显微镜下观察以神经突起的生长长度和密度为指标半定量评估NGF的活性。1、材料和方法(1)选正常受精的鸡蛋,置于37℃生化培养箱内孵化,每日翻动鸡蛋一次。(2)取孵化8-12 d 的鸡蛋, 用70% 酒精消毒蛋壳,从气室端敲开蛋壳,

动物组织块DNA的提取

【实验目的】(1)学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。(2)从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。【实验原理】DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心

动物组织块DNA的提取

实验目的 1. 学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。 2. 从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。 实验原理 DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离

动物组织块DNA的提取

实验概要学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。实验原理DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心除去变性蛋白质;RN

动物组织块DNA的提取

实验原理DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心除去变性蛋白质;RNase降解RNA,从而得到纯净的DNA分子。实验试剂1.生理盐水2.十二烷基硫酸钠(SDS)3.三

组织蜡块切片的保存

许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下,而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。研究发现,切片在室温下保存3个月以上,免疫组化染色结果会出现减弱或阴性,故进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片,共110片,常温空气中放置1个月、3个月、6个月、

钩蚴培养法的概述

  钩蚴培养法是一项用于检查寄生虫的辅助检查方法。亦称试管滤纸培养法。在适宜的温度和湿度的条件下,钩虫卵在数日内发育并孵出幼虫,一般在3~5天后,可用肉眼或放大镜观察,检出率为直接涂片法的7倍,也优于饱和盐水浮聚法,孵出的丝状蚴可作虫种鉴定。此相检查可以用于判断相应的病征。

病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养

实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法,其优点是①经济适用,结果正确且敏感;②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法,是指动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织自机体取出后,经胰酶或其他细胞分散剂消化处理,得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中,加入细胞生长所必需的营养液,置合

关于组织培养技术的培养方法介绍

  1、非试管微组织快繁  非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。  2、试管组织培养  试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培

关于内标法的概述

  内标法(Internal Standard Method)是将一定重量的纯物质作为内标物(参见内标物条)加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积(或峰高)及相对校正因子,按公式即可求出被测组分在样品中的百分含量。内标法是色谱分析中一种比

大鼠主动脉内皮细胞培养实验——贴块法

大鼠血管内皮细胞培养可用于:(1)血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。实验材料雄性Wistar大鼠试剂、试剂盒DMEM胎牛血清内皮细胞生长因子肝素钠青

人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法

实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1.  要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不

细胞生物基本方法:常规组织培养法

常规组织培养法1)初代消化培养法1.      准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.      布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3.      处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染

关于组织蛋白酶的概述

  组织蛋白酶cathepsin 在各种动物组织的细胞内(特别是 溶酶体部分)发现的一类蛋白酶。此名源自希腊语的“消化”,为威尔斯达特(R.Willstāatter,1929)命名的。来源于同一种类组织细胞的也是由组织蛋白酶A.B.C.D.E等多种酶组成。可以根据所作用的代表性 底物的种类进行分类,

大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法

大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDME

关于碘量法的概述

  1、定义  碘量法是 氧化还原滴定法中,应用比较广泛的一种方法。这是因为电对I2-I-的标准 电位既不高,也不低,碘可做为氧化剂而被中强的还原剂(如Sn2+,H2S)等所还原;碘离子也可做为还原剂而被中强的或强的氧化剂(如H2SO4,IO3-,Cr2O72-,MnO4-等)所氧化。  2、方法概

人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型的建立凝血酶法

人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型的建立可以:(1)为研究胃癌的发病机制提供理想的动物模型;(2)研究胃癌实验治疗提供理想的动物模型;(3)建立一种最能体现人体胃癌侵袭和转移的理想的动物模型。实验材料BALB C nu nu裸鼠人胃癌细胞株SGC-7901试剂、试剂盒人纤维蛋白原冻干粉人凝血酶冻干粉凝

关于高层培养基的概述

  固体培养基solid culture medium 的一种形式;制作时应趁热定量分装在试管内,直立凝固而制成的称为高层培养基,  高层培养基:这样接入菌种后虽然发育的面小了一点,但培养基的厚度增大,营养丰富,时间长些也不容易干燥、开裂。常用于保存菌种。  与高层培养基相对和并列的概念是:斜面培养