免疫组织化学法实验——组织切片的免疫荧光标记
实验材料组织样本冰冻切片置于载玻片上试剂、试剂盒PBS第一抗体5〜10μg mL第二抗体特异性针对第一抗体的抗体突光染料结合物封片介质（如Gelvatol)仪器、耗材塑料玻片盒或加湿盒实验步骤1) 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒。从冰冻切片机或冰箱取出载有切片的载玻片，交叉放入玻片盒（每边约6片）或加湿盒中。勿使载玻片相互接触。2) 待载玻片达到室温且未干时，于切片上铺加PBS，勿使溢出玻片。3) 稀释的第一抗体于4℃用微量离心机以13500 g离心2 min (每一载玻片上加40〜 50μL抗体，应能盖住切片）。4) 用与泵相连的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并从另一端加上抗体，盖上加湿盒，室温温育1 h。5) 以PBS洗玻片3次（5 min/次)。从切片一端加入新的PBS缓冲液，由另一端吸去旧的缓冲液。6) 稀释的第二抗体于4℃用微量离心机以13500 g离心2 min。以每载玻片40〜50μL抗体计。7)......阅读全文
免疫组织化学法实验——组织切片的免疫荧光标记
实验材料组织样本冰冻切片置于载玻片上试剂、试剂盒PBS第一抗体5〜10μg mL第二抗体特异性针对第一抗体的抗体突光染料结合物封片介质（如Gelvatol)仪器、耗材塑料玻片盒或加湿盒实验步骤1) 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒。从冰冻切片机或冰箱取出载有切片的载玻片，交叉放入玻片盒（每边约6片
组织切片的免疫荧光标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 PBS抗体仪器、耗材 玻片加湿盒实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3. 稀释的第
组织切片的免疫荧光双标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 第一抗体IgG实验步骤 1. 当进行双标记实验时，最重要的准则是：第一抗体应为不同类型，从而使第二抗体能分别识别之。第一抗体最好是来源于不同免疫动物。但如使用单克隆抗体，这一要求就有可能达不到，当使用单抗时，不同型的抗体如IgG和IgM，可被第二抗体确切区分
组织切片的免疫荧光标记实验
实验方法原理免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。实验材料组织样品试剂、试剂盒PB
组织切片的免疫荧光双标记实验
间接免疫荧光显微镜检术可使两种或更多种抗原可以在同一切片，同一时间内被显示出来，可用于（1）细胞标记；（2）免疫荧光筛选干细胞。实验方法原理通过使用激发波长及发射波长均不相间的荧光染料而进行的。通常限用两种荧光染料，最常见的是罗丹明（绿光激发，发射红光）和荧光素（蓝光激发、发绿光）联合使用。实验材料
LSCM冷冻组织切片的免疫荧光标记
冷冻组织切片的免疫荧光标记 将冷冻组织切片从 -80℃ 冰箱中取出，室温放置 10 min，待切片回温并干燥，浸于 PBS 中 10 min洗去OCT，可以无需 Triton 处理，即可进行免疫荧光抗体标记，操作步骤与培养细胞反应方法相同。反应在避光湿盒中进行，反应结束时用无荧光封固剂封片，4℃保存
－免疫组织化学法实验——悬浮细胞的免疫荧光标记
实验材料细胞生长于含培养液的15 mL Falcon管中试剂、试剂盒PBSPFA固定液仪器、耗材多聚L-赖氨酸包被的载玻片实验步骤1) 细胞在冰浴中冷却，然后用台式离心机在4℃以800 g离心5 min (用于淋巴细胞）。吸去培养液并以4℃的PBS重悬细胞。离心机转速依细胞类型进行调整，但必须低转速
免疫组织化学法实验——单层生长细胞的免疫荧光标记
实验材料在3〜5 cm培养皿上生长的单层细胞（培养皿越小所需的抗体就越少 但培养皿应适合显微镜下观察）试剂、试剂盒VPBS40℃2% (m V)高聚甲醛（PFA)固定液 4℃ 用于细胞表面抗原固定100%甲醇 -10〜-20℃ (置于冰箱的结冻室冷却较为理想）；或含0.1% (V V) Triton
组织病理实验_石蜡切片法
实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。实验
组织切片的免疫金标记
实验方法原理 利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质，与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外，胶体金还可与其它多种生物大分子，如SPA、PHA、ConA等结合。实验材料 组织样品试剂、试剂盒 免疫金标记物仪器、耗材 培养箱显微镜实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，
组织切片的免疫金标记
实验方法原理利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质，与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外，胶体金还可与其它多种生物大分子，如SPA、PHA、ConA等结合。实验材料组织样品试剂、试剂盒免疫金标记物仪器、耗材培养箱显微镜实验步骤1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸；染色架；保湿盒；晾片盘；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟；2. 脱蜡和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
组织免疫荧光是用石蜡切片还是冰冻切片
二者应该都是可以的，具体要看自身的实验条件哪个操作更方便以及抗体的性质。看你的实验要求，冰冻片要求较高（低温环境，液氮，冰冻切片机，OCT包埋剂等等），石蜡片的制作就比较简单，试剂也较便宜。另外看你购买的抗体适用于哪种片子免疫组化的话，一般大都使用石蜡切片。免疫荧光染色的话，都可以的，冰冻切片比较容
抚生试剂免疫组织化学组织细胞的组织切片
一、载玻片的处理 免疫组化染色时间长，特别是双PAP、免疫金银染色等方法，所需时间更长，并要反复洗涤，切片在试剂中长时间浸泡，经多次洗涤，极易造成脱片而影响实验的结果。需采用以下方法处理：载玻片先置于洗洁液(或洗衣粉溶液)中煮沸30min，清水洗干净后放人清洁液中浸泡12—24h，漂洗，用蒸馏
LSCM组织切片的细胞核标记
组织切片的细胞核标记目前仍然采用 DAPI(4，6-联脒-2-苯基吲哚，ex 359 nm / em 461 nm)，其特点是专一性强、灵敏度高、稳定性好、毒性小，且可被405nm激光器有效地激发，获取明亮的核标记荧光图像。PI(碘化丙啶 ex 536nm / em 617nm)也可以用于核标记，因
亲和免疫组织化学实验——－CSA法
实验方法原理催化信号放大系统（catalyzed signal amplification system，CSA），也称酿胺信号放大（tyramine signal amplification system，TSA）或称 CARD（catalyzed repoter deposition）。该方法的
亲和免疫组织化学实验——ABC－法
实验方法原理ABC 法即亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法，是许世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基础上改良的，其特点是利用亲和素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。ABC 法与 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗体不为生物素所标记，生物素标记的第二抗体与 ABC 复合物
亲和免疫组织化学实验——LSAB－法
实验方法原理LSAB 法或称 S-P 法、SABC 法，它是采用生物素标记的第二抗体与结合有 HRP 或 AKP 酶的链霉亲和素（streptavidin）连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质，相对分子质量 60000，不含糖链，等电点 pI 为 6.0～6.5
冰冻切片免疫荧光实验步骤
1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时，转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3
冰冻切片免疫荧光实验步骤
1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时，转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3
亲和免疫组织化学实验——改进－CSA法
实验方法原理已有的研究结果证实，CSA 法较 LSAB 法敏感 500～1000 倍，较 EnVision 法敏感 20～100 倍。其对细胞周期素等核内抗原的定位，有独特的优点，定位准确性、敏感性、稳定性要较标准的 CSA 法好，其敏感性和穿透性要好于 EnVision 法。最近，Hasui K
小鼠脑片免疫组织化学（ABC法）实验
实验方法原理 通过特异的抗原抗体反应标记上可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗原或抗体成分的方法。在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察其性质定位，还可以利用细胞分光光度计、图像分析仪、共聚焦显微镜等进行细胞原位半定量测定。免疫组织化学的显著特点是特异性强。实验材料 冷冻切片试剂、试剂盒 一
组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 PBS过氧化氢PAP二氨基联苯胺仪器、耗材 离心机加湿盒培养箱实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿
组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
实验材料组织样品试剂、试剂盒PBS过氧化氢PAP二氨基联苯胺仪器、耗材离心机加湿盒培养箱实验步骤1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片
组织病理实验_冰冻切片
组织病理实验广泛应用于生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等实验方法原理冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，大大缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等
冷冻组织切片的制作实验
实验试剂液氮，干冰，1％明胶，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀释抗体，辣根过氧化物酶标记的二抗，DAB／金属盐试剂，3％过氧化氢，0.3％(W／V)氯化镍贮存液，Harris苏木精，乙醇实验设备载玻片，Whatman 1＃滤纸，低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
实验技术：组织切片的制备
【目的】组织标本必须首先被制成组织切片，再经过染色处理，然后才能在显微镜下进行临床诊断和科学研究。【原理】苏木素染色结合伊红染色是常规组织学染色技术，也称为H & E染色。苏木素是碱性染色，细胞核被染成深紫或兰色，常用作核染色；伊红是酸性染色，细胞浆染呈红色，常用作胞浆染色。【材料】1.试剂和溶液（
免疫组织化学概念和基本原理
1、概念和基本原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定位、定性、半定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性和组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜的现像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物
常用免疫组织化学方法的原理免疫荧光方法
是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高
免疫组织化学技术按照标记物的种类分类
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。