酶联免疫吸附实验—双抗体夹心ELISA法检测特异性抗体
实验步骤双 抗 体 夹 心 ELISA 法检测特异性抗体在有少量酶标特异抗体但无法获得纯化抗原时,用该检测方法筛选特异性抗体最为有 效(图 1.1. 4)。另外,这种方法也可利用那些结合同一抗原的不同单克隆抗体来绘制抗原表位图。附 加 材 料(其他材料见基本方案)包 被 抗 体 溶 液(特异性针对待测种属免疫球蛋白的抗体,不结合抗原或标记抗体)碱性磷酸酶标记的针对抗原的特异性抗体1.用 50ul 的 2ug/ml 或 lOug/ml 包被抗体溶液包被 Immulon 微量滴定板,并封闭板孔(见基本方案,步 骤 2〜5)。用较低浓度分析杂交瘤上清液或腹水,较高浓度用于分析抗血清。2.用封闭缓冲液按 1 : 5 或 1 : 200 (V/V) 分别稀释杂交瘤上清液、抗血清或腹水,配制待测抗体溶液。在已包被孔中加入 50M 1,室 温 下 孵 育 2 h 以上,洗 涤(见基本方案 ,步 骤 7)。3.用封闭缓冲液配制 20〜200ng......阅读全文
酶-联-免-疫-吸-附-实-验2
十 字 交 叉 连 续 稀 释 分 析 法 (criss-cross serial-dilution analysis) 测定试剂最适浓度实验步骤展开
酶-联-免-疫-吸-附-实-验——抗体夹心ELISA法检测可溶性抗原
实验步骤抗 体 夹 心 ELISA 法检测可溶性抗原该检测方法比抗原直接结合到固相上的 ELISA 方法敏感性高 2〜5 倍(图 I.1. 3)。附 加 材 料(其他材料见基本方案)特 异 性 抗 体(单 克 隆 或 多 克 隆 )或 者 来 自 抗 血 清 、腹 水 或 杂 交 瘤 上 清 液(单
酶-联-免-疫-吸-附-实-验——间-接-ELISA-法检测特异性抗体
实验步骤 该检测方法使用毫克级的纯化或半纯化抗原,能筛选抗血清和杂交瘤上清液中的特异 性 抗 体(图 1.1.1) 。 Img 纯化抗原可用于 80〜800 个微量滴定板的筛选。一、材 料显色剂:碱 性 磷 酸 酶 标 记 的 蛋 白 A (Sigma 公 司),碱 性 磷 酸 酶 标 记 的 蛋
蛋白质分离和分析——免-疫-印-迹-和-免-疫-检-测
实验步骤基 本 方 案 1 液体容器中的蛋白质印迹材 料待分析样品标准分子质量蛋白质,预 染 型(Sigma 或 Bio-Rad) 或 生 物 素 化 型(Vector labs 或Sigma)转移缓冲液无粉手套Scotch-Brite 垫 片(3M ) 或类似海绵Whatman 3M M 滤纸或类
免-疫-球-蛋-白-M(IgM)和-免-疫-球-蛋-白-D(IgD)-的纯化
实验步骤基 本 方 案 1 用透析和凝胶过滤层析法纯化 IgM此 法 纯 化 的 IgM 可达到较好纯度,可用于酶解、异 硫 氰 酸 盐 荧 光 素(FITC) 标记 、生物素标记或放射性标记。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)腹 水 或 单 克 隆 抗 体(MAb) 上 清(单 元 1.4)
免-疫-球-蛋-白-M(IgM)和-免-疫-球-蛋-白-D(IgD)-的纯化实验
实验步骤备 选 方 案 1 硫 酸 铵 沉 淀 法 纯 化 IgM此法适用于多数 IgM 抗体,尤其是一些在水中不能形成沉淀的 IgM 抗体。附 加 材 料(其 他 材 料 见 基 本 方 案 1 )饱和硫酸铵(SAS)硫酸铵结晶(CAS)硼酸缓冲液,可选备 选 方 案 2 甘 露 聚 糖 结 合
氮气吸脱附曲线类型
吸附等温线的类型:I 型等温线在较低的相对压力下吸附量迅速上升,达到一定相对压力后吸附出现饱和值,似于 Langmuir 型吸附等温线。一般,I 型等温线往往反映的是微孔吸附剂(如分子筛、微孔活性炭)上的微孔填充现象,饱和吸附值等于微孔的填充体积。II 型等温线反映非孔性或者大孔吸附剂上典型的物理
技术答疑:放免和酶联免疫试验的区别
先说区别:(1)放射免疫分析(RIA)通过放射活性分子共价交联至抗体或抗原上,免疫反应后测定放射活性分子的放射信号来定量检测相应抗体或抗原等,可用于测定包括病毒、细菌、寄生虫、肿瘤以及小分子药物等的多种抗原和抗体。由于该方法特异性好,灵敏度高,且仪器自动化,操作简便,样品制备简单等,因而自50年代末
免-疫-复-合-物-方-法-检-测-酪-氨-酸-蛋-白-激-酶
实验步骤基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液(新鲜配置并于冰上保存
羊附红细胞体病(Eperythrozoonosis)酶联免疫分析(ELISA)
羊附红细胞体病(Eperythrozoonosis)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中附红细胞体病(Eperythrozoonosis)的含量。 上海裕平生物科技公司高品质ELISA试剂盒供应商,品质卓越,价格实惠,
基础知识版块之氮气吸脱附曲线
多孔材料必备之比表面积测试,接下来将一步步带您了解并掌握BET测试之精髓。今天,我们将着重介绍吸附等温线以及回滞环的类型;鉴于小编对于某些方向也不是很擅长,如果有说得不好的地方,请大家批评指正,谢谢!比表面积是指每克物质中所有颗粒总外表面积之和,国际单位是:m2/g,比表面积是衡量物质特性的重要参量
免-疫-球-蛋-白-G-(IgG)-片-段-的-水-解
一个新的抗体需要片段化的时候往往要进行摸索性的试验。选择反应时间的时候宁可保留部分抗体不被完全降解,这样可以避免蛋白酶过分裂解后导致抗体结合位点的破坏 。实验步骤木 瓜 蛋 白 酶 水 解 IgG 成 Fab 片段摸索性试验此 法 适 用 于 小 鼠(任何亚类)、大鼠、人 、山羊、绵羊、马 、鸡 、
蛋白质分离和分析——免-疫-亲-和-层-析
详细阐述利用亲和层析分离蛋白质的过程,进行蛋白质分析时,需将此规模缩小至微量离心管中进行免疫沉淀过程,对于单一的蛋白质或由相同亚基组成的蛋白质,经单向凝胶电泳后检测到单一的 蛋 白 质 条 带对荧光染色法进行了阐述,它主要用于磷蛋白和糖蛋白的检测。为了确定蛋白质是否是特异性抗原,可采用相对应的抗体进
免-疫-球-蛋-白-融-合-蛋-白-的-构-建
实验步骤 基 本 方 案 1 免疫球蛋白融合蛋白的构建材 料编码靶基因的 D N A展开
染-性-疾-病-动-物-模-型——流-感-病-毒
实验步骤 基 本 方 案 1 流感病毒鼻腔内感染麻醉的小鼠这种方法可以建立所有呼吸道感染(鼻 、气管、肺)。材料6〜8 周 龄 小 鼠(如 B A L B /c)I X l O 2〜I X l O 5 T CID5()/m l 流 感 病 毒(见辅助方案 2 和 4 滴定)1 . 安全固定 6〜8
鸡新城疫抗体检测试剂盒酶联免疫使用说明
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。实验开始前,用去离子水将20×浓缩洗涤液按20倍稀释成工作洗涤液。1.编 号:将样本和标准品
瑞士HAMILTON酶免之星(8通道)ELISASTAR全自动酶免分析仪
批量运行,无人值守;每加样通道可独立进行Y-Z运动;气动置换加样原理,哈美顿ZL“核心技术”CO-RE,以空气隔离控制运动;无尾液、无管路、无系统液、无残留,高精度;加样通道间距可编程,进行等距离(对称)扩展和非等距离(不对称)扩展动作,主要功能:吸样、分配;稀释;混合;汇集;存档;洗涤。多次分配(
染-性-疾-病-动-物-模-型2
淋 巴 细 胞 脉 络 丛 脑 膜 炎 病 毒 感 染 动 物 模 型实验步骤 基 本 方 案 1 全 身 性 感 染 LCM V 小鼠模型材 料已知滴度的 L C M V 病 毒 株(见辅助方案 1 和 2)P B S适当品系小鼠,满足统计学意义所需的数量。麻 醉 剂(如氯胺酮/甲苯噻嗪;附 录
T-C-R-库-的-抗-原-谱-/-免-疫-扫-描-技-术-分-析
实验步骤基 本 方 案 1 人 和 小 鼠TCR受体库多样性的免疫扫描技术分析材 料展
干细胞的鉴定实验——免-疫-电-镜-胶-体-金-标-记-技-术
实验步骤免 疫 电 镜 胶 体 金 标 记 技 术免疫电镜技术是利用抗原抗体特异性结合的原理,在细胞超微结构水平上定位、定性和定量,原位显示抗原大分子的技术。 1971 年 Faulk 等将胶体金标记抗体技术应用到电镜中,开始了免疫电镜胶体金标记技术。该技术的优点是:胶体金颗粒致密,易于辨认 ;定位
神舟十八号出发在即-将开展90余项实(试)验
4月24日举行的神舟十八号载人飞行任务新闻发布会上,中国载人航天工程新闻发言人、中国载人航天工程办公室副主任林西强宣布,经任务总指挥部研究决定,瞄准北京时间4月25日20时59分发射神舟十八号载人飞船,飞行乘组由航天员叶光富、李聪、李广苏组成,叶光富担任指令长。航天员叶光富执行过神舟十三号载人飞行任
酶标仪酶免分析七大步骤
1、将标准品和样品对应的微孔编号,每个标准品和样品做双孔平行,并记录标准品和样品的位置。 2、在标准品孔中加入50l各标准品溶液,酶标仪在各样品孔中加入50l样品溶液。 3、在所有孔中加入50l的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光反应30分钟。 4、小心揭开盖板膜,甩
全自动酶免分析仪的简述
全自动酶免分析仪又称全自动酶免分析系统和全自动酶免工作站,可以全自动完成ELISA试验,包括稀释、样本分配、试剂分配、孵育、洗板、酶标判读、结果打印等全步骤。 全自动——从样本稀释到打印报告都由仪器自动完成,可连接LIS系统 易使用——Windows系统下的中文操作软件,直观易用的人性化界面
全自动酶免分析仪检查项目
TORCH优生优育系列: 弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒…… 肝炎系列: 甲型肝炎、乙肝两对半、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎…… 传染病系列: 艾滋病病毒、梅毒、流腮、结核、破伤风、百日咳、风疹、麻疹…… 肿瘤标记物: 癌胚抗原CEA、甲胎蛋白AFP、糖类抗原系列、铁蛋
酶标仪酶免分析七大步骤
1、将标准品和样品对应的微孔编号,每个标准品和样品做双孔平行,并记录标准品和样品的位置。 2、在标准品孔中加入50l各标准品溶液,酶标仪在各样品孔中加入50l样品溶液。 3、在所有孔中加入50l的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光反应30分钟。 4、小心揭开盖板膜,甩干孔
酶免法检测HBeAg假阳性原因分析
我们在应用酶免法检测乙型肝炎病毒血清学标志物时,发现有时会出现单项HBeAg(+)或HBeAg(+)、抗-HBs(+)等罕见模式。为慎重起见再将标本离心后复检 HBeAg, 结果为阴性。为此我们特做如下实验。取10份 HBeAg 阴性的献血员的不抗凝血液,每份分两管,一管静置0.5h、1h、2h;另
全自动酶免分析仪功能特点
全自动酶免分析仪又称全自动酶免分析系统和全自动酶免工作站,可以全自动完成ELISA试验,包括稀释、样本分配、试剂分配、孵育、洗板、酶标判读、结果打印等全步骤。 全自动——从样本稀释到打印报告都由仪器自动完成,可连接LIS系统 易使用——Windows系统下的中文操作软件,直观易用的人性化界面
酶标仪酶免分析七大步骤
1、将标准品和样品对应的微孔编号,每个标准品和样品做双孔平行,并记录标准品和样品的位置。 2、在标准品孔中加入50l各标准品溶液,酶标仪在各样品孔中加入50l样品溶液。 3、在所有孔中加入50l的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光反应30分钟。 4、小心揭开盖板膜,甩干孔