病毒的培养方法实验——鸡胚培养法
病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤1. 鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察鸡胚是否生活,根据①小血管是否清晰;②胚胎是否活动,观察小鸡的眼睛黑点是否移动。如果鸡胚不动,血管昏暗模糊,变黑或苍白都表示已死亡。2. 接种用铅笔标明天然气室及鸡胚位置,然后在绒毛尿囊膜发育区〈照视时呈现红色〉近胚位处的气室边缘作一记号,定为注射入口。用碘酒消毒注射入口和天然气室端的蛋壳,再用电钻,口腔科用牙钻和小锉刀,于注射入口和天然气室端的蛋壳上锯一小孔,勿伤及卵膜。用大头针通过火焰消毒后刺穿气室端所开小孔的卵膜,......阅读全文
鸡胚器官原基
经验交流(0)实验方法原理切出单一器官或组织,整个置于冷的胰蛋白酶中过夜,去除胰蛋白酶,短暂孵育器官或组织,于培养基中分散细胞,稀释并接种培养物。实验材料受精卵 DBSS
鸡胚成纤维细胞制备实验
实验方法原理用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料9 日龄鸡胚试剂、试剂盒70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布Sorvall
鸡胚成纤维细胞制备实验
实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料 9 日龄鸡胚试剂、试剂盒 70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材 无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布 So
鸡胚成纤维细胞制备实验
基本方案 实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。 实验材料 9
鸡胚成纤维细胞制备实验
基本方案 实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。 实验材料 9
鸡胚成纤维细胞制备实验
实验方法原理 用鸡胚制备培养鸡胚成纤维细胞。实验材料 9 日龄鸡胚试剂、试剂盒 70% 乙醇胰酶/EDTA无添加 MEM 培养基完全 MEM-10 培养基仪器、耗材 无菌解剖剪无菌镊子100 cm2 无菌培养皿10 ml 注射器无菌胰酶消化瓶(带磁力搅拌棒)CO2 培养箱500 ml 烧杯纱布 So
中和试验(neutralization-tests)检测应用
病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力,谓之中和试验。本试验主要用于:(1)从待检血清中检出抗体,或从病料中检出病毒,从而诊断病毒性传染病;(2)用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型;(3)测定抗病毒血清或抗毒素效价;(4)新分离病毒的鉴定和分型,中和试验不仅可在易感的实验
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验
细胞培养物的制备 试剂、试剂盒 HBSS 胰酶溶液 胶原溶液
天然培养基配制实验_鸡血浆的制备
天然培养基包括:血清、组织提取液、如鸡血浆,鸡胎汁等。其中血清是一种仍在广泛应用中的天然培养基,市场有产品出售。而血浆应用较少,因此用时多自己制备。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)实验方法原理鸡血浆为最早用于培养的液体,含有纤维蛋白原和一定的营养成分,当与鸡胚胎汁混合后,能发生凝固
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验
细胞培养物的制备 试剂、试剂盒 HBSS 胰酶溶液 胶原溶液
特殊细胞培养实验_悬浮培养法
实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型,则无须做任何处理,在传代时先做离心处理去除旧培养液,添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时,因其有贴附性,必须进行干扰使细胞不能贴附,才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1. 用大
新生大鼠、新生小鼠及鸡胚背根神经节分散细胞培养
背根神经节(DRG)细胞起源于神经嵴,NGF Levi-Montalcini的实验表明,外原性NGF能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。在体外,分离培养的神经节在NGF存在的情况下,神经突起的生长在一天之内可长达数毫米,因此,利用培养的DRG细胞,进行轴突生长发育的研究,是最为经典而
单细胞培养培养方法介绍平板培养法
将制备好的单细胞悬浮液,按照一定的细胞密度,接种于适当厚度的薄层固体培养基上进行培养的方法,称为平板培养。等量的单细胞培养液与等量熔化(30~50℃)的琼脂培养基(0.6%~1%)混合,迅速铺板于培养皿中,琼脂冷却凝固后,细胞分布均匀地被固定在薄层(厚度大约1mm)培养基中。培养皿用石蜡膜封闭,在2
单细胞培养培养方法介绍看护培养法
有些植物细胞,一旦分离出来,不仅不能分裂、增殖,还可能死亡。看护培养法是用一块愈伤组织来哺育单细胞,使其正常分裂和增殖的培养方法。用微量移液管或小勺,将来自悬浮培养物或愈伤组织的单细胞转移到漂浮的定量滤纸上,滤纸下是旺盛生长的愈伤组织。几天之后,在愈伤组织看护影响下,在一般培养基中沉寂的细胞开始分裂
分离鸡胚背根神经节实验
分离鸡胚背根神经节 试剂、试剂盒 酶溶液 DRG
分离鸡胚背根神经节实验
试剂、试剂盒酶溶液DRG仪器、耗材离心管培养皿解剖显微镜实验步骤1. 解剖前在 15 ml 离心管中配制酶溶液,置 37℃ 水浴特用。2. 解剖胚胎,解剖全过程保持组织湿润。(1) 杀死胚胎,去腿,放于 100 mm 培养皿。(2) 用钝头剪刀沿腹中线作一切口,将皮肤向两侧卷缩至能取出内脏。(3)
分离鸡胚背根神经节实验
试剂、试剂盒 酶溶液 DRG 仪器、耗材 离心管 培养皿 解剖显微镜
分离鸡胚背根神经节实验
试剂、试剂盒 酶溶液DRG仪器、耗材 离心管培养皿解剖显微镜实验步骤 1. 解剖前在 15 ml 离心管中配制酶溶液,置 37℃ 水浴特用。2. 解剖胚胎,解剖全过程保持组织湿润。(1) 杀死胚胎,去腿,放于 100 mm 培养皿。(2) 用钝头剪刀沿腹中线作一切口,将皮肤向两侧卷缩至能取出内脏。(
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验——细胞培养物的制备
试剂、试剂盒HBSS胰酶溶液胶原溶液仪器、耗材解剖显微镜不锈钢深盘Dumom 5 号钳子柳叶刀精细弹簧剪纸巾大烧杯试管架移液管血细胞计数板实验步骤器材准备1. 在培养室实验台上放置下列物品:解剖显微镜表面和透射照明用的显微镜灯泡装有 70% 酒精的带盖不锈钢深盘Dumom 5 号钳子,至少两把柳叶刀
微生物液体培养实验——过夜培养法
液体发酵生产是将发酵原料制成液体培养基,接种微生物, 通过其代谢活动,使发酵原料转化成发酵产品。液体发酵有表面发酵和深层发酵两种方式,其中深层发酵是发酵生产的主要方式。实验材料细菌试剂、试剂盒胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH仪器、耗材接种针培养瓶摇床实验步骤1. 取5 ml 液体培养基加入一支无
初代细胞培养实验——消化培养法
初代培养或原代培养,可以用于:(1)从供体获取组织后的首次培养;(2)组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细胞团或单个细胞,便于细
单细胞培养培养方法介绍微室培养法
人工制造一个小室,将单细胞培养在小室中的少量培养基上,使其分裂、增殖形成细胞团的方法,称为微室培养法,亦称为双层盖玻片法。其操作是将携带1个细胞的1滴培养基置于无菌载玻片上,并用无菌矿物油包围培养基液滴。再分别在培养基液滴的两侧滴1滴矿物油,在每一矿物油滴上放一张盖玻片。然后,把第三张盖玻片放在培养
单细胞培养培养方法介绍细胞悬浮培养法
用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。深层
微生物液体培养实验——大体积培养法
实验材料细菌试剂、试剂盒胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH仪器、耗材接种针培养瓶摇床实验步骤1. 按1:100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中,烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。2. 于37℃,约300 r/min 剧烈揺动培养。注意事项1. 如果不揺动培养细胞,所用烧瓶的体积应比培
特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排
细胞原代培养实验——组织块直接培养法
实验材料孕鼠新生小鼠试剂、试剂盒RPMI1640培养基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素链霉素仪器、耗材培养瓶青霉素瓶废液缸血球计数板蜡盘手术器械大头针离心管小玻璃漏斗三角烧瓶平皿吸管试管移液管无菌纱布无菌眼科剪实验步骤 一、将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死,置75%酒精泡2-3秒钟(时间不能过长、以免
固体培养基上细菌培养实验_辅助法
实验方法原理大肠杆菌的许多菌株在穿刺瓶中可以保存数年,在-70 °C则可以无限期保存。试剂、试剂盒琼脂DMSO仪器、耗材试管平板实验步骤一、穿刺保存1. 在一个耐高压的带有橡皮塞或Teflon盖的气密性小瓶中加人2/3体积穿刺培养基。2. 挑取一个单菌落,反复将接种环深刺人琼脂中。3. 拧松盖
初代细胞培养实验——组织块培养法
实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1. 剪切把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止;2. 摆布用弯头吸管吸取若干小块,置入培养
固体培养基上细菌培养实验_影印法
实验方法原理为了更好地分析单菌落,菌落可以从一个平板转移到另一个平板,而菌落原有的分布形式保持不变。仪器、耗材金属圈绒布平板实验步骤1. 用金属圈将一块无菌的绒布套在影印模具上。无菌的滤纸块或一次性的影印平板均可使用。2. 标记主平板的方向,然后将该平板向下轻轻地压在绒布上。3. 按主平板的方
纯化鸡胚细胞疫苗的定义
中文名称纯化鸡胚细胞疫苗英文名称purified chick embryo cell vaccine;PCEC定 义取鸡成纤维细胞原代培养的狂犬病毒,经β-丙内酯灭活而制成的一类用于接触前或接触后预防狂犬病的冻干制剂。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫预防(三级学科)