单精子分型实验——PCR扩增单精子遗传标记实验
实验方法原理实验材料从琼脂糖薄膜分离的已裂解的精子试剂、试剂盒中和缓冲液10X扩增缓冲液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶轻质液体石蜡油仪器、耗材PCR 仪96 孔板或离心管实验步骤展开......阅读全文
单精子分型实验——－PCR扩增单精子遗传标记实验
实验方法原理实验材料从琼脂糖薄膜分离的已裂解的精子试剂、试剂盒中和缓冲液10X扩增缓冲液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶轻质液体石蜡油仪器、耗材PCR 仪96 孔板或离心管实验步骤展开
单精子分型实验——－－精子分型数据分析
实验步骤一、须考虑的样本含量0.5 cM 的遗传学距离转变为 0.005 的重组率，表明要发生 5 起重组事件，平均需要观察 1000 例 scoreable 减数分裂。根据泊松分布（假定重组事件间相互独立、互不干扰），那么在上述事例中，有约 56% 的可能性观察到至少 5 起重组事件，有约 88%
单精子分型实验——－－基于单体型传递的分离偏斜实验
实验步骤单精子细胞分析非常适用于对单体型父系传递的研究，尤其是在致病单体型相对于正常单体型可能存在优势传递的情形下。Spermseg(http://gakon.uchicago.edu/mepeek/software/spermseg) 就是专门为分析单精子细胞单体型分离而开发的计算机程序。在这些病
基于－PCR－的基因分型实验——用末端标记的引物－PCR－扩增－SSLP
试剂、试剂盒正向和反向引物10 X T4 多聚核苷酸激酶缓冲液ATPT4 多聚核苷酸激酶模板DNA10 X PCR 扩增缓冲液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶轻矿物油2 X 甲酰胺载样液仪器、耗材96孔微量板热循环仪用旧的X光胶片或者 Whatman 3MM 的过滤纸实验步骤展
PCR技术（十五）：个体配子DNA序列的PCR分析
高等生物遗传图谱的构建依赖于选择性杂交后代的分析或者通过家系分析法来计 算连锁关系。对人类而言仅后者是可行的。使用长度多态性限制片段（RFLPS）在构 建人连锁图谱方面已取得长足的进步。为了对带有与已知表现型相关的RFLP标记的基 因进行定位，首先得建立间隔约10CM的遗传标记束（平均1CM等于1％
国内首例单精子冷冻技术试管婴儿诞生
日前，上海交通大学附属上海市第一人民医院成功孕育国内第一例通过单精子冷冻技术受孕、诞生的试管婴儿。诞生的宝宝为男婴，体重4750克，母子平安。据了解，单精子冷冻技术在世界范围内亦属难题，一般的冷冻技术不能保证这类患者精子顺利回收以及复苏后的存活，此次成功孕育婴儿是治疗男性不育领域的重大突破。
单个细胞的PCR分析
单个二倍体细胞在分析单精子以前，Li等人对个体二倍体细胞内的β珠蛋白基因进行过研究。两 个组织培养细胞株用于这些实验。其中一个纯合是镰刀型细胞密码子6（βS）发生突 变，另一个纯合子则来源于正常的βB等位基因。扩增含有密码子6的β珠蛋白片段的 引物，及能够区别这两个特异的等位基因的寡核苷酸探针（AS
单个细胞的PCR分析
单个二倍体细胞在分析单精子以前，Li等人对个体二倍体细胞内的β珠蛋白基因进行过研究。两 个组织培养细胞株用于这些实验。其中一个纯合是镰刀型细胞密码子6（βS）发生突 变，另一个纯合子则来源于正常的βB等位基因。扩增含有密码子6的β珠蛋白片段的 引物，及能够区别这两个特异的等位基因的寡核苷酸探针（A
小鼠睾丸活精子抑制观察实验
实验方法原理睾丸曲细精管中的精原细胞，在垂体促性腺激素的作用下，经2-3次有丝分裂后，部分细胞演变成初级精母细胞。初级精母细胞又经两次成熟分裂后，形成精子细胞，但尚未成熟，在曲细精管中要经过复杂的形态变化才形成蝌蚪状的精子。精子形成后进入附睾，在附睾液的作用下最后成熟并储存在附睾中。因此，剥离睾丸及
小鼠睾丸活精子抑制观察实验
实验方法原理 睾丸曲细精管中的精原细胞，在垂体促性腺激素的作用下，经2-3次有丝分裂后，部分细胞演变成初级精母细胞。初级精母细胞又经两次成熟分裂后，形成精子细胞，但尚未成熟，在曲细精管中要经过复杂的形态变化才形成蝌蚪状的精子。精子形成后进入附睾，在附睾液的作用下最后成熟并储存在附睾中。因此，剥离睾丸
多重－PCR－扩增实验
多重PCR扩增实验可以用于：（1）在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物，或对有多个型别的目的基因进行分型，特别是用一滴血就可检测多种病原体；（2）多重PCR很适宜于成组病原体的检测，如肝炎病毒，肠道致病性细菌，性病，无芽胞厌氧菌，战伤感染细菌及细菌战剂的同时侦检；（3）多种病原体在同一反应管内
PCR基因扩增实验
[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。1．变性：加
多重－PCR－扩增实验
试剂、试剂盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物仪器、耗材 热循环仪实验步骤 一、材料1. 酶和酶缓冲液Taq 聚合酶许多 Taq 聚合酶都可以用；作者发现 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以满足大多数需要. 如果需要提高PCR 产物的特异性，应该使用热启动聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附带的
多重－PCR－扩增实验
实验方法原理 多重PCR（multiplex PCR），其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定。重PCR的特点有：①高效性在同一PCR反应管内同时
PCR扩增标记法探针标记
PCR扩增标记法探针标记 PCR扩增标记法的原理与普通的核酸PCR相同。即Taq DNA多聚酶以DNA为模板，在特异引物引导下，在PCR仪中合成cDNA探针。由于在反应体系中加入一定量的标记dNTP，因此扩增的同时又是一个标记过程。cDNA探针PCR扩增法标记原理
免疫学实验抗精子抗体介绍
抗精子抗体介绍： 男性体内的血睾屏障可使精子与免疫系统隔离，但当此种屏障因疾病或创伤受损时，精子或其可溶性膜抗原逸出，可导致机体产生抗精子自身抗体(AsAb)，从而抑制精子的活动与受精，造成男性不育。正常女性生殖道具有酶系统，能降解进入的精子抗原，但此种酶系统的缺陷可使精子抗原保持完整而刺
单纤维记录实验
实验方法原理 单纤维记录属于一种细胞外的电生理记录技术，主要是利用金属电极，引导与记录周围神经单纤维的传入放电脉冲，是早期用以判定传入纤维类型及脉冲数与不同感受器活动关系的一项经典技术。由于其记录稳定，可以长时间引导单根神经纤维的放电脉冲，足以提供充分的采样数据进行放电序列时间模式的分析。近年来该技
单纤维记录实验
单纤维记录实验 实验方法原理 单纤维记录属于一种细胞外的电生理记录技术，主要是利用金属电极，引导与记录周围神经单纤维的传入放电脉冲，是早期用以判定传入纤维类型
单纤维记录实验
实验方法原理单纤维记录属于一种细胞外的电生理记录技术，主要是利用金属电极，引导与记录周围神经单纤维的传入放电脉冲，是早期用以判定传入纤维类型及脉冲数与不同感受器活动关系的一项经典技术。由于其记录稳定，可以长时间引导单根神经纤维的放电脉冲，足以提供充分的采样数据进行放电序列时间模式的分析。近年来该技术
关于单基因病的分型介绍
1.常染色体疾病（显性和隐形） 致病基因为显性并且位于常染色体上。如软骨发育不全、多指（趾）症、基因位于X染色体上:抗维生素D佝偻症等。亲代有一患者，后带发病率一般为50%（如亲代为纯合体、则后带发病率为100%，但这种情况较少）。 2.常染色体隐形遗传病 致病基因为隐性并且位于常染色体上
中美科学家首次绘制高覆盖度单精子基因图谱
中美科学家首次实现高覆盖度的单个精子全基因组测序，构建了迄今为止重组定位精度最高的个人遗传图谱，并得出基因起始区重组率降低的原因是分子机制而非自然选择的结论。这一结果将有助于遗传缺陷规律的探索。相关成果发表在12月21日出版的《科学》杂志上。 同源染色体之间的重组是产生生物多样性的重要机制
精子10个秘密：精子运动永往直前
精子虽小，秘密不少。12月4日，美国“福克斯新闻网”刊文为我们揭开了精子的一些科学知识。简单了解，就能帮助人们更好地保持生殖健康。这些知识是由美国新泽西州哈肯萨克大学医学生殖研究中心主任大卫·辛恩教授总结出来的。 1.精子产生于睾丸，成熟需要10周。 2.成熟精子储存在位于睾丸上端
科学家利用微流控芯片成功实现单精子高通量捕获
日前，生物学家利用Fluidigm的C1™ Single-Cell Auto Prep System在一张C1微流控芯片上成功捕获分离数十个人类单个精子细胞用于下游的单细胞研究。图1 C1微流控芯片捕获的精子显微镜下成像 采用C1™ Single-Cell Auto Prep System
什么是单因素实验
实验结果的形成一般受多个因素的影响。当将多个因素固定，只控制单一变量的实验。就是单因素实验。
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
在本方案所描述的反应中，差异 DNA 被选择性地扩增。每个实验至少应该有 4 个反应：①已消减的检测 DNA;②未消减的检测者对照（1-c);③反向消减的检测 DNA;④反向未消减的对照（2-c)。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂
PCR基因扩增仪实验原理
技术应用实现快速高效均衡扩增检测由光开关阵列、自聚焦透镜和尾纤准直器及变增益微光O/E装置组成的MEMS有机整体，在以16位单片机为核心的电控装置管理下，能在毫秒级时间内完成多个标本快速均衡扫描检测，避免了机械扫描方式或CCD扫描方式引起的时间滞后或渐晕误差。实现标准样本的PCR热循环扩增及高通量实
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂dNTP 溶液（包含所有 4 种 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶缓冲液PCR 反应缓冲液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相当产品）3. 核酸和寡核苷酸DNA 样品（即方案 2 第 16 步中的各消减样品
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂dNTP 溶液（包含所有 4 种 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶缓冲液PCR 反应缓冲液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相当产品）3. 核酸和寡核苷
双标记签的PCR扩增
试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTEcDNA标签实验步骤实验方案 A 和 B一、连接混合物的 PCR 扩增1.加入 LoTE 使连接混合物的体积增至 20ul。2.按 1% 浓度稀释连接混合物。3.在 50ulPCR 反应中以 Iul 的 1% 稀释后的连接混合物作为模板：4.最后，在 PCR 的反应中
PCR扩增制备带标记探针
实验概要用标记脱氧单核苷酸部分代替PCR反应体系中的脱氧核苷酸（一般是带标记的dUTP代替dTTP），经PCR扩增后标记基团随机搀入扩增产物－DNA探针中。这样使探针浓度高，可检测标记基团量多，灵敏度高，与缺口平移法制备探针相比，具有方便简捷的特点，并且由于具高灵敏度因此在检测低丰度，低拷贝数的目的