用逐步盐透析的方法组装核小体模板实验
实验材料牛胸腺 DNA放射性标记的 DNA纯化的天然核心组蛋白试剂、试剂盒NaClTE 缓冲液仪器、耗材MWCO 透析管实验步骤1. 准备如下的重组混合液：约 8 ug 未标记的超声破碎的牛胸腺 DNA （作为载体 DNA； 加自 1～2 mg/ml 储液）200 000～400 000 cpm 单独标记的 DNA6.4 ug （组蛋白：DNA 为 0.8：1） 或 0.8 ug（组蛋白：DNA 为 1：1） 纯化的天然核心组蛋白（H2A/H2B 和 H3/H4）160 ul 5 mol/L NaCl （终浓度 2.0 mol/L）TE 缓冲液，pH 8.0，至 400 ul。2. 室温 30 min。3. 将重组混合液加入 6000～8000 MWCO 透析袋中。4. 在 1 L 含有 1～2 mol/L NaCl 的 TE 缓冲液，pH 8.0 中透析重组混合物，4℃ 透析 2 h。5. 重组混合液连续在以下新鲜配置的透析缓......阅读全文
模板－DNA－的准备、实验的组织和－PCR－扩增实验
试剂、试剂盒 PCR 缓冲液ddH20基因组 DNAdNTP寡核苷酸引物仪器、耗材 离心机和转子丙烯酸防护板过滤阻挡吸头多道移液器PCR 仪托盘 固定器装置底座管盖小管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂含 15 mmol/LMgCl2 的 10XPCR 缓冲液 (GeneAmpPCR 缓冲液
模板－DNA－的准备、实验的组织和－PCR－扩增实验
可以用各种方法分离基因组 DNA, 主要决定于初始材料的种类（血液还是组织）和数量。所有制备的 DNA 都应该储存于 pH8.0 的 TE 缓冲液中并装在灭菌的 Eppendorf 管内。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒PCR 缓冲液ddH20基因组 DNA
以双链－DNA－为模板的体外诱变：用－DpnⅠ选择突变体实验
实验材料 带 hsdR17 基因型的感受态大肠杆菌菌株试剂、试剂盒 ATP含有四种 dNTF 的混合溶液诱变缓沖液NaOHNaACTE噬菌体 T4DNA 连接酶噬菌体 T4 多核苷酸激酶DpnI 限制性内切酶热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶寡核苷酸引物质粒 DNA仪器、耗材 带障蔽的自动微量移液器用
以双链－DNA－为模板的体外诱变：用－DpnⅠ选择突变体实验
本方案和方案 4 是以变性质粒 DNA 为模板，使用两条寡核苷酸和高保真聚合酶引导 DNA 合成。本方案中，经多轮热循环全长双链质粒 DNA 将以线性形式扩增，产生一种 DNA 双链上带交错缺口的突变质粒（Hemsleyetal.1989)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J
用于PCR的模板DNA制备实验——改进的石蜡切片－DNA－提取方法
实验步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上，常规烘片，脱蜡，水化，蒸馏水清洗，无菌蒸馏水浸泡，取出晾至半干。2. 无菌尖头刀片刮下，放入 300～900 μl 组织裂解液中，并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K（PK）10～15 μl，封口膜封口，置 55℃ 3 h 以
概述透析的方法过程
自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大
华人科学家Nature公布核小体分布图
来自美国西北大学分子生物学系，统计系等处的研究人员发表了题为“A map of nucleosome positions in yeast at base-pair resolution”的文章，通过建立了一种新方法，在全基因组范围内分析核小体分布的位置，这将有助于揭示体内与转录相关的核
Nature：研究者揭示FACT蛋白操纵核小体机制
众所周知，包装DNA的组蛋白（H2A、H2B、H3和H4）需要分子伴侣。FACT（Facilitates Chromatin Transcription）蛋白是一类至关重要的组蛋白伴侣（histone chaperone）。将基因组DNA组装成核小体深刻地影响了真核生物中所有DNA相关过程。FA
研究发现细胞内核应激小体动态组装参与调控急性炎症反应
近日，中国科学院分子细胞科学卓越创新中心陈玲玲研究组解析了热休克等刺激条件下诱导产生的无膜亚结构——核应激小体的精细层级结构和动态组装过程，并揭示核应激小体通过拉近与基因的三维距离来促进NFIL3等基因转录。NFIL3上调会抑制炎症因子表达，进而参与调控急性炎症反应，该过程与脓毒血症患者生存率呈
透析袋和透析膜处理方法
使用前处理： 1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。 2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。 3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。 4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。 5. 冷却后，存放
利用纳米孔测序技术揭示基因表达的染色质调控基础
作为染色质的基本单元，核小体由大约147 bp的DNA和组蛋白八聚体（H2A, H2B, H3和H4）组成。核小体的动态定位和折叠组织会产生两种不同的染色质状态：“开放”（open）和“闭合”（closed）。核小体的定位和染色质状态的动态变化对以DNA为模板的生物学过程（比如，转录、DNA复制
核污水排放后引发抢盐热潮，中盐集团回应
中盐集团发布关于保障食盐市场供应的声明，具体内容如下。 受日本核污染水排海影响，我国部分市场发生食盐抢购现象。中盐集团作为我国盐行业唯一中央企业，保障食盐市场供应和质量安全是我们的首要责任。针对此次市场波动，特做如下声明: 我国对食盐实行定点生产管理，我国食盐来源主要分为三类：井矿盐、湖盐、海盐
人类细胞中巴氏小体的观察实验
实验方法原理 在性染色体发生畸变时,XXX核型的女性体细胞中可观察到两个巴氏小体(图12-1),即除一条X染色体具有正常活性外,其余的X染色体均失活,而在具47,XXY核型的男性体细胞中,也可观察到巴氏小体。对巴氏小体的研究有助于揭示X连锁基因的调控机理、性染色体的进化过程以及解释性染色体畸变患者的
人类细胞中巴氏小体的观察实验
M.L.Barr等人首先发现雌猫的神经细胞间期核中有一个深染的小体,而雄猫却没有。由于这个小体和性别及X染色体数目有关,所以称为X染色质,也叫做巴氏小体(Barrbody)。之后在其他雌性哺乳动物细胞和人类女性的许多细胞中发现有同样的小体。现在一般认为X染色质是两个X染色体之一在间期时发生异固缩而形
研究揭示H2A.Z染色质组装的机制
1月30日，《美国国家科学院院刊》（PNAS）在线发表了中国科学院生物物理研究所周政课题组的研究论文“Role of a DEF/Y motif in histone H2A-H2B recognition and nucleosome editing”。该研究揭示了SWR复合物亚基Swc5特异
研究揭示NuA4乙酰化核小体的动态机制
中国科学院生物物理研究所朱平研究组与中国科学院物理研究所朱洪涛、陆颖研究组合作，揭示了酵母中组蛋白乙酰转移酶NuA4对核小体进行乙酰化的动态机制。相关论文3月18日发表于美国《国家科学院院刊》（PNAS）。 组蛋白乙酰化是一种重要的表观遗传修饰，参与染色质结构调控、基因转录激活以及DNA损伤修
上海生科院提出改进的核小体精确定位算法iNPS
9月18日，国际学术期刊Nature Communications 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院计算生物学研究所韩敬东组的最新研究论文Improved Nucleosome Positioning Algorithm iNPS for Accurate Nucleosome Posit
Science：结构上揭示核小体依赖性的cGAS抑制机制
在一项新的研究中，来自美国北卡罗来纳大学教堂山分校的研究人员首次确定了先天免疫系统中一种名为cGAS的关键DNA感应蛋白与核小体结合在一起时的高分辨率结构，其中核小体是细胞核内最重要的DNA包装单位。相关研究结果于2020年9月10日在线发表在Science期刊上，论文标题为“Structura
血液的化学检验项目中性粒细胞核鼓槌小体介绍
中性粒细胞核鼓槌小体介绍： 中性粒细胞核鼓槌小体是细胞上的一种球形或椭圆形突起。其检查方法是采周围血做涂片，甲醇液固定，吉姆萨染色，油镜下观察。一般女性多核白细胞的核鼓槌出现率为2%-3%，而男性几乎没有。中性粒细胞核鼓槌小体正常值： 男性：1.5%中性粒细胞核鼓槌小体临床意义： 鉴别两性畸形
用于－PCR－的模板－DNA－制备实验——含血标本
实验步骤1. 3 ml 外周血或 1 ml 骨髓液放入含 50 μl 0.5mol/L EDTA 的无菌离心管（15 ml 管）中。2. 2000 r/min 离心 10 min。吸去血浆，用指弹匀剩余的有核细胞和红细胞，加入红细胞溶解液 10 ml 并混匀，常温下放置 30 min。红细胞溶解液配
用于－PCR－的模板－DNA－制备实验——冰冻片
实验步骤1. 将 10 μl 冰冻切片直接放入含组织裂解液的离心管中。2. 无菌尖头刀片刮下，放入 300～900 μl 组织裂解液中，并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K（PK）10～15 μl，封口膜封口，置 55℃ 3 h 以上。3. 其间用指轻弹离心管以利裂解。若有沉淀，再加入 5～10 μ
自组装多孔MOF单层膜可用于盐差发电
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/10/510352.shtm近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员卿光焱团队开发了一种带正电的自组装金属有机框架（MOF）纳米颗粒单层（SAMM）膜。在保证膜完整性的前提下,实现了对SAMM的功能化修饰，并证
间期染色质的主要类型和功能介绍
间期染色质按其形态特征、活性状态和染色性能区分为两种类型：常染色质和异染色质。按功能状态的不同可将染色质分为活性染色质和非活性染色质。 常染色质常染色质是指间期细胞核内染色质纤维折叠压缩程度低，相对处于伸展状态，用碱性染料染色时着色浅的那些染色质。在常染色质中，DNA组装比为1/2 000~1/1
揭示H2A.Z染色质组装的新机制
1月30日，《美国国家科学院院刊》（PNAS）在线发表了中国科学院生物物理研究所周政课题组的研究论文“Role of a DEF/Y motif in histone H2A-H2B recognition and nucleosome editing”。该研究揭示了SWR复合物亚基Swc5特异
汞盐、亚汞盐鉴别实验
(1) 取供试品，加氨试液或氢氧化钠试液，即变黑色。(2) 取供试品，加碘化钾试液，振摇，即生成黄绿色沉淀， 瞬即变为灰绿色,并逐渐转变为灰黑色。
同济大学研究揭示胚胎早期核小体重排规律
在封面设计中，DNA缠绕在灯笼上象征着核小体，斑马鱼胚胎发育过程也以艺术的形式呈现。 2月25日，记者从同济大学获悉，该校生命科学与技术学院张勇课题组与刘小乐课题组，在国际上首次揭示了脊椎动物在胚胎早期发育过程中的核小体重排规律，并对核小体定位的表观遗传预编程作用进行了探讨。相关成果已作为
著名学者庄小威Nature解析核小体重塑
来自哈佛大学的研究人员在新研究中探究了ISWI染色质重塑因子协调重塑核小体的机制。研究结果发表在6月29日的《自然》（Nature）杂志上。 文章的通讯作者之一是著名的华裔女科学家，哈佛大学庄小威（Xiaowei Zhuang）教授，庄教授早年毕业于中国科技大学少年班，34岁的时候就成为了哈佛
透析器的使用方法
1.血液透析器与导管的联接：自完整的包装袋内取出血液透析器，并把动脉管路，静脉管路以及滤液管路接在透析器相应的接管上。把接好各种管道的透析器安装于透析器的夹具上。 2.用 生理盐水（1000mL以上）充入器中，以清除透析器中残留环氧乙烷气体和器中和导管中的气泡。 3.用含肝素（1000 IU
单分子力谱研究揭示染色质纤维的关键中间态结构
单分子技术是研究生物分子机器动态结构和功能的重要手段。中国科学院物理研究所软物质物理重点实验室从2002年开始逐步建立起以磁镊和荧光光谱为主的单分子研究体系，在DNA凝聚（JACS 2006，PRL 2012）、DNA与抗癌药物作用（NAR 2009, PRE 2015）、端粒四联体DNA折叠（
染色质的组装模型介绍
人的每个体细胞所含DNA约6×109bp分布在46条染色体中，总长达2米，平均每条染色体DNA分子长约5厘米，而细胞核直径只有5~8微米，这就意味着从染色质DNA组装成染色体要压缩近万倍，相当于一个网球内包含有2千米长的细线。 多级螺旋模型由DNA与组蛋白组装成核小体，在组蛋白H1的介导下核小体彼此