DNA核酸浓度的测定实验

DNA核酸浓度的定量实验可以用于(1)对纯化的PCR产物进行浓度测定;(2)对纯化的酶切产物进行浓度测定;(3)对提取的质粒进行浓度测定。实验方法原理寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA可以定量溶于缓冲液,构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收峰为260nm。窄光带紫外分光光度计,长260nm.,比色杯光径1cm,1个吸光度值(1A)相当于50ug/ml双螺DNA,40ug/m1单螺旋DNA或RNA),20 ug/ml寡核苷酸。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。实验材料样本DNA试剂、试剂盒双蒸水仪器、耗材紫外分光光度计比色杯实验步骤1. 取DNA溶液10ul,加双蒸馏水600ul(即稀释61倍)。2. 用双蒸馏水调零,测定260nm和......阅读全文

核酸的定量测定实验——二苯胺法

实验方法原理DNA 分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解, 产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊醛, 后者与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物, 其反应为: 蓝色化合物在595 nm 处有最大吸收峰, 且DNA 在40~400 μg 范围内时, 光密度与DNA 浓度呈正比。在反应液中加入少量乙

赤霉素类物质浓度测定实验

实验方法原理 定量测定赤霉素类物质有许多方法:如大麦糊粉层α-淀粉酶诱导形成法,酸模叶片保绿法,小麦黄化苗第一叶片基部切断伸长法,水稻幼苗第二叶叶鞘伸长的“点滴法”等。其中以水稻幼苗法较好。这一方法利用了赤霉素刺激幼嫩植物节间伸长的重要生理特性。在一定浓度范围(0.1-100pp M )内,叶鞘

赤霉素类物质浓度测定实验

实验方法原理:定量测定赤霉素类物质有许多方法:如大麦糊粉层α-淀粉酶诱导形成法,酸模叶片保绿法,小麦黄化苗第一叶片基部切断伸长法,水稻幼苗第二叶叶鞘伸长的“点滴法”等。其中以水稻幼苗法较好。这一方法利用了赤霉素刺激幼嫩植物节间伸长的重要生理特性。在一定浓度范围(0.1-100pp M )内,叶鞘

赤霉素类物质浓度测定实验

定量测定赤霉素类物质有许多方法:如大麦糊粉层α-淀粉酶诱导形成法,酸模叶片保绿法,小麦黄化苗第一叶片基部切断伸长法,水稻幼苗第二叶叶鞘伸长的“点滴法”等。其中以水稻幼苗法较好。这一方法利用了赤霉素刺激幼嫩植物节间伸长的重要生理特性。在一定浓度范围(0.1-100pp M )内,叶鞘的伸长与浓度成正比

DNA浓度怎么测

一般最简单的方法是用比如nanodrop这样的紫外分光法进行检测,还有用染料法的比如qubit,还有荧光定量的,但是这个是要特定DNA的。

荧光测DNA浓度

Steve HahnLast updated 9/30/98This Dye measures DNA concentration using a fluorescent dye which binds only double stranded DNA. The fluorescence of th

核糖核酸酶(胰腺)的测定实验

实验方法原理RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2',3'-环状磷酸中间体。实验材料酶样品试剂、试剂盒乙酸缓冲液乙酸铀酰-高氯溶液RNA(酵母)溶液核酸核酸酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「

核酸的定量测定实验——地衣酚显色法

实验方法原理RNA 与浓盐酸共热时发生降解, 产生的核糖又可转变为糖醛, 在FaCl3 或CuCl2催化下, 糖醛与3 , 5-二羟基甲苯( 地衣酚、苔黑酚)反应形成绿色复合物, 该产物在670 nm 处有最大吸收。当RNA 浓度为20~250 μg/ ml 时光密度与RNA 浓度成正比。实验材料蛋

核糖核酸酶(胰腺)的测定实验

基本方案             实验方法原理 RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2'

CT-DNA-沙眼衣原体核酸测定-是什么意思

  沙眼衣原体是一种微生物,目前发现它有15个血清型,不同的血清型能引起不同的疾病。分为3个生物型,即小鼠生物型(biovarmouse)、沙眼生物型(biovartrachoma)和性病淋巴肉芽肿生物型。后二者与人类疾病有关。用间接微量免疫荧光试验,沙眼生物型又分A、B、Ba、C、 D、Da、E、

DNA的限制性核酸内切酶酶切实验和连接实验

一)酶切实验  本实验学习用限制性核酸内切酶(Restriction endonuclease)EcoRI 切割λDNA及质粒pBR322DNA,琼脂糖凝胶电泳后观察酶切结果。   【原理】   λDNA 是大肠杆菌的一种温和噬菌体DNA,双股线状,分子大小为48.5 kb。 EcoRI酶可识别DN

用-Hoechst33258-测定DNA实验

实验方法原理在缓冲液中匀浆细胞或组织,继用超声处理。以一定量的细胞悬液与Hoechst33258混匀,测定其荧光。实验步骤材料非无菌:缓冲液:0.05mol/LNaPO4;2.0mol/L NaCl,pH7.4 , 含 2 X l0-3 mol/L EDTA 。Hoechst33258;缓冲液中,1

用-Hoechst33258-测定DNA实验

            实验方法原理 在缓冲液中匀浆细胞或组织,继用超声处理。以一定量的细胞悬液与Hoechst33258混匀,测定其荧光。 实验步骤 材料非无菌:缓冲液:0.05

实时荧光定量PCR可以用来精确测定DNA浓度吗

实时荧光定量PCR可以用来精确测定DNA浓度吗实时荧光定量PCR不是用来测浓度的,可以用来做基因的拷贝数。但是如果你的产物单一,有相应的标准品,也是可以测浓度的,浓度的准确性和你的标准曲线相关。实时荧光定量PCR:实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitati

旋光仪测定液体的浓度实验报告

1、 实验仪器清单WXG-4圆盘旋光仪、葡萄糖溶液样品试管2、 实验内容和教学要求1)光路图和三分视场形成原理图:图1 光路图图2 三分视场形成原理图2)旋光仪的使用方法:读数方法(注意量程和精度),三分场均匀暗的调节方法,试管的取放方法。3)数据处理方法:作图法(包括定标、作直线、取点以及不确定度

旋光仪测定液体的浓度实验报告

实验19 旋光仪测旋光液体的浓度1实验目的1) 观察光的偏振现象,加深对光偏振的认识;2) 了解旋光仪的结构及测量原理;3) 掌握旋光仪测定旋光液体浓度的方法。2 实验仪器WXG-4圆盘旋光仪、葡萄糖溶液样品试管3 实验原理3.1偏振光的获得与检测1)偏振光的获得:使自然光通过偏振片就形成只有一个振

测定核酸的方法

琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶具有较大的孔径,因而适用于对较大分子的电泳分离,目前琼脂糖电泳凝胶法已成为核糖核酸和脱氧核糖核酸检测、分离和性质研究的标准手段。核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分子的大小以及核酸分子的形状三个因素。一般来说,较低浓度的琼脂糖凝胶适合于较大分子物质的电泳分

游离核酸微量DNA样本的检测

近年来,DNA分析技术广泛应用于医学、法学、环境等诸多领域,成为科学研究的一大重点。例如产前诊断及法医检测等首先进行微量DNA 提取,然后进行PCR扩增验证,也有一些研究单位会对一些古老样本进行DNA提取,同样做PCR扩增验证。它们的相同之处在于,用于分析的样本DNA含量可能极其有限,稍有遗损就可能

Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验

实验方法原理 Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (Folin-酚上级),产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色,这种深蓝色 的复合物在745~750 nm 处有最大的吸收峰,颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比,可根

Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验

实验方法原理Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (Folin-酚上级),产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色,这种深蓝色 的复合物在745~750 nm 处有最大的吸收峰,颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比,可根据 750

Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验

Lowry检测法             实验方法原理 Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (F

cDNA浓度的测定

理论上讲,等质量是必要的。但是就反转录结果而言,里面的成分太多,测量浓度的误差比较大。我们实验室一般都是测量RNA的浓度,然后取等量RNA、过量oligodT做充分反转录,再取等量反转录体系做PCR。另外,我看你用条带定量?这样很不准确,因为你也不知道PCR多少循环后达到饱和。比方说,组间差8倍,差

cDNA浓度的测定

理论上讲,等质量是必要的。但是就反转录结果而言,里面的成分太多,测量浓度的误差比较大。我们实验室一般都是测量RNA的浓度,然后取等量RNA、过量oligodT做充分反转录,再取等量反转录体系做PCR。另外,我看你用条带定量?这样很不准确,因为你也不知道PCR多少循环后达到饱和。比方说,组间差8倍,差

盐酸浓度的测定

30%是质量百分比(g/g) 其实和氢氧化钠滴定的总酸度是一回事。因为它是用氢氧化钠滴定的。取本品约3ml,置贮有水约20ml并已精密称定重量的具塞锥形瓶中,精密称定,加水25ml与甲基红指示液2滴,用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定。每1ml氢氧化钠滴定液(1mol/L)相当于36.46mg的H

DNA琼脂糖核酸电泳

            实验方法原理 带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网

DNA琼脂糖核酸电泳

1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子;2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml) ;3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染料

DNA琼脂糖核酸电泳

核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,可以用于:(1)核酸探针;(2)核酸扩增;(3)序列分析等技术。实验方法原理带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,浓度不同

FFPE样本核酸(DNA/RNA)制备

福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织切片的存档代表了珍贵且来源广泛的生物医学研究材料。随着越来越多的研究人员转向 FFPE 样品的分子分析,开发特定的操作步骤,考虑这些样品的独特性质就变得越来越重要。QIAGEN 在 FFPE 样本纯化及下游检测整个流程中都提供完善的解决方案。QIAamp

NaCl离心法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸实验

            实验方法原理 常规的质粒 DNA 制备物中都会不同程度地污染有来自宿主菌基因组或质粒断裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。尽管它们的分子质量不大,但数量多,会对制备物中 DNA 片段 3' 和 5' 端的总量产生明显影响。

NaCl离心法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸实验

常规的质粒 DNA 制备物中都会不同程度地污染有来自宿主菌基因组或质粒断裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。尽管它们的分子质量不大,但数量多,会对制备物中 DNA 片段 3' 和 5' 端的总量产生明显影响。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理常规的质粒 DN