DNA核酸浓度的测定实验

DNA核酸浓度的定量实验可以用于(1)对纯化的PCR产物进行浓度测定;(2)对纯化的酶切产物进行浓度测定;(3)对提取的质粒进行浓度测定。实验方法原理寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA可以定量溶于缓冲液,构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收峰为260nm。窄光带紫外分光光度计,长260nm.,比色杯光径1cm,1个吸光度值(1A)相当于50ug/ml双螺DNA,40ug/m1单螺旋DNA或RNA),20 ug/ml寡核苷酸。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。实验材料样本DNA试剂、试剂盒双蒸水仪器、耗材紫外分光光度计比色杯实验步骤1. 取DNA溶液10ul,加双蒸馏水600ul(即稀释61倍)。2. 用双蒸馏水调零,测定260nm和......阅读全文

DNA核酸浓度的测定实验

实验方法原理 构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收峰为260nm。窄光带紫外分光光度计,长260nm.,比色杯光径1cm,1个吸光度值(1A)相当于50ug/ml双螺DNA,40ug/m1单螺旋DNA或RNA),20ug/ml寡核苷酸实验材料

DNA核酸浓度的测定实验

DNA核酸浓度的定量实验可以用于(1)对纯化的PCR产物进行浓度测定;(2)对纯化的酶切产物进行浓度测定;(3)对提取的质粒进行浓度测定。实验方法原理寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA可以定量溶于缓冲液,构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A280 的比值,来测定所得核酸的纯度。实验材料 DNA试剂

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

            实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A

qubit测定dna浓度

Qubit是一种常用于生物分子测量的荧光分析系统,其中包括测定DNA浓度的工具。下面是使用Qubit测定DNA浓度的步骤:准备样品:将待测DNA溶解在缓冲液中,并且保证样品均匀混合。打开Qubit软件并选择合适的试剂盒:Qubit软件中有许多不同种类的试剂盒可供选择,因此需要根据实验需要选择合适的试

核酸染色实验——DNA

核酸是细胞内的一种大分子化合物,核酸不仅存在于细胞核内,也存在于细胞质中,动物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。经过染料和化学试剂,能够清楚地显示 DNA 和核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)物质。实验方法原理在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同.2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好.3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏.4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同.2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好.3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏.4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同。2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好。3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏。4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

对比法测定DNA浓度

Plate assay for determination of DNA concentrationA fairly accurate, rapid assay of DNA concentration can be obtained by UV visualization of samples s

光法测定DNA浓度

Measurement of DNA concentration using PanVera fluorescence assaySteve HahnLast updated 9/30/98This Dye measures DNA concentration using a fluorescent

核酸浓度测定的五种方法

  1、定磷法  核糖核酸(RNA)含磷量约为9.5%,脱氧核糖核酸(DNA)含磷量约为9.2%,采用定磷法可准确测出磷含量,进而折算出样品中核酸含量。  原理:在酸性条件下,定磷试剂中的钼酸铵以钼酸形式与样品中的磷酸反应生成磷钼酸,当还原剂存在时磷钼酸立即转变为蓝色的还原产物——钼蓝;钼蓝最大的刚

核酸的定量测定实验

实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波长处。一般在260 nm 波长下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值为0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值约为0.020 , 故测定

核酸的定量测定实验

紫外分光光度法 地衣酚显色法 二苯胺法             实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外

紫外吸收法测定核酸浓度与纯度

实验概要学习测定DNA或RNA的浓度与纯度。实验原理核酸分子中的碱基集团含有共轭双键,它们对紫外光有强烈的吸收。核酸的最大吸收波长在260 nm,吸收低峰在230 nm。可以利用核酸的这一特性对其浓度进行测定。在波长260 nm下,A260=1时,双链DNA的含量为50 µg/ml,单链DN

核酸纯度、浓度与分子量测定实验——Ethidium-bromide染色法

实验方法原理利用一系列不同浓度的DNA标准溶液(0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml),或已知浓度的DNA marker,和未知浓度DNA样品一起进行琼脂糖凝胶电泳,以EB染色后,在凝胶图象分析仪上观察,比较标准浓度及未知浓度的亮度,来求取DNA 的含量;比较DNA样品与DNA

为什么要测定dna的浓度和纯度

首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些.它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器.核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA.核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm.每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同.

Biochrom分光光度计测定核酸的浓度

        DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02。当OD260=1时,DNA浓度约为50μg/m

Biochrom分光光度计测定核酸的浓度

DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02。当OD260=1时,DNA浓度约为50μg/ml;RNA浓度约

植物染色体DNA的抽取及浓度测定

目的意义DNA是遗传信息的载体和基本遗传物质,它在遗传变异、代谢调控等方面起着重要作用,是分子生物学和基因工程研究的对象,但无论是研究植物DNA的结构和功能,还是开展外源DNA的转化、转导的研究,首先要做的就是从植物组织中提取天然状态的高分子量的纯化DNA。因此,本实验的目的是学习植物基因组DNA提

核酸纯度、浓度与分子量测定实验——紫外分光光度法

核酸纯度、浓度与分子量测定可应用于:(1)分析核酸;(2)为进一步实验提供样品。实验方法原理溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以

DNA的Tm值测定实验

紫外分光光度法             实验方法原理 当DNA 的稀盐溶液加热到80~100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生

DNA的Tm值测定实验

实验方法原理 当DNA 的稀盐溶液加热到80~100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生改变: 260 nm 区紫外吸收值增高(增色效应) , 粘度降低, 浮力密度降低等。DNA 的变性的特点是爆发式的, 变性作用发生在一个很窄的范围。通常把D

DNA结合蛋白测定实验

本实验主要用于检测粗制提取物中序列特异性的DNA结合蛋白。实验方法原理本分析方法是一种简单、快速和极为灵敏的用于检测粗制提取物中序列特异性的DNA结合蛋白的方法。在电泳时,与末端标记的DNA片段特异结合的蛋白质阻滞了片段的迁移,因而产生对应于蛋白-DNA复合物的清晰电泳条带。实验材料质粒DNA试剂、

DNA结合蛋白测定实验

实验材料 质粒DNA试剂、试剂盒 dNTPDNA聚合酶Klenow酶TETAE溴化乙锭TEMED过硫酸铵BSA仪器、耗材 培养箱离心管实验步骤 1.  用一种或多种限制性内切酶在100 μl 体积中消化10 μg 质粒人,产生25~100 bp  的含有结合位点的DNA片段,并至少有一端是5’突出的

DNA结合蛋白测定实验

            实验方法原理 本分析方法是一种简单、快速和极为灵敏的用于检测粗制提取物中序列特异性的DNA结合蛋白的方法。在电泳时,与末端标记的DNA片段特异结合的蛋白质阻滞了片段的迁移,因而产生对应于蛋白-DNA复合物的清晰电泳条带。

核酸提取和核酸浓度、纯度的原理及方法

  【实验原理】  DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本谈不上进行分子生物学方面的实验。在DNA提取过程中应做到:1、根据不同研究需要,保证结构的相应

核酸浓度检测指南(一)

 对于从事 DNA、RNA 或蛋白质相关研究的科学家而言, 经常需要对起始核酸/蛋白样品进行质量评估,未进行样品质控将可能导致数据差错,得出错误结论。如 qPCR 等分子生物学技术沿用较小体积样品,因此这些样品的质量至关重要,且有的应用(如: NGS 的文库制备)需要进行准确的浓度检测以进行后续的均

核酸鉴定方法之浓度

核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要,因此,对纯化后的核酸进行鉴定也是*的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括:浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 (1)紫外分光光度计:原理:由于核酸中的碱基都