AFLP技术
实验概要本实验介绍了AFLP（amplified fragment length polymorphism）技术。AFLP是一种建立在PCR基础上的限制性片断长度多态性分析，是一种重要而有效的分子标记技术。主要试剂AFLP试剂盒、测序胶、银染试剂主要设备PCR仪、银染设备实验步骤1. 总DNA提取(略)2. DNA酶切 DNA模板（200ng/ul） 1.25ul Mse I &nb......阅读全文
濒危植物滇桐的保护生物学研究取得新进展
滇桐（Craigia yunnanensis）隶属于椴树科（Tliaceae）滇桐属（Craigia W.W. Smith & W. E. Evans），是一落叶乔木树种，具有重要经济价值。滇桐属为一古老的第三纪孑遗属，作为滇桐属这一寡种属的主要树种之一，现存的滇桐居群是研究滇桐属
南京农业大学PNAS发现水稻新基因
来自南京农业大学、江苏省农业科学院、中国水稻研究中心等处的研究人员发现了一个可以影响水稻品质，提高水稻产量的新基因，有望将其应用于培育新的水稻品种。这一研究成果发表在《美国科学院院刊》(PNAS)上。 来自南京农业大学的张红生教授、中科院遗传与发育研究所的李家洋院士以及中国水稻研究所的钱前
如何提高PCR特异性
一天P几百管的人可能不用担心条带有没有，而对于刚入门分子生物学的人来说，PCR能看到条带，能看到特异性好的一条明亮的带就是入门zui大的欣慰。师姐会告诉你，引物设计很重要，不能有二聚体和发夹结构；师兄也会和你说退火温度很重要。提高PCR特异性可谓是仁者见仁，智者见智。以下搜集了网友们的讨论，精华汇
分子标记
内容：一、遗传标记 二、DNA分子标记 三、染色体原位杂交 四、DNA分子标记的应用 长期以来，植物育种中选择都是基于植株的表型性状进行的，当性状的遗传基础较为简单或即使较为复杂但表现加性基因遗传效应时，表型选择是有效的。但水稻的许多重要农艺性状为数量性状，如产量等；或多基因控制的质量性状，如抗性等
电泳仪选购参考
电泳是指带电粒子在电场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的不同，在电场中运动速度不同，根据上述特征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析，或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备，在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。通常电泳仪不能空载使用，应仔
九大测序平台对比（一）
1.sanger企业：Life Technology推出时间：1977年发明，1986年第一台商业化测序仪主流型号：3730XL样品要求：PCR产物：浓度≥50ng/ul 体积≥10ul；质粒：含量≥5ug；菌液：体积≥1ml。测序原理:双脱氧链终止法：Sanger法测序的原理就是，每个反应含有所有
31项与免疫学有关的分子生物学实验技术（二）
十二、大肠杆菌感受态细胞（E.coli DH5α）制备E.coli DH5α制备主要操作步骤：1）挑取受体菌（DH5或DH10B）的单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜（约16小时）；2）取1ml过夜培养物转接于100ml LB培养基中，在37℃摇床上剧烈振荡培养约2.5-3小时（250-30
菌种保藏中的细菌鉴定方法
作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段.2003年7月23日,科技部在北京召开了“国家科技基础条件平台建设”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平台建设工作.国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个
菌种保藏中的细菌鉴定方法
作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段.2003年7月23日,科技部在北京召开了“国家科技基础条件平台建设”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平台建设工作.国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个
植物RAPD分析技术
RAPD（Randomly Amplified Polymorphic DNA），意为随机扩增多态性DNA，是利用PCR技术进行随机扩增，把扩增的DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据DNA条带的多态性来反应模板DNA序列上的多态性。RAPD同AFLP、SSR等分子标记一样都基于PCR扩增，只是RAPD
植物RAPD（随机扩增多态性DNA）分析技术
RAPD（Randomly Amplified Polymorphic DNA），意为随机扩增多态性DNA，是利用PCR技术进行随机扩增，把扩增的DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据DNA条带的多态性来反应模板DNA序列上的多态性。RAPD同AFLP、SSR等分子标记一样都基于PCR扩增，只是RA
如何识破各种污染拯救细胞？（二）
01. 即用型细胞培养中支原体检测PCR试剂盒 检测结果如图： 大家可自行根据检测结果进行对比。02. 支原体处理试剂 03. 支原体预防喷雾 支原体检测/处理/预防全套解决方案 表3. 产品列表 中文名称 货号
探针的非放射性标记技术1
核酸探针是指能与特定核酸序列发生特异性互补的寡核苷酸链。核酸探针有双链DNA探针、单链DNA 探针、RNA探针和寡核苷酸探针。特异性探针来源于目的核酸的酶切片断、dd-PCR等差异显示中出现的差异片断、AFLP、RFLP、RAPD、SSR、CFLP等标记实验中出现的特异性基因标记片断。可以通过人
SSR分子标记技术及其在构建玉米DNA指纹库上的应用2
2玉米DNA指纹库的构建2． 1利用SSR分子标记构建玉米DNA指纹库目 前，国内外对玉米种质鉴定采用的遗传标记仍以形态标记为主，参考同工酶和种子贮藏蛋白标记。但形态标记的表现受环境影响较大，鉴定工作量大，周期长，受季 节限制。同工酶和种子贮藏蛋白标记多态性不够丰富，同工酶还存在组织和器官特异性，取
重测序构建芝麻超高密度图谱以及花序基因的定位
连锁分析寻找QTL位点，是最经典的性状定位方法。而遗传图谱的密度是限制定位精度的其中一个方面。目前，构建图谱的方法已从基于传统的SSR、AFLP等基于片段长度多态性的分子标记，过渡到了基于SNP芯片或NGS测序的SNP分子标记。NGS测序最常用的是简化基因组测序和全基因组重测序，区别在于标记数量的多
昆明植物所干热河谷植物生物地理学研究取得进展
近日，在国家973项目、国家自然科学基金项目和云南省自然科学基金项目的联合支持下，中国科学院昆明植物研究所孙航研究员主持的横断山区干热河谷重要物种生物地理学研究再次取得重要进展。 伴随着青藏高原几次快速的隆升，横断山区地貌也发生了显著的变化。这使得位于该地区的中国西南地区主要河
DNA分子标记技术研究进展（二）
2．第二代分子标记2.1 SSR标记技术 在真核生物基因组中存在许多非编码的重复序列，如重复单位长度在15～65个核苷酸的小卫星DNA(Minisatellite DNA)，重复单位长度在2～6个核苷酸的微卫星DNA(Microsatellite DNA)。小卫星和微卫星DNA分布
盘点：31项与免疫学有关的分子生物学实验技术
现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解，并且导致了免疫新策略的产生，免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。 一、GST pull-down实验 GST是指谷胱甘肽巯基转移酶，GST pull-down实验是一个行之有效的验
目的基因的亚克隆2
2. 连接产物的转化⑴ 取100μl贮存于-70℃钙化菌，冰浴化开；⑵ 加入适量连接产物（一般不超过10μl，轻轻混匀，冰浴20min；⑶ 于42℃热休克90s，迅速转移至冰浴中，继续冰浴2-3min；⑷ 加入LB液体培养基200μl，于37℃缓摇孵育45min；⑸ 将培养物适量涂于1.5%琼脂LB
第二代测序技术：高速发展的高通量测序技术
高通量测序技术是对传统测序一次革命性的改变，一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing)足见其划时代的改变，同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能，所以又被称为深度测
用PCR进行基因分型1
与许多一次做数百块Southern blots的研究人员一样，我第一次用PCR做基因分型（genotyping）时觉得见效很快，不再需要等几天才能看到结果，不再需要DNA显微图像或者操作紫外线了。随着技术的不断进步，RCR使基因组学和转录组学发生了翻天覆地的变化，甚至随着免疫PCR的普及开始进军蛋白
高通量测序的应用及前景
一、高通量测序的应用 高通量测序可以帮助研究者跨过文库构建这一实验步骤，避免了亚克隆过程中引入的偏差。 依靠后期强大的生物信息学分析能力，对照一个参比基因组（reference genome）高通量测序技术可以非常轻松完成基因组重测序（re-sequence），2007年van Orsouw
SSR分子标记技术及其在构建玉米DNA指纹库上的应用1
SSR分子标记技术及其在构建玉米DNA指纹库上的应用 康丽丽 周鸿飞(沈阳农业大学农学院) 玉 米是一种重要的饲用、粮用和工业加工作物，在国民经济中占有重要的地位。玉米育种方法的改进对农业发展具有重要意义。长期以来，育种家们大多数是借用易于 鉴别的形态学和同工酶等遗传标记来辅助育种，并取得了很大成功
样品总RNA的提取
实验概要本实验介绍了样品总RNA的提取方法。完整RNA的提取和纯化，是进行RNA方面的研究工作，如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即：样品细胞或组织的有效破碎；有效地使核蛋白复合体变性；对内源RNA酶的
食品中沙门氏菌的检测方法
生吃西红柿等新鲜的时蔬水果是再平常不过的事了。然而，2008年6月在美国中西部和南部30个州，却有数百人因生食了从超市或是餐馆购买的新鲜西红柿而出现发烧、腹泻、腹痛等症状，其中有几十人因病情严重需住院，甚至有重症病人死亡 。这就是2008年发生的“西红柿事件”,不仅使美国人惊恐不已,也引起了世界各国
总RNA的提取
完整RNA的提取和纯化,是进行RNA方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点，即１）：样品细胞或组织的有效破碎；２），有效地使核蛋白复合体变性；３），对内源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有效地将ＲＮ
法医物证检测中DNA分析技术的应用
法医物证检测中DNA分析技术的应用摘 要：本文以DNA 分析技术为研究对象,对其常见技术在法医物证检测中的应用进行了探究,以期拓 展法医鉴定范围、增强物证检测质量的目的。 随着现代生物学和医学的发展， 逐步形成了许 多DNA提取、鉴定和分析技术。 这些技术在多个领 域中得到了广泛推广和应用；[1
实验室中识破各种污染拯救细胞的方法
小伙伴们遇到过这种情况吗？当您的课题进行到白热化程度时却发现细胞被污染了此时大家的心情可谓五味杂陈 形容一下就是问君能有几多愁，眼泪恰似一江春水向东流不过，别担心逍鹏生物炼就火眼金睛帮助大家识破各种污染，拯救您的细胞 我们先来看看污染的真面目，总结下来无非以下几种类型： 我们一起来分析它们的特征：
总RNA的提取
完整RNA 的提取和纯化，是进行RNA 方面的研究工作，如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点，即１）：样品细胞或组织的有效破碎；２），有效地使核蛋白复合体变性；３），对内源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）
微卫星DNA分子标记及其应用（二）
3. 微卫星分子标记技术的应用 微卫星DNA 作为遗传标记具有很大的优越性。近年来随着研究的不断深入,对微卫星标记的研究不仅具有重要的理论意义, 而且还具有较好的应用前景。3.1 微卫星多态性分析在自然界中,生物个体表现出来的各种遗传变异,在本质上就是DNA 的差异,因此通过研究DNA的变异来分