染色体分离实验——Percoll梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒精胺精咪Percoll 溶液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，匀浆分离得到的染色质。Percoll 溶液：89% (v/v) Percoll5 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)2 mmol/L EDTA0.8 mmol/L 精胺2 mmol/L 精咪0.1 % 毛地黄皂苷3. 再加 15 ml Percoll 溶液到匀浆中，充分混匀。4. 将 35 ml 的 Percoll 混合物加入 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用一固定角度转头（Beckman Instruments) 在 4℃，20000 r/min 离心 30 分钟。5. 吸出染色体带上面的全部物质，将梯度中的染色体回收于大约 10 ml 的 Percoll ......阅读全文
染色体分离实验——Percoll梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒精胺精咪Percoll 溶液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，匀浆分离得到的染色质。Percoll 溶液：
Percoll梯度法染色实验
实验材料：染色质试剂、试剂盒：精胺、精咪、Percoll、溶液仪器、耗材：聚碳酸酯离心管实验步骤：1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，匀浆分离得到的染色质。Perco
染色体分离实验——甘油梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒甘油 染色质分离缓冲液溶液仪器、耗材JS-13 转桶式转头实验步骤1. 准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃，1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降
染色体分离实验——蔗糖梯度纯化法
实验材料染色质粗品试剂、试剂盒蔗糖分离缓冲液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品溶液轻轻
用Percoll不连续密度梯度法分离小鼠精原细胞的方法介绍
目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布于位于27
用Percoll不连续密度梯度法分离小鼠精原细胞的方法详解
精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究，精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用，都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化，以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞，用于体外培养。资料表明，从成年啮齿类的睾丸分离粗线期及其后
Percoll非连续性密度梯度离心法单核细胞的分离实验
基本原理：本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法，主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作，且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材·外周血单个核细胞·PBS 1×和PBS 10×（无Ca2+、Mg2+），含0.5mM EDTA·胎牛血清（56℃，30分钟加热灭
染色体分离实验—水相法分离染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒水相裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤1. 像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃，1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮，典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少 30
染色体分离实验——聚胺法分离染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒秋水仙胺聚胺缓冲液实验步骤有丝分裂中细胞的同步化1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮培养
抗药性突变株的分离实验——梯度平板法
实验方法原理生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致，与药物的存在无关，某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段，而不是作为引发突变的诱导物，因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体，极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化，进一步进行
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
【锐赛小课题】染色体分离实验
一、聚胺法分离染色质 试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液 实验步骤： 有丝分裂中细胞的同步化 1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。 2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材 生长培养基生长培养基+20% Percoll25ml离心管注射器或梯度收集器24孔培养板折光仪或密度计低速离心机实验步骤 通过下述方法之一制备密度梯度液：(
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。 实验材料 细胞样品
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。 实验材料 细胞样品
密度梯度细胞分离法
实验方法原理制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。实验材料细胞样品试剂、试剂盒D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材生长培养基生长培养基+20% Percoll25ml离心管注射器或梯度收集器24孔培养板折光仪或密度计低速离心机实验步骤通过下述方法之一制备密
染色体分离实验
聚胺法分离染色质 水相法分离染色质 用己二醇法分离中期染色质 蔗糖梯度纯化法 Percoll梯度法 甘油梯度法
蔗糖梯度纯化法实验
实验材料：染色质粗品试剂、试剂盒：聚碳酸酯离心管仪器、耗材：Dounce 匀浆器实验步骤：准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品
甘油梯度法染色实验
实验材料：染色质试剂、试剂盒：甘油、染色质、分离缓冲液溶液仪器、耗材：JS-13 转桶式转头实验步骤：准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃，1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度
密度梯度分离法分离单个核细胞（MNCs）
试剂和材料：1. 合适的培养基或冷冻液；2. PBSA；3. Ficoll-Hypague；4. 巴氏吸管；5. 50ml离心管；实验方法：1. 将脐血样品用PBSA按1：1比例稀释；2. 将15ml Ficoll-Hypague吸入50ml离心管；3. 将30mlPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到F
Percoll细胞分离液的使用方法
实验概要掌握Percoll细胞分离液的使用方法。实验原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟，用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20
离心技术在使用Metrizamide梯度分离染色体中的应用
本文讲述使用Metrizamide梯度分离染色体的方法和步骤。1. 细胞系和组织培养。中国仓鼠卵巢（CHO）和Hela细胞系在McCoy’s培养基中补加10%胎牛血清培养，用碳酸氢盐缓冲系统，需要5%CO2。2. 细胞同步化。为了在收获时有更多的有丝分裂细胞，用0.
小鼠精原细胞的分离和纯化
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
小鼠精原细胞的分离和纯化
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
小鼠精原细胞的分离和纯化
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－三
表（三）metrizamide及其溶液的性质（20℃）浓度密度g/ml折射率粘性渗透率百分比浓度％（W/V）Molar00.0000.99821.33301.00100.1271.05121.34831.3107200.2531.10621.36461.6180300.3801.16121.3809
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－二
四）碘盐自形成梯度：（ Nycodenz或 metrizamide） 这二种梯度材料在固定角式转头或垂直管转头，近垂直转头离心过程中会用较短的时间就可以自形成密度。和重金属盐一样，离心力、转头种类、离心时间对自形成梯度的形状都有很大的影响。由于碘盐的粘性系数对温度很敏感，很小的温升也会因
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－一
用 CsCl，Percoll, Nycodenz, metrizamide作自形成密度梯度离心一）概述：近年来用重金属盐（主要是 CsCl）分离生物大分子的平衡等密度离心；用 Percoll（由瑞典 pharmacia-Biosystems AB开发的胶体硅材料，即在硅颗粒外包覆 PVP塑料
单个核细胞的分离
实验概要外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。本实验介绍了两种单个核细胞的分离方法。实验原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密