细菌的革兰氏染色和特殊形态观察

实验概要1. 学习细菌的革兰氏染色原理和方法 2. 了解细菌的特殊形态结构: 芽孢、荚膜、鞭毛实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙酮)脱色,再用复染剂染色。如果细菌 不被脱色而保存原染液颜色者为革兰阳性菌(G+);如被脱色,而染上复染液的颜 色者为革兰阴性菌(G-)。此染色法可将所有具有细胞壁的细菌分为两大类:革兰 阳性菌和革兰阴性菌。单染色法:只能观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。 复染色法:用两种或两种以上染色液进行染色,有协助鉴别微生物的作用,故也称鉴别染色法。常用的有: 革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法等。染色原理: 现在认为细菌对革兰染色的不同反应主要是革兰阳性菌和阴性菌 的细胞壁结......阅读全文

革兰氏阳性菌的原理学说

  革兰氏染色原理目前有三种观点:等电点学说、化学学说和渗透学说。  等电点学说  革兰氏阳性菌的等电点在pH2-3,比阴性菌(pH4-5)低,加之碘为弱氧化剂,可降低革兰氏阳性菌的等电点,致使两类菌的等电点差异扩大,因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌更强。  化学学说  碘液在菌体内与结晶紫结合

革兰氏染色实验时可能出现的误差

  在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结果;另外,细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结

简述革兰氏染色法的实验原理

原理  通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其

细菌的革兰氏染色和特殊形态观察

实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中zui广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙酮)脱色,再用复染剂染色。如果细菌 不被脱色而保存原染液颜色者为革兰阳性菌(G+);如被脱

革兰氏染色的原理及临床意义

              ①染色原理:1革兰阳性菌细胞壁结构比较致密,肽聚糖层厚,脂质含量少,乙醇不易透过;革兰阴性菌细胞壁结构比较疏松,肽聚糖层薄,含大量脂质,乙醇易渗入;2.革兰阳性菌等电点比革兰阴性菌低,在相同pH条件下,革兰阳性菌所带负电荷要多,故与带正电荷的结晶紫染料结合较牢靠,不易

细菌的革兰氏染色和特殊形态观察

革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。近年来由于对细菌细胞壁的结构有了较深入的了解,对革兰染色的机制提出不同的看法。一般认为革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革

革兰氏染色法(原理、方法和意义)

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察

革兰氏阳性细菌的高耐药率的介绍

  随着抗生素滥用现象不断加剧,临床细菌耐药问题日趋严重。在近日闭幕的“抗生素治疗革兰氏阳性细菌现状与进展学术研讨会”上,张致平、朱士俊、罗慰慈等专家再次发出警示。  自上世纪90年代以来,革兰氏阳性球菌在医院感染病原体中比例显著上升,并成为当今院内感染中最重要的病原体。据中国医科院医药生物技术所张

2.7.2-从革兰氏阳性菌中分离RNA

实验材料10 ml 细菌培养物试剂、试剂盒DEPC 处理的水裂解缓冲液酚氯仿异戊醇5mol LNaCl冰冷的无水乙醇70% 乙醇DNA 酶消化缓冲液TE 缓冲液仪器、耗材离心机带微探头的超声仪实验步骤一 材料与设备1)10 ml 细菌培养物,2)DEPC 处理的水。3) 裂解缓冲液:30 mmol/

新型抗生素有效杀伤革兰氏阴性细菌

  许多威胁生命的细菌对现有抗生素的抵抗力日益增强。如今,在一项新的研究中,来自瑞士苏黎世大学和Polyphor公司(Polyphor AG)的研究人员发现一类具有独特活性和作用机制的新型抗生素:嵌合拟肽类抗生素(chimeric peptidomimetic antibiotics),这是对抗抗菌

细菌RNA制备实验——革兰氏阴性细菌中提取

实验材料RNA试剂、试剂盒STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1.  培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2.  于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.  用2

从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

试剂、试剂盒 10 ml 革兰氏阴性菌培养液 原生质体缓冲液 50 mg ml 溶菌酶 革兰氏阴性菌裂解缓冲液 饱和 NaCl 溶液 DEPC 处理水 乙醇实验步骤 一 材料与设备1)10 ml 革兰氏阴性菌培养液,2) 原生质体缓冲液:15 mmol/LTris-Cl(pH8.0),0.45mol

革兰氏染色的基本原理及方法

革兰染色法是1884年由丹麦医师Gram创立,直到现今,革兰氏染色法仍是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。 细菌先经碱性染料结晶紫染色,而后经碘液进行媒染,之后用酒精脱色,在一定条件下有的细菌媒染后的颜色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌

从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

            试剂、试剂盒 10 ml 革兰氏阴性菌培养液  原生质体缓冲液 50 mg ml 溶菌酶  革兰氏阴性菌裂解缓冲液   饱和 NaCl 溶液

革兰氏阳性菌的电转化方案(英文)

Transformation of Gram-Positive Bacteriaan adaptation from Chang, D., Chassy, B., Saunders, J., Sowers, A. 1992.Guide to Electroporation and Electrofu

革兰氏阴性菌的病源和辨别方式

  1、病源  革兰氏阴性菌的病原能力通常与其细胞壁组成相关,具体说来有脂多糖(lipopolysaccharide,又称为LPS或者内毒素(endotoxin))层。在人体中,LPS可以激发一种固有免疫反应(innate immune response)这种反应是通过细胞素制造和免疫系统活化等来描

简单染色法与革兰氏染色法

(一)细菌的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物  涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识

革兰氏阳性菌的细胞形态和结构

  细胞的基本结构包括细胞壁和原生质体两部分。原生质体位于细胞壁内,包括细胞膜(细胞质膜)、细胞质、核质和内含物。另外细胞还含有有些特殊结构,主要有荚膜、芽孢、鞭毛和菌毛等4种。  1.细胞壁  革兰氏染色的机理主要是抓住了革兰氏阳性细菌与阴性细菌在细胞壁的结构与组成上的不同,具体比较见下表:  进

革兰氏阴性细菌的鉴别染色法

  革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。  细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G-)。  为观察方便,脱色后再用

作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚

如果过于浓厚,菌体会很难吸附到载玻片上,染色冲洗过程中很容易别冲下来,表层被染色,但是内层菌体很难染色。革兰氏染色是用来鉴别细菌的一种方法:这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同,可将细菌分成两类,即革兰氏阳性与革兰氏阴性。由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎

革兰氏染色的临床意义和特性介绍

  临床意义  其重要的临床意义在于:1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关:革兰氏阳性菌能产生外毒素,革兰氏阴性菌能产生内毒素;而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖,两者的致病作用不同。  特性  革兰氏染色属复染法,即将标本固定后,先用龙胆紫染色,加碘液媒染后用酒精脱色,再用蕃红

革兰氏染色法的原理、方法和意义

 1.革兰氏染色法    是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显

有关革兰氏染色法试验的详细介绍

  染色的差异主要是由于阴性与阳性细菌细胞壁的差异所引起的。  ①革兰氏阳性细菌的细胞壁  G+细菌细胞壁具有较厚(20-80nm)而致密的肽聚糖层,多达50层,占细胞壁成分的40%~95%,它同细胞膜的外层紧密相连。有的G+细菌细胞壁中含有磷壁酸(teichoic-acid),也称胞壁质(mure

涂片可见革兰氏阳性球菌是什么意思

如果将细菌作革兰氏染色,凡染后菌体呈紫色的,称“革兰氏阳性菌”。革兰氏阳性球菌有金黄葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、肠球菌等。

革兰氏染色法的原理、方法和意义

 1.革兰氏染色法    是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显

细菌染色技术(单染技术与革兰氏染色)

细菌  个体微小,普通光学显微镜下不易直接观察,故常用染色技术使细菌细胞着色。包括细菌单染技术、细菌的革兰氏染色技术、细菌的芽孢染色技术、细菌的荚膜染色技术和细菌的鞭毛染色技术 Ⅰ、细菌的单染技术 简单染色通常只用一种染色剂,使细菌整个细胞染上颜色。但看不清结构。所以只便于检查细菌的形态

2.7.3-从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

试剂、试剂盒10 ml 革兰氏阴性菌培养液原生质体缓冲液50 mg ml 溶菌酶革兰氏阴性菌裂解缓冲液饱和 NaCl 溶液DEPC 处理水 乙醇实验步骤一 材料与设备1)10 ml 革兰氏阴性菌培养液,2) 原生质体缓冲液:15 mmol/LTris-Cl(pH8.0),0.45mol/L 蔗糖,8

治疗革兰氏阴性杆菌败血症的相关介绍

  据统计,革兰氏阴性杆菌败血症的病死率为20%~40%,其中,尤以绿脓杆菌、变形杆菌所致最高。如果并发休克,其病死率可高达50%以上。降低死亡率的关键在于早期诊断,并立即给予适当的处理,因此,医生对尿路感染患者要时刻警惕本病的发生。如果病人出现本病的可疑情况时,应立即抽血作细菌培养,并寻找感染源(

细菌的简单染色(Simple-stain)和革兰氏染色2

(3)固定:手执玻片一端,让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜),使细胞质凝固,以固定细菌的形态,并使其不易脱落。但不能在火焰上烤,否则细菌形态将毁坏(4)染色:将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上,加复红染色1-2min(5)水洗:用水洗去涂片上的染色液,直至冲下之水无色时为止。(6)干燥

细菌形态学染色之革兰氏染色法

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱