CloningbyLimitingDilutionofHybridoma
Author: Nanci DonackiSource: Contributed by Nanci DonackiDate Added: Tue May 14 2002Date Modified: Tue Apr 27 2004MaterialsDMEM, high glucose (Life Technologies, Inc. #10313-021 or equivalent)Fetal Bovine Serum (Life Technologies, Inc. #16000-044 or equivalent)L-glutamine (Life Technologies, Inc. #25030-149 or equivalent)Hybridoma Cloning Factor (Fisher # IG50-0615)50 ml sterile centrifuge tubes (......阅读全文
Cell－counting/plating
OverviewCount the number of viable cells in a culture via dilution plating. The following assumes E. coli cells but it should apply to any type of cel
Generating－stable－cell－lines－in－HEK293
Generating stable cell lines in HEK293Prior to transfection, it is recommended that you linearize your pcDNA gene construct. Linearizing will decrease
DNA提取中EB的去除实验方法
Removal of Ethidium Bromide from DNA by Extraction with Organic SolventsJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourn
Generating－stable－cell－lines－in－HEK293
Generating stable cell lines in HEK293Prior to transfection, it is recommended that you linearize your pcDNA gene construct. Linearizing will decrease
TP53BP1基因编码的功能和结构描述
该基因编码一种蛋白质，在dna双链断裂修复途径选择、促进非同源末端连接（nhej）途径和限制同源重组中发挥作用。该蛋白在dna损伤反应中发挥多种作用，包括促进dna损伤后的检查点信号传导，作为dna损伤反应蛋白向受损染色质募集的支架，以及通过限制双链断裂后的末端切除促进nhej途径。这些作用在v（d
Quantitative－PCR
实验概要Quantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and var
TP53BP1基因突变因子与药物介绍
该基因编码一种蛋白质，在dna双链断裂修复途径选择、促进非同源末端连接（nhej）途径和限制同源重组中发挥作用。该蛋白在dna损伤反应中发挥多种作用，包括促进dna损伤后的检查点信号传导，作为dna损伤反应蛋白向受损染色质募集的支架，以及通过限制双链断裂后的末端切除促进nhej途径。这些作用在v（d
Bovine－Ig(Total－Immunoglobulin)－ELISA－Kit使用说明（二）
Note: Samples to be used within 5 days can be stored at 4°C, besides that, samples must be stored at -20°C (assay ≤1 month) or -80°C(assay≤2 month
几种DNA定量方法
Quantitation of DNAFluorescent quantitationWear gloves and goggles protecting from EtBr and UV lightWith an EDP (dilute mode) pick up 9 µl TE and 1 µl
基于epMotion－5075t及KAPA文库定量试剂盒的全自动NGS文库...2
Results and DiscussionAutomated qPCR Setup Accuracy and PrecisionThe accuracy and precision of the qPCR setup was evalu ated based on standard curve
极限温度的概念
极限温度 limiting temperature材料或者产品在出现失效之前能够达到的最高或最低温度。
Raft－culture－media－(aka－Green’s－media)
Raft culture media (aka Green’s media)3 parts DMEM (including glutamine or glutamax)1 part Ham’s F125% FCSvarious supplements (not everybody uses the
[淋巴细胞]杂交瘤的定义
中文名称[淋巴细胞]杂交瘤英文名称hybridoma定 义肿瘤细胞与正常来源淋巴细胞融合产生的杂种细胞。实际上多指T或B淋巴细胞与骨髓瘤细胞系融合成的杂交瘤细胞。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
单克隆抗体是怎么制备的
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤（hybridoma）抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
ATCC细胞－冷冻及解冻方法
一、细胞冷冻保存1、材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO（Sigma D-2650）、无菌塑料冷冻保存管（Nalgene 5000-0020）、0.4％（w/v）trypan blue（GibcoBRL15250-061）、血球计数盘与盖玻片、等速降温机（KRYO10Series
细胞冻存、解冻方法以及细胞计数
一、细胞冷冻保存1、材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO（Sigma D-2650）、无菌塑料冷冻保存管（Nalgene 5000-0020）、0.4％（w/v）trypan blue（GibcoBRL15250-061）、血球计数盘与盖玻片、等速降温机（KRYO10SeriesII）。2
ATCC细胞冷冻及解冻方法
一、细胞冷冻保存1、材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO（Sigma D-2650）、无菌塑料冷冻保存管（Nalgene 5000-0020）、0.4％（w/v）trypan blue（GibcoBRL15250-061）、血球计数盘与盖玻片、等速降温机（KRYO10SeriesI
ATCC细胞的冷冻保存与解冻方法！
一、细胞冷冻保存1、材料生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO（Sigma D-2650）、无菌塑料冷冻保存管（Nalgene 5000-0020）、0.4％（w/v）trypan blue（GibcoBRL15250-061）、血球计数盘与盖玻片、等速降温机（KRYO10SeriesII）。2、
Peptide－competition...
实验概要The peptide competition assay/blocking procedure can be used in western blotting, IHC and ELISA. The peptide competition assay (PCA) is a reco
细胞传代培养
实验概要 细胞生长至高密度时，即须分殖至新的培养瓶中，一般稀释比例为1:3 至1:6，依细胞种类而异。实验材料 无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca /Mg free, D-PBS,GibcoBRL 21600-010)
关于杂交瘤细胞的简介
杂交瘤细胞（hybridoma）是一种在制备单克隆抗体过程中，用骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的细胞。杂交瘤细胞一般通过瘤细胞培养来制备。 杂交瘤技术是指两个或两个以上细胞合并形成一个细胞的现象。他可使两个不同来源的细胞核在同一细胞中表达功能。
限制性氨基酸的基本信息
中文名限制性氨基酸外文名limiting amino acids简 称LAA常 见赖氨酸、苏氨酸和蛋氨酸影 响限制了蛋白质的生物学价值改 善补充含量不够或很少的氨基酸
Largescale－Immunocytology
This protocol describes our method for preparing cells for immunofluorescence, in which all incubations and washes are performed in microtiter dishes.
Phage－Titer
IntroductionLambda phage is a commonly used vector for transgenes. Its very high rate of infectivity makes it ideal for creating large numbers of clon
细胞培养常见问题与解答3
15.如何检测内毒素(热源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）试验是可用的最敏感和特异的检测细菌内毒素的方法。Levin和Bang 发现细菌可引起鲎（Limulus polyphemus）血管内的凝集作用。内毒素启动一个细胞内酶原系统（丝氨酸蛋白酶级
细胞的冷冻保存
1. 注意事项：1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态，约为80 – 90 ％致密度。1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质，例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。不宜将冻存细胞放置在0℃～-60℃这一温度范围内过久，低温损
Immunofluorescent－Localization－of－Tubulin
LEVEL IIMaterialsCoverslip cultures of an appropriate monolayer cell linePhosphate buffered saline (PBS)Acetone/Methanol (absolute) in a 50:50 volume
FISH－protocols－for－Drosophila1
.1 RNA Probe Preparation (see Note 1)1. 1.5 mL microcentrifuge tubes or standard 96-well V-bottom microplates.2. RNAse free water.3. T7, T3 or S
基于epMotion－5075t及KAPA文库定量试剂盒的全自动NGS文库...1
基于epMotion 5075t及KAPA文库定量试剂盒的全自动NGS文库定量操作Automated KAPA® Library Quantifcation Kit with the epMotion® 5075tMaud Brasseur¹, Jennifer Pavlica², Marsha M
Cardiomyocyte－immun...
实验概要The following protocol provides a method describing a suggested protocol for sarcomeric actinin, ANP, ER and ERb fluorescent staining of car