吖啶橙和溴化乙啶双重染色
染料同时染色细胞，为鉴别凋亡细胞和坏死细胞提供较好的方法。染料： 吖啶橙(AO)膜通透性较高的染料 溴化乙啶(EB）正常细胞： AO－ 绿色荧光强，EB－ 染色红色荧光较弱；凋亡细胞： AO－ 绿色荧光强度弱减，EB－ 染色红色荧光加强；坏死细胞： AO－ 绿色荧光强度弱或消失，EB－ 染色红色荧光强（EB可诱导AO的淬灭）。 ......阅读全文
吖啶橙和溴化乙啶双重染色
染料同时染色细胞，为鉴别凋亡细胞和坏死细胞提供较好的方法。染料： 吖啶橙(AO)膜通透性较高的染料 溴化乙啶(EB）正常细胞： AO－ 绿色荧光强，EB－ 染色红色荧光较弱；凋亡细胞： AO－ 绿色荧光强度弱减，EB－ 染色红色荧光加强；坏死细胞： AO－ 绿色荧光强度弱或消失，EB－ 染色红色荧光
吖啶橙荧光染色
【临床意义】 红细胞系统细胞核发深绿色荧光。原始红细胞有时可看到粉红色核仁。粒细胞系统细胞核发黄绿色荧光。原始粒细胞有时也可看到粉红色的核仁。但嗜酸性粒细胞的细胞核发深绿色荧光，比红细胞系统还要深一些。 淋巴细胞核的荧光稍带灰绿色。 各系统细胞的胞浆内因含有核糖核酸（RNA），所以均发红色荧光
吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色
AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理：吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅
双重染色抗体的选择
用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一，二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
培养细胞的染色实验——吖啶橙染色荧光观察法
实验方法原理吖啶橙（Acridine Oringe：AO）是一种常用荧光染料，用于直接染色观察活细胞或固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色，快速、简便和有一定的特异性。吖啶橙对活细胞毒性小，配成2×10－4～1×10－4 可用于直接染色观察法更好。实验材料细胞试剂、试剂盒酒精PBSC
吖啶橙的显色过程
在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由
吖啶橙的显色过程
在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由
吖啶橙的显色过程
在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由
吖啶橙的主要用途
主要用作荧光指示剂，与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA结合量少发绿色荧光，与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中
关于吖啶橙的基本介绍
吖啶橙（Acridine Orange）3，6－（二甲胺基）吖啶盐酸盐，分子式C17H19N3 · HCl · ZnCl₂, 分子量438.12g/mol,是一种荧光色素，其检测激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与D
细胞凋亡的形态：生化性质实验——吖啶橙染色
实验材料细胞试剂、试剂盒染液仪器、耗材试管实验步骤1b)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液，转动手腕轻柔地混合。2b)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上，盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤
1．一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。2．二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫
细胞凋亡的形态：生化性质实验——吖啶橙或溴化乙锭染色
实验材料细胞试剂、试剂盒染液仪器、耗材试管实验步骤1c)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液，用手腕轻柔地混合。2c)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上，盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光
双酶双底物的双重免疫染色—多种组织抗原配对的双重酶
改良的 EnVision-HRP/AP 双酶双底物的双重免疫染色（间接法）——Ki-67-CK20 等多种组织抗原配对的双重酶实验步骤1. 恒冷切片或石蜡切片，厚 4～6 μm，常规处理。2. 0.1％NaN3+0.3％H2O2/TBS（50 mmol/L，pH 7.8）或 0.3％H2O2/甲醇，
双酶双底物的双重免疫染色—淋巴瘤轻链κ、λ的双重酶标记
实验步骤1. 石蜡切片常规脱蜡至水（若用含汞固定液固定的组织，则需用内含 0.5％ 碘的乙醇溶液脱汞 5 min，乙醇浓度为 70％，经自来水洗后以 2.5％ 硫代硫酸钠浸洗 1 min，水洗）。2. 0.3％H2O2 甲醇液浸泡切片 30 min，自来水洗，蒸馏水洗，入 PBS（0.01mol/L
细胞凋亡（apoptosis）的检测2
【材料】１试剂：吖啶橙贮存液（10mg吖啶橙溶解于100mLPBS中，过滤，4℃避光保存），0.01mol/L、Ph6.8PBS。２器材：吸管，试管，玻片，荧光显微镜。【方法】１制备待检活细胞悬液，浓度约为1×10７/mL。２取95uL的细胞悬液，加5uL的吖啶橙贮存液混匀。３吸一滴混合液
显微镜形态学观察细胞凋亡
实验方法原理细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征，如胞膜有小泡生成，细胞固缩，核质浓缩，染色质凝聚，DNA降解，胞膜最终形成许多凋亡小体，然后被邻近的巨噬细胞所吞噬。实验材料Hela细胞Jurkat细胞试剂、试剂盒蒸馏水盼蓝仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实
显微镜形态学观察细胞凋亡
显微镜检测法 实验方法原理 细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征，如胞膜有小泡生成，细胞固缩，核质浓缩，染色质凝聚，DNA降解，胞膜最终形成许多凋亡小体，然后
显微镜形态学观察细胞凋亡
显微镜检测法 实验方法原理 细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征，如胞膜有小泡生成，细胞固缩，核质浓缩，染色质凝聚，DNA降解，胞膜最终形成许多凋亡小体，然后
显微镜形态学观察细胞凋亡——显微镜检测法
用透射电镜观察细胞凋亡可以用于：（1）可清楚地观察到细胞结构在凋亡不同时期的变化；（2）电镜形态学观察是迄今为止判断凋亡最经典、最可靠的方法, 被认为是确定细胞凋亡的金标准。实验方法原理细胞凋亡发生时会出现一定的形态学特征，如胞膜有小泡生成，细胞固缩，核质浓缩，染色质凝聚，DNA降解，胞膜最终形成许
吖啶橙的计算化学数据
疏水参数计算参考值（XlogP）：无氢键供体数量：0氢键受体数量：3可旋转化学键数量：2互变异构体数量：0拓扑分子极性表面积：19.4重原子数量：20表面电荷：0复杂度：298同位素原子数量：0确定原子立构中心数：:0不确定原子立构中心数量：0确定化学键立构中心数量：0不确定化学键立构中心数量：0共
吖啶橙的理化性质
密度：1.169g/cm3熔点：165ºC沸点：468.6ºC闪点：237.2ºC折射率：1.71外观：棕色粉末
吖啶橙的结构功能特点
吖啶橙，化学名称为3,6-二(二甲基胺)吖啶、溶剂橙15，是一种有机化合物，化学式为C17H19N3，是一种荧光色素，主要用作荧光指示剂，与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA结合量少发绿色荧光，与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使
光镜下双/多重免疫标记实验——双重免疫荧光染色
实验步骤1. 古兹菲德-雅各氏病（CJD）病人的尸解脑组织，4％ 中性甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，厚 5 μm（贴片前的载玻片应预涂不含有荧光色素的黏合剂）。2. 常规脱蜡，水化。3. 抗原修复（柠槺酸盐缓冲液 pH 6.0 中，高压灭菌器加热 100℃，20 min）及 96％ 甲酸孵育 2 m
双重和多重原位杂交(hybridization－in－situ)技术
为了在同一标本上或同一细胞内同时检测是否存在两种或两种以上的靶核酸序列。可应用双重或多重原位杂交技术．即以两种或多种标记探针与靶核酸杂交。然后利用不同的检测手段分别显示各种靶核酸的存在和分布。该技术与免疫组织化学技术中的双重或多重标记相似，除了探针本身的特异性外，对结果的干扰主要来自标记物及检测试剂
吖啶橙的基本信息介绍
简称：AO AO能与无机酸形成盐，具有绿色荧光。如果再稀释的话，便水解成游离的AO，而呈现紫色荧光。 吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡（acridine orange/ethidium bromide, AO/EB）： （1）细胞爬片：在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片，接种细
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。（二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 （二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或