细胞核的预先分离

实验材料细胞试剂、试剂盒PBSRSB 缓冲液仪器、耗材医用台式离心机Dounce 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 清洗细胞,用一医用台式离心机低速离心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 缓冲液悬浮沉淀。每 107 个细胞用 1 ml 缓冲液。用 0.002 英寸间隙的 Dounce 匀浆器破碎细胞。含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 缓冲液:10 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)10 mmol/L NaCl1.5 mmol/L MgCl2每毫升溶液中含的 Tween-DOC 贮存液和 850 μl RSB。用前从 100X 的贮存液中加入 VRC 和 AEBF,至终浓度为 2 mmol/L 和 1 mmol/L。Tween 40 和 DOC 贮存液:6.67% (w/v) Tween 403.33% (w/v) 脱氧胆酸钠可分成小份冻存于 -20℃2. 4℃,10......阅读全文

细胞核的预先分离

实验材料细胞试剂、试剂盒PBSRSB 缓冲液仪器、耗材医用台式离心机Dounce 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 清洗细胞,用一医用台式离心机低速离心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 缓冲液悬浮沉淀。每 107 个细胞用 1 ml 缓冲液。用 0.002 英寸间隙的 D

原代细胞核膜的分离

1. DNA酶Ⅰ;2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3. MgCl2(1mol/L储存液);4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);5. 纯化的细胞核;6. 缓冲液:2mmol/L Tris-HCl,pH7.4;7. 膜悬浮缓

原代细胞核膜的分离

试剂和器材: 1. DNA酶Ⅰ;2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3. MgCl2(1mol/L储存液);4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);5. 纯化的细胞核;6. 缓冲液:2mmol/L Tris-HCl,pH7.4;

细胞核的分级分离实验

实验材料小白鼠                                                          试剂、试剂盒蔗糖                                                                  氯化钙溶液      

细胞核的分级分离实验

实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材 玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤 1.  用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯

细胞核的分级分离实验

实验材料小白鼠试剂、试剂盒蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤1.  用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中,反复

细胞核的分离提取操作步骤

一、操作步骤1.用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中,反复洗涤,尽量除去血污,用滤纸吸去表面的液体。2.将湿重约1g的肝组织放在小平皿中,用量筒量取8ml预冷的0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液,先加少量

原代细胞核膜分离实验

实验概要本实验介绍了原代细胞核膜分离的实验操作流程。主要试剂1. DNA酶Ⅰ;2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3. MgCl2(1mol/L储存液);4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);5. 纯化的细胞核;6. 缓冲液:

细胞核与线粒体的分级分离

一、原理   细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。    分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步,这种方法已成为研究

细胞核与线粒体的分级分离

一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺

细胞核与线粒体的分级分离

一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步,这种方法已成为研究亚细胞成分的化

细胞核与线粒体的分级分离

实验概要掌握细胞核与线粒体的分级分离的实验技术。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过程包括组织细胞匀浆、分级

特定细胞类型标记的细胞核分离

从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因,如癌细胞与正常细胞,或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell),人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,

原代细胞核孔复合物的分离

试剂和器材: 1. 肝素;2. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(溶于乙醇中配制成1mol/L储存液);3. 纯化的核膜;4. 提取缓冲液(EB):含1%(体积分数)Triton X-100的10mmol/L Tris-HCl,(pH7.4)、0.1mmol/L苯甲基磺酰氟;5. Tris缓冲液:2mmol

细胞核与线粒体的分级分离

实验概要通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分,以了解其原理及过程。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过

细胞核与线粒体的分级分离

  一、原理    细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。    分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步,这种方法已成

四膜虫细胞核的分离实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 辛醇PMSF仪器、耗材 搅拌机光学显微镜实验步骤 1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时,在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇,混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF,即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml

四膜虫细胞核的分离实验

实验材料细胞试剂、试剂盒辛醇PMSF仪器、耗材搅拌机光学显微镜实验步骤1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时,在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇,混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF,即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml 的圆锥

四膜虫细胞核的分离实验

四膜虫细胞核的分离             实验材料 细胞 试剂、试剂盒

四膜虫细胞核的分离实验

四膜虫细胞核的分离             实验材料 细胞 试剂、试剂盒

差速离心分离植物(动物)细胞核

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

差速离心分离植物(动物)细胞核

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

植物(动物)细胞核差速离心分离

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

分离核仁实验——HeLa细胞细胞核或核仁的制备

实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液:PBSRSB-8 10 mmol/L Tris;10 mmoI/L NaCl,8 mmoI/L 乙酸镁,pH 7.4RSB 10 mmol/L Tris;10 mmol/L NaCl,1.5 mmol/L

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。  本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。  1.

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

 核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。 本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。 1. 大鼠肝脏

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

   核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1. 大鼠肝脏

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

 核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1.   大鼠肝脏

从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构

实验材料新鲜组织试剂、试剂盒NaCl 缓冲液细胞骨架缓冲液仪器、耗材Teflon 研杵Doume 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 将新鲜组织切成 1 mm3 左右的小块。在 4℃,用 Teflon 研杵和 Doume 匀浆器在含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液中对切碎的组织进行

利用碘克沙醇梯度溶液分离动物细胞核

实验概要本实验使用碘克沙醇密度梯度溶液从动物肝脏中分离纯化了动物细胞核。主要试剂1. OptiPrepTM(600g碘克沙醇,ρ=1.32g/ml);2. OptiPrepTM稀释剂(OptiPrepTM diluent,OD):150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmo