我国科学家研发出活体内蛋白质瞬时原位激活新技术

在活细胞等复杂的生命体系中原位研究蛋白质功能具有重要的科学意义。以往在活细胞内开展的蛋白质原位研究只能在某些特定蛋白家族中应用,如何进一步发展广泛适用于不同类型蛋白家族的原位研究方法一直是困扰众多生物学家的科学难题。 在国家重点研发计划“蛋白质机器与生命过程调控”重点专项“信号转导过程中蛋白质机器的活细胞标记与在体调控”项目的支持下,北京大学陈鹏教授课题组与王初课题组合作,发展了一种在活体内瞬时激活蛋白质的普适性新技术。他们将计算机辅助设计筛选与可遗传编码的非天然氨基酸技术有机结合,探究并发展了一种普适性的“邻近脱笼”新策略。他们通过向蛋白质活性中心附近引入一种带有光保护基团的非天然酪氨酸, 实现了对其活性的远程干扰和抑制;随后通过光解离反应将保护基团移除,使其活性重新恢复(图1)。该方法通过对蛋白质活性中心邻近残基位点的脱笼,可在活细胞及活体动物内实现对不同类型蛋白质的在体、瞬时、特异性激活。 该团队利用“邻近脱笼”新......阅读全文

“化学脱笼”:实现蛋白质高时间分辨的原位激活

  在活细胞等生理环境下开展蛋白质功能的原位研究具有重要的科学意义。北京大学化学与分子工程学院陈鹏课题组长期致力于发展蛋白质的原位激活技术,希望为活细胞内的每一个蛋白质安装“调控开关”。  近日这一研究组与王初课题组合作发表了题为“Time-resolved protein activation b

我国研究人员开发了蛋白质瞬时原位激活新技术

  近日,北京大学陈鹏课题组与王初课题组发展了一种在活体细胞或动物内瞬时激活蛋白质的普适性新技术,具体成果发表在Nature上,题为Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems。  在复杂的生命体系中原

我国科学家研发出活体内蛋白质瞬时原位激活新技术

  在活细胞等复杂的生命体系中原位研究蛋白质功能具有重要的科学意义。以往在活细胞内开展的蛋白质原位研究只能在某些特定蛋白家族中应用,如何进一步发展广泛适用于不同类型蛋白家族的原位研究方法一直是困扰众多生物学家的科学难题。  在国家重点研发计划“蛋白质机器与生命过程调控”重点专项“信号转导过程中蛋白质

新方法可精确控制蛋白质激活过程

据4月17日发表在《自然·化学》杂志上的一项研究,美国华盛顿大学医学院研究团队使用短暂的闪光将经过化学修饰的蛋白质片段连接在一起,形成功能性整体。这种名为光激活SpyLigation的新方法可打开通常关闭的蛋白质,让研究人员能够更详细地研究和控制它们。这项技术在组织工程、再生医学和了解人体如何运作方

原位PCR和原位RT

(一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪 。(二)、操作流程1、原位PCR 步骤1)预处理:(1)切片常规脱蜡;(2)0.2mol/L HCl处理10min;(3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min;(4)Nase消化组织37℃ 30min;(5)梯度酒精脱水,室温干燥

蛋白质工程技术助力探索离子通道激活机制

  近日,北京师范大学王友军课题组及美国德克萨斯州A&M大学Yubin Zhou课题组采用蛋白质工程技术,巧妙地实现了膜蛋白在亚细胞器和质膜之间定位的切换,为研究细胞器膜蛋白的结构和功能提供了更加便捷的手段和新的思路。基于此方法,本文的一作郑思思、马国林、何涟“驱使”内质网定位蛋白STIM(Stro

科学家开发蛋白质复合物原位解析新技术

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/5/500192.shtm作为生命活动的执行者,蛋白质通过相互作用形成复合物等形式行使其特定的生物学功能。近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员张丽华、研究员赵群等研制了一种基于糖苷键的质谱可碎裂型交联剂,显

原位化学交联可以解码细胞中蛋白质动态结构策略

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/505975.shtm

德国应用化学:蛋白质复合物原位解析新技术

  作为生命活动的执行者,蛋白质通过相互作用形成复合物等形式行使其特定的生物学功能。近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员张丽华、研究员赵群等研制了一种基于糖苷键的质谱可碎裂型交联剂,显著地提高了交联信息的检索通量和鉴定准确度,同时具有良好的两亲性和生物兼容性,实现了活细胞内蛋白质复合物原位交联和

图文看懂|导精子发育过程中蛋白质翻译激活重要机制

《科学》(Science)在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)刘默芳研究组与国内外多家实验室合作完成的以LLPS of FXR1 drives spermiogenesis by activating translation of stored mRNAs为题的

精子发育过程中蛋白质翻译激活机制被发现了

  据不完全统计,全球约有15%~20%的不孕不育夫妇,其中近50%是男性因素导致。环境污染、生活压力、遗传病等因素是造成男性不育的重要原因,但目前有一半以上不育男性无法明确其病因。中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所,简称“分子细胞中心”)刘默芳研究组与国内外多家实验室合

新发现!精子发育过程中蛋白质翻译激活重要机制

  据不完全统计,近20年我国不孕不育率从6.9% 升至17.1%,其中近50%是男性因素导致,目前有一半以上不育男性无法明确其病因。在精子细胞演变为精子的过程中,细胞核内的基因转录活动将完全停止,为后期精子细胞发育所需的基因提前转录为信使核糖核酸(mRNA),然后以抑制状态储存在精子细胞中,直到特

凝血酶原激活激活系统介绍

  体内存在有内源性及外源性两种激活系统。前者是指心血管内膜受损,或血液流出体外通过与异常表面接触而激活因子Ⅻ(Hageman factor)。后者则由于组织损伤释放出因子Ⅲ,从而激活因子Ⅶ。两者都能启动一系列连锁反应,并在因子Ⅹ处汇合,最后都导致凝血酶原的激活及纤维蛋白的形成。

间接原位PCR(原位杂交PCR)

与直接原位PCR所不同的是,靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入,而是标记一段与扩增片段互补的探针,在扩增结束后,应用此探针进行原位杂交。因此,此处主要介绍原位杂交,其余方法同原位PCR。实验材料组织或细胞样品试剂、试剂盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNAR

间接原位PCR(原位杂交PCR)

间接原位PCR(原位杂交PCR)             实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒

间接原位PCR(原位杂交PCR)

与直接原位PCR所不同的是,靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入,而是标记一段与扩增片段互补的探针,在扩增结束后,应用此探针进行原位杂交。因此,此处主要介绍原位杂交,其余方法同原位PCR。一、预杂交1. 试剂与配制2×SSC50%去离子甲酰胺:用4×SSC配制(v/v)预杂交液:2×SSC,5%硫酸葡

原位PCR

About in situ PCR (Applied Biosystems)Basic information about in situ PCR and its applications.The In Situ PCR: Amplification and Detection in a Cellu

原位PCR

实验概要原位PCR技术自上世纪90年代初建立至今,科学家就一直对原位PCR的技术和应用进行研究,目前该项技术已日臻完善。原位PCR既能分辨带有靶序列的细胞又能标出靶序列在细胞内的位置,在分子和细胞水平上研究疾病的发病机理、临床过程以及病理的转归,其特异性和敏感性均高于一般PCR技术。在病毒学、病理学

蛋白质可由一种酶激活AIE荧光指示剂检测

  蛋白印迹法 (Western blot) 是分析复杂生理样本中蛋白质表达含量最常用的方法之一。然而,目前商用的化学发光显色剂线性区间窄且信号不稳定,无法实现长时间定量检测蛋白质含量,故研发一种可以线性区间较宽、信号稳定的显色剂对于蛋白的定量检测具有重要意义。  华东理工大学化学与分子工程学院朱为

赛默飞在ASMS发布Orbitrap-Eclipse质谱-激活高端蛋白质组研究

  分析测试百科网讯 2019年6月3日,赛默飞在ASMS 2019大会推出全新的Orbitrap Eclipse三合一超高分辨质谱仪,通过智能数据采集最大化获取研究信息并提高效率,其扩展的分析功能可重新激活高端蛋白质研究。Orbitrap Eclipse 三合一超高分辨质谱仪  面对日益复杂的学术

间接原位PCR(原位杂交PCR)实验

实验材料 组织或细胞样品试剂、试剂盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNARnaseDTT乙醇仪器、耗材 玻片石蜡膜橡皮泥湿盒实验步骤 一、预杂交 1.   试剂与配制 2×SSC 50%去离子甲酰胺:用4×SSC配制(v/v) 预杂交液:2×SSC,5%硫

原位杂交与荧光原位杂交

 一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛

原位杂交与荧光原位杂交

 一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛

原位杂交与荧光原位杂交

一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛应

中科院大连化物所开发蛋白质复合物原位解析新技术

  近日,中科院大连化物所生物技术研究部生物分子高效分离与表征研究组(1810组)张丽华研究员团队研制了一种基于糖苷键的质谱可碎裂型交联剂,显著地提高了交联信息的检索通量和鉴定准确度,同时具有良好的两亲性和生物兼容性,实现了活细胞内蛋白质复合物原位交联和规模化精准解析。作为生命活动的执行者,蛋白质通

补体激活途径

①经典途径是以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂,补体C1~C9共11种成分全部参与了激活途径。除了抗原抗体复合物外,还有许多因子可激活此途径,如非特异性凝集的Ig、细菌脂多糖、一些RNA肿瘤病毒、双链DNA等。②替代途径又称旁路途径。由病原微生物等细胞壁成分提供接触面直接激活补体C3,然

在活体细胞或动物内瞬时激活蛋白质的普适性新技术

  北京大学陈鹏课题组与王初课题组发展了一种在活体细胞或动物内瞬时激活蛋白质的普适性新技术,具体成果以长文形式在Nature上在线发表题为Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems文章。  在复杂的生

旁路激活途径与经典激活途径不同之处

旁路激活途径与经典激活途径不同之处在于激活是越过了C1、C4、C2三种成分,直接激活C3继而完成C5至C9各成分的连锁反应,还在于激活物质并非抗原抗体复合物而是细菌的细胞壁成分—脂多糖,以及多糖、肽聚糖、磷壁酸和凝聚的IgA和IgG4等物质。旁路激活途径在细菌性感染早期,尚未产生特异性抗体时,即可发

LabSolutions电子许可证反激活与激活方法

在使用LabSolutions工作站时,我们可能会碰到以下问题:1、LabSolutions工作站打不开,经工程师指导无效,须重装工作站;2、重装电脑系统或是更换新的电脑。那么我们怎么才能获取激活码重新激活新安装的LabSolutions工作站呢?温馨提示 1、电子许可证在2017年开始使用,如果不

北京大学首次用小分子钯催化剂激活特定蛋白质

  近日,北京大学化学与分子工程学院陈鹏课题组首次利用小分子钯催化剂激活了活细胞内的特定蛋白质,相关研究成果在《自然—化学》杂志在线发表。   利用化学小分子调控生物大分子是化学与生命科学交叉领域内受到长期关注的问题,而如何在活体环境下实现高度特异的调控是目前面临的最大挑战之一。   陈鹏课题组