染色体制片步骤

1、取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止液终止消化,并将分裂相细胞收集在一个15ml的离心管中,并在1200r/min离心4min。4、将上清液倒掉,剩余50ul左右的液在管中,并轻微震动,使细胞沉淀重新悬浮。5、加入10ml的低渗液(0.075M KCL),第一毫升要逐滴加入,并边加边摇晃。6、37℃水浴中低渗30min。7、再加入1ml冰冷的固定液(甲醇:乙酸=3:1 的混合液),并马上摇匀,离心,1000r/min、10min。8、同步骤4。9、加入10ml冰冷的固定液,第一毫升要逐滴加入,边加边摇晃。10、室温下固定30min,然后离心,1000r/min、10min。11、同步骤4......阅读全文

染色体制片

实验概要掌握染色体制片的基本程序。实验步骤1. 取对数生长期细胞一个。2. 将培养基换成10mL DMEM(H) 10%FBS 0.1μg/mL秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3. 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4mL 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后

植物染色体制片

实验概要掌握染色体制片方法,并自选材料进行染色体制片;学会染色体核型分析。主要试剂酒精、冰醋酸、甲醇、盐酸、铁矾、苏木精(或洋红、石炭酸品红)、秋水仙碱(或对二氯苯饱和水溶液、8-羟基奎啉、富民隆乳剂)、二甲苯、中性树胶、石碳酸、甲醛、山梨醇等。主要设备显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸水纸、纱布块、

染色体制片步骤

1、取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止液终止消化,并将分

果蝇唾腺染色体制片实验

实验方法原理 果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态,由于多次复制而不分开,因而形成具有1 000-4 000根染色体丝的巨大染色体,又称为多线染色体.,本实验利用剖离果蝇三龄幼虫的唾腺,,压制染色体玻片标本的方法,观察多线染色体的特征。实验材料 果蝇试剂、试剂盒 水醋酸洋红仪器、耗材 解剖

果蝇唾腺染色体制片技术

实验概要1、练习分离果蝇幼虫唾腺的技术,学习唾腺染色体的制片方法; 2、观察果蝇唾腺的形态学及遗传学特征; 3、了解体细胞染色体配对现象;实验原理本世纪初,D.Kostoff用压片法首先在D.melanogaster果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体—唾液腺染色体(salivary

果蝇唾腺染色体制片实验_观察法

实验方法原理果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态,由于多次复制而不分开,因而形成具有1 000-4 000根染色体丝的巨大染色体,又称为多线染色体.,本实验利用剖离果蝇三龄幼虫的唾腺,,压制染色体玻片标本的方法,观察多线染色体的特征。实验材料果蝇试剂、试剂盒水醋酸洋红仪器、耗材解剖针双筒解

小白鼠骨髓细胞染色体制片技术

实验概要1、掌握哺乳动物骨髓细胞染色体玻片标本的制备方法。 2、观察动物染色体的形态特征,统计小白鼠体细胞中染色体数目。实验原理制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 制备动物染色体标本原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬液中

人体外周血淋巴细胞培养及染色体制片

实验概要学习和掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。实验原理人体的1ml 外周血中一般含有约1-3×106个小淋巴细胞,通常它们都处于间期的GO和G1期。在培养条件下给予药物刺激时,经过53-72小时可在培养物中获得大量的有丝分裂细胞,供染色体标本制备和分析之用。这种外周血培养方法是在1

人外周血淋巴细胞的培养及染色体制片实验

实验方法原理外周血是制备动物染色体标本的重要材料之一,但通常情况下哺乳动物的外周血中是没有分裂相的,其他动物如两栖类外周血中也只是偶尔能见到分裂相。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期,在人工离体培养的培养基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴细胞受刺激

人外周血淋巴细胞的培养及染色体制片实验

实验方法原理 外周血是制备动物染色体标本的重要材料之一,但通常情况下哺乳动物的外周血中是没有分裂相的,其他动物如两栖类外周血中也只是偶尔能见到分裂相。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期,在人工离体培养的培养基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴细胞受刺

植物花粉母细胞减数分裂染色体制片与观察

一、实验目的了解高等植物小孢子母细胞减数分裂的过程,观察减数分裂中染色体  的动态变化;学习并掌握植物细胞减数分裂染色体标本的制作方法。二、实验材料玉米(Zea mays )2n=20、水稻(Oryza sativa )2n=24、蚕豆(Vicia faba )2n=12等作物的花药,任选一种。

植物花粉母细胞减数分裂染色体制片与观察实验

一、实验目的 了解高等植物小孢子母细胞减数分裂的过程,观察减数分裂中染色体的动态变化;学习并掌握植物细胞减数分裂染色体标本的制作方法。 二、实验材料 玉米 (Zea mays )2n=20、水稻( Oryza sativa

动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤2

2.第3步可省去,改用1ml 注射器直接钻入骨末端即可,避免剪去骨骺时损失过多骨髓细胞; 3.在分离股骨大转子一端时,应防止折断股骨头; 4.如有需要,细胞悬液可用尼龙网过滤,进一步去除骨碎片及杂质。 四、实验结果及思考题 1.在低倍及中倍镜下观察Giemsa染色之后的染色体制片,寻

动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤1

实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色

显微制片技术

 显微制片技术     在进行显微鉴别时,首先要将“检样”制成适于镜检的标本。对于完整的药材可制成各种切面的切片;对于粉末药材(包括丸、散等成方)可直接装片或作适当处理后制片。²  永久片制作技术²  临时制片技术²  滑走切片机——半自动切片机²  透射光生物学显微镜²  连续变倍体视显微镜²  

显微制片试液

试液——封藏剂3.l  水合氯醛试液  为常用封藏液,也是透化剂。可使干缩的细胞膨胀而透明,并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质、叶绿素及挥发油等,加热后更为明显。3.2  甘油醋酸试液(斯氏液)  为常用封藏液,专用于观察淀粉形态,可使淀粉粒保持原形,便于测量其大小。3.3  甘油-乙醇溶液  封藏液,也

整装制片的概念

中文名称整装制片英文名称whole mount preparation定  义将生物样品整封的方法。用于单细胞、微小生物体或分散的器官。直接用于显微观察。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

病理制片技术取材

一、概念取材是将送检标本进行客观描述并将病变部位组织切成厚薄适度的小片后装入小盒(进入组织脱水程序),取材至关重要。二、取材环境取材室由取材台、记录桌、标本陈列架、电脑查询等组成;取材台应有良好的排风、进出水系统,配备齐全的刀、剪、镊、尺等基本工具和备用固定剂,记录桌应备 有打号机(无时应用铅笔

植物制片实验技术

实验概要植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。主要试剂1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸-酒精),又称万能固定液或称标准保全液。

植物制片实验技术

实验概要 植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。 主要试剂 1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸

病理制片技术——封片

封片是将组织切片封固保存于载玻片与盖玻片之间,使之不与空气发生接触,防止其氧化、褪色,利于镜检观察及保存。一、手工封片手工封片应注意以下七点。(1)所用树胶浓度要适中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀时易溢出玻片,当二甲苯挥发后,组织切片就会收缩产生胶不匀并出现大片气泡。太浓时,滴在玻片上树胶不易

病理制片技术——包埋

一、意义组织块经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后,用包埋剂(如石蜡、树脂、塑料等)将其包制成含组织块的蜡块或塑料块等的过程称为包埋。不同的包埋方法有不同的要求,经包埋后,组织可达到一定的硬度和韧度,有利于切成理想的薄片。二、包埋步骤先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具),而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱

什么是细胞整装制片?

 中文名称整装制片英文名称whole mount preparation定  义将生物样品整封的方法。用于单细胞、微小生物体或分散的器官。直接用于显微观察。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

园艺植物制片方法

一、徒手制片 1. 徒手制片及特点 徒手制片(切片)一般指徒手用刀片(常用单面刀片)把新鲜的植物材料切成薄片的制片方法。此法在植物制片中具有十分重要的地位,是一种普遍应用的制片方法。 徒手制片的主要优点是:能及时观察研究植物生活组织的结构和天然色彩;方法及用具简单,不需切片机等机械设备,短时间即可

细胞染色制片方法

1、   取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、   将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、   将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止

显微制片染色剂

染色剂3.4  苏丹Ⅲ试液   此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。3.5  钌红试液(临用新制)此液可使粘液染成红色。3.6  间苯三酚试液  此液与浓盐酸合用,可使木化细胞壁染成红色或紫红色。3.7  碘试液(临用现配。应置棕色瓶内保存)此液可使淀粉染成蓝色或紫

病理制片技术——组织脱水

组织经固定后会有大量水分,组织脱水是用某些溶剂逐渐将组织内的水分置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入。 一、手工脱水 1.器械准备:大标本缸6个,浸蜡用金属缸3个,脱水篮,恒温烤箱。 2.日常工作程序见表5.1。 表5.1 手工脱水日常工作程序

病理制片技术——常规染色

苏木精(hematoxylin)和伊(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是生物学、细胞学与组织学最广泛应用的染色方法。在病理科称为常规染色 方法。病理学的诊断都是以HE方法为基础的。染色的目的是把组织切片或细胞涂片等浸入染料及其他染色剂配成的染色液中,经过适当的时间和处理,

显微标本的制作粉末制片

粉末制片   主要用于粉末状的药材及药材粉末制成的成方制剂的观察。4.2.l  药材粉末制备  取干燥药材,磨或锉成细粉(通常应过80目以上药筛),装瓶,贴上标签。制备粉末时,注意取样的代表性。例如:根类药材要切取根头、根中段及根尾等部位,并全部磨粉,过4号筛,混合均匀,不得丢弃渣头。干燥时,一般温

显微镜常用制片法

常用制片法   药材切片标本的制作方法较多。在药材鉴定的研究工作中往往将其制成石蜡切片(永久切片),因制成的石蜡切片外形较完整,厚薄均匀,且可制得连续切片,观察时方便,又能长期保存。但由于制片技术较复杂,费时太多,不适用于日常检验。徒手切片或滑走切片法:表面装片:为观察叶类、花类及全草类药材的叶片、