多糖多酚植物RNA提取的利器
众多文献报道，许多植物由于未能有效地分离纯化出其组织中的RNA， 而阻碍了其分子生物学方面的研究进展。比如Northern杂交分析，体外翻译分析或建cDNA文库，RT-PCR及差异显示分析等研究，都需要高质量的RNA。因此，提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究的关键所在。RNA提取的常见难点研究表明，一些植物组织之所以比较难提取出高质量的RNA与这些植物组织中富含的一些成份有关，常见的有酚类化合物，多糖以及某些尚无法确定的次级代谢产物，另外还有就是富含较高活性RNase的组织。在完整的细胞内，这些物质与核酸是分离的，一旦细胞破碎，这些物质就会与RNA相互作用。酚类化合物的干扰许多植物组织特别是果实（如苹果、樱桃、李子、葡萄等）及树木类植物中富含酚类化合物。随着植物的生长，酚类物质的含量也会增加，因此幼嫩的植物才是最佳的提取材料。此外，针叶类植物的针叶中多酚的含量要比落叶植物的叶子中高很多。植物材料经过前期的破碎处理后，......阅读全文
植物材料RNA的3种提取方法
实验概要本实验介绍了3种提取植物材料RNA的方法，分别是：RNeasy Plant Mini Kit，TRIZOL试剂盒及CTAB法。实验步骤1. 利用RNeasy Plant Mini Kit提取总RNA 1) 于1.5 ml离心管中加入0.5 ml RLT缓冲液和5ul β-巯基乙醇；
植物材料RNA的3种提取方法
1. 利用RNeasy Plant Mini Kit提取总RNA1) 于1.5 ml离心管中加入0.5 ml RLT缓冲液和5ul β-巯基乙醇；2) 称取约100 mg材料，液氮研磨后转移到提取液中，涡旋混匀，56℃，2 min；3) 加入紫色柱子，23℃， 12000 rpm，离心2 min；4
多酚氧化酶（PPO）的分离提取
一、原理与目的多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶，植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成醌，是组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应，因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多
香菇多糖的香菇多糖的提取
香菇多糖属于极性大分子化合物，其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为：增加多糖溶解度有利于提高其生理活性；中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖；可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液，避免在强酸、碱溶液中进行，否则极易造成多糖中糖苷键断裂
不同植物组织中多糖的提取中AIR的制备
实验概要本人总结的多糖提取前AIR制备过程实验步骤AIR （alcohol insoluble residue）提取1）新鲜收取的植物在蒸馏水中清洗以除去培养基等物质，后冻干。2）将冻干的样品在液氮中研磨成粉末。3）AIR （alcohol insoluble residue）制备浮萍、拟南芥叶及根
动植物组织总RNA提取(Trizol法)和mRNA提取
一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织。 二、设备 研钵，冷冻台式高速离心机，低温冰箱，冷冻真空干燥器，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小时）装蒸馏水，然后加入0.01%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高
酵母RNA的提取及含量测定（地衣酚显色法）
一、实验目的 （1）熟悉酵母RNA的提取方法（2）掌握地衣酚显色法测定酵母RNA含量的原理和方法二、实验原理 RNA与浓盐酸共热时，即发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者与3， 5-二羟甲苯反应呈鲜绿色，该反应需用三氯化铁和氯化铜作催化剂，反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20－25
RNAplant植物RNA提取试剂使用说明
简介：RNAplant试剂可从植物组织，特别是富含多酚或淀粉的植物组织中（如马铃薯块茎，白松松针或嫩苗，和西红柿叶等）提取高纯度的总RNA。每100 ml可处理100 mg组织200次。保存条件：室温运输，4℃保存，可保存6-12个月。 准备试剂：液氮，研钵，无RNase离心管，5 M NaCl（无
植物总RNA提取方法及过程介绍
目的:用于 Northern 杂交、纯化 mRNA、RT-PCR 及 DDRT-PCR 等。材料:植物油嫩组织器官或种子萌发的幼苗。1、异硫氰酸胍法(1)试剂①异硫氰酸胍溶液:4mol/L 二异硫氰酸胍,25mmol/L 柠檬酸钠(pH7.0),0.5%十二烷基肌氨酸钠,0.1mol/L 巯基乙醇。
RNA提取心得（组织RNA提取和培养细胞的RNA提取）
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好，这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的）组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后
miRNA研究之RNA提取试剂的选择
RNA提取试剂的选择RNA提取对于科研人员来说并不陌生，但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上，现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要，为什么往往提取的RNA却容易失败呢？RNA提取失败的主要现象有三个：提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟
植物总RNA的提取实验原理和操作步骤
一、实验目的通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法二、实验原理RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶，所以RNA从细胞中释放出来时不
植物组织总RNA的制备：异硫氰酸胍—酚法
异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT与β－巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT与 十二烷基肌氨酸钠 （Sarcosyl）作用使蛋白质变性，从而释放RNA；酸性条件下DNA极少发生解离，同蛋白质一起变性被离心下来，RNA则溶于上清中。该法所提RNA纯度高完整性好较适合纯化mRNA，
异硫氰酸胍酚法植物组织总RNA的制备
异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT与β－巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT与 十二烷基肌氨酸钠 （Sarcosyl）作用使蛋白质变性，从而释放RNA；酸性条件下DNA极少发生解离，同蛋白质一起变性被离心下来，RNA则溶于上清中。该法所提 RNA纯度高完整性好较适合纯化mR
多酚氧化酶的提取、纯化和活力测定
实验概要本文介绍了多酚氧化酶提取、纯化和活力测定的原理及方法等。实验原理很多植物受到机械损伤时在空气中会逐渐变成褐色，这是损伤时植物细胞破碎，原来彼此分开的多酚氧化酶和多酚类物质接触反应的结果。反应如下：＋H2O多酚氧化酶＋1/2O2多酚氧化酶(po1yphenoloxidase，PP0)是一种含铜
多酚氧化酶的提取、纯化和活力测定
实验概要本文介绍了多酚氧化酶提取、纯化和活力测定的原理及方法等。实验原理很多植物受到机械损伤时在空气中会逐渐变成褐色，这是损伤时植物细胞破碎，原来彼此分开的多酚氧化酶和多酚类物质接触反应的结果。反应如下：＋H2O多酚氧化酶＋1/2O2多酚氧化酶(po1yphenoloxidase，PP0)是一种含铜
香菇多糖的提取方法
香菇多糖属于极性大分子化合物，其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为：增加多糖溶解度有利于提高其生理活性；中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖；可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液，避免在强酸、碱溶液中进行，否则极易造成多糖中糖苷键断裂
香菇多糖的提取步骤
香菇多糖属于极性大分子化合物，其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为：增加多糖溶解度有利于提高其生理活性；中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖；可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液，避免在强酸、碱溶液中进行，否则极易造成多糖中糖苷键断裂
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物（如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等）组织中，PPO是与内囊体膜结合在一起的，天然状态无活性，但将组织匀浆或损伤后PPO被活化，从而表现出活性。在果蔬细胞组织中，PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异，绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内；马铃薯块茎中几乎所
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物（如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等）组织中，PPO是与内囊体膜结合在一起的，天然状态无活性，但将组织匀浆或损伤后PPO被活化，从而表现出活性。在果蔬细胞组织中，PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异，绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内[7]；马铃薯块
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物（如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等）组织中，PPO是与内囊体膜结合在一起的，天然状态无活性，但将组织匀浆或损伤后PPO被活化，从而表现出活性。在果蔬细胞组织中，PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异，绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内[7]；马铃薯块茎中
李子提取多糖方法
溶剂提取法、酶提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、高压脉冲提取法、超临界流体萃取法。具体操作步骤如下：1、溶剂提取法：(1)水提法：以水为溶剂，可采用热水浸提或冷水浸提（植物多糖多采用热水浸提，可直接或离心去除杂质），由于多糖不溶于乙醇，可通过沉淀将多糖提纯出来。水提法的确缺点在于温度高、耗时
RNA的提取
一、准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC处理过的水配制）。二、操作步骤：1. 匀浆处理：a. 组织 将组织在液氮中磨碎，每50-100mg组织加入1ml TRIzol，用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b. 单层培养细胞
RNA的提取
【实验原理】Trizol 试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA 的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA 的完整性。加入氯仿后离心，样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后，RNA 可以通过异丙醇沉淀获得。【实验仪器】1. 匀浆机2. 低温离心机3. 涡旋器【试剂及配制】1
RNA提取
RNA提取（主要内容如下）Tips for Handing RNA Total RNA IsolationmRNA IsolationrRNA IsolationOthersQ & A posted in the Method Forum Basic Procedures for Handing
OD260/OD280比值偏低问题
蛋白质污染：确保不要吸入中间层及有机相。减少起始样品量，确保裂解完全、彻底。加入氯仿后首先要充分混匀，并且离心分层的离心力和时间要足够。如果所得RNA的OD260/OD280比值偏低，则用氯仿重新抽提一次，再沉淀，溶解。2.苯酚残留：确保不要吸入中间层及有机相。加入氯仿后首先要充分混匀，并且离心分层
高通量测序中植物样本的制备方法
高通量测序技术已广泛应用于植物研究中，但植物材料中较多的蛋白质、多糖以及酚、脂类等次生代谢物质，提取核酸的难度往往比动物或原核生物样本大，因此如何从植物样本中得到高质量的核酸进行后续的测序，成为在植物高通量测序应用中的首要因素。根据核酸类型，可有如下制备方法可参考： 1. 植物基因组 DNA
关于香菇多糖的提取的提取方法介绍
香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为：增加多糖溶解度有利于提高其生理活性；中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖；可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键
核酸提取——RNA提取与DNA的提取
核酸分为两大类：一类为核糖核酸（RNA），另一类为脱氧核糖核酸（DNA）。核酸的分子量极大，从数万到亿万。核酸是两性化合物，在一定的等电点溶于水，其水溶液呈酸性，不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别，在一定浓
核酸提取——RNA提取与DNA的提取
核酸分为两大类：一类为核糖核酸（RNA），另一类为脱氧核糖核酸（DNA）。核酸的分子量极大，从数万到亿万。核酸是两性化合物，在一定的等电点溶于水，其水溶液呈酸性，不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别，在一定浓