ELISA法与PCR法检测乙型肝炎病毒标志物的实验研究

[摘 要] 目的:探讨ELISA法和PCR法联合检测对乙型肝炎诊断的临床价值。方法:采用ELISA法与PCR法同时检测421份血清标本。结果:用ELISA法测定HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)时,HBVDNA阳性率高达90.6%;用ELISA法测定HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+),HBVDNA阳性率为29.8%。结论:两种方法联合检测对临床有不同的指导意义。 [关键词] 乙型肝炎;ELISA;荧光定量PCR;乙肝5项 乙型肝炎是世界上最常见的传染病之一,每年死于该病的有100多万人[1]。乙肝病毒(HBV)携带者约占正常人群的10%~15%,HBV携带者主要依靠血清标志物乙肝5项(即HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc)来检查发现,但由于检查方法的多样性,有时会出现漏检和误检。随着科学技术的不断发展,除传统的ELIS......阅读全文

ELISA法与PCR法检测乙型肝炎病毒标志物的实验研究

[摘  要] 目的:探讨ELISA法和PCR法联合检测对乙型肝炎诊断的临床价值。方法:采用ELISA法与PCR法同时检测421份血清标本。结果:用ELISA法测定HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)时,HBVDNA阳性率高达90.6%;用ELISA法测定HBsAg(+)、抗HBe(+)

PCR产物的检测PCRELISA法

在一个引物的5’端标记上生物素以便使其能与包被板上的亲合素结合而固定PCR产物,而在另一引物的5’端标记FITC,用HRP标记的抗FITC抗体与之结合显色,即可进行常规ELISA检测。如设立标准对照,此技术还可用于定量分析。 【试剂与配置】 包被液:4.3mmol/L Na2HPO4,

PCRELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复

PCRELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复

PCRELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。  由于DNA聚合酶不

痘苗DNA检测实验——PCR-法

除了 PCR 和 Southern 杂交可以检测病毒 DNA 外,也可以利用 DNA 点迹杂交方法检测在分离的噬斑中的重组病毒。本实验主要介绍用这3种方法来检测痘苗DNA。实验材料贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒PBS胰酶/EDTA干冰/乙醇

HBV-DNA与HBV

   【摘要】目的: 探讨荧光定量PCR检测HBV DNA与HBVm的关系。 方法: 采用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验(ELISA)对159份HBVm 8种不同阳性模式及67份HBVm全阴模式血清进行HBV DNA检测。 结果: HBsAg、HBcAb、HBeAe阳性者HBV DN

血清HBV标志物、前S1抗原与HBVDNA检测结果的相关性

【摘要】  目的  探讨HBV血清标志物前S1抗原(HBVPreS1-Ag)与HBVDNA的相关性。方法  用ELISA法对乙肝患者分别进行五项HBV血清标志物,前S1抗原检测,同时采用PCR法检测HBVDNA的含量。结果  大三阳组前S1抗原(+)检出率均高于小三阳组。前S1抗原(+)组血清HBV

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃低温退火,

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

            实验方法原理 多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

PCR法检测乙肝病毒(HBV)主要用于对病毒性肝炎的诊断、疗效观察及预防研究工作。实验方法原理多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃ 低温退火,

关于乙型肝炎病毒DNA测定的简介

  乙型肝炎病毒DNA测定,临床上检测乙肝病毒(HBV)及其复制情况的方法主要有酶联免疫法(ELISA)检测乙肝两对半血清标志物和PCR法测定HBV-DNA。ELISA是临床诊断HBV感染的传统手段,它检测的是人体对HBV的免疫反应状态。而PCR可检测病毒DNA。HBV-DNA检查主要是定性和定量的

关于乙型肝炎病毒定量的简介

  临床上检测乙肝病毒(HBV)及其复制情况的方法主要有酶联免疫法(ELISA)检测乙肝两对半血清标志物和PCR法测定HBV-DNA。ELISA是临床诊断HBV感染的传统手段,它检测的是人体对HBV的免疫反应状态。而PCR可检测病毒DNA。HBV-DNA检查主要是定性和定量的检查。①定性,即确定是阴

化学发光与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物方法学比较

  病毒性肝炎中乙型肝炎的危害较大,我国又为乙肝的高发区,约占世界HBV感染者的一半。乙肝病毒的病原体不仅具有传染性,还可能导致发展成肝硬化,甚至肝癌,所以HBV标记物的早期、准确、定量检测对乙肝临床诊断、疗效观察及预防具有重要意义。目前国内检测HBV-M使用较多的仍是占主导地位的ELISA法。随着

乙型肝炎的实验室诊断及质量控制

2005年12月我国第一部《慢性乙型肝炎防治指南》颁布,2006年1月卫生部颁布了《2006-2010年全国乙型病毒性肝炎防治规划》。其目的在于科学、规范和有效开展我国乙型肝炎防治工作。卫生部计划在未来3~4年内逐步建立全国乙型肝炎实验室检测网络,制定《全国乙型肝炎实验室检测工作技术规范》,加强实验

ELISA法检测立克次体

ELISA法检测立克次体 立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾病。临床上常见的有普氏立克次体、莫氏立克次体、恙虫病立克次体和Q热立克次体

乙型肝炎病毒DNA荧光PCR定量检测

Ct值是荧光定量PCR的一个指标,代表达到设定阈值所需要的循环数。一般Ct值越小定量值越高。通俗地将,这个检测结果的意义是:通过荧光定量PCR的方法检测血液中乙肝病毒DNA的量。仪器测得Ct值为18.20,根据Ct值与定量DNA之间的换算公式,计算出每毫升血中含有82450000(八千多万)个乙肝病

化学发光法和ELISA法检测乙肝病毒五项指标结果比较

郑黎明(贵航平坝医院检验科   平坝   561100)[摘要]目的:比较化学发光免疫测定(CL)与酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法检测乙肝病毒标志物的优缺点。方法:用上述两种方法对乙型肝炎病毒五项标志物分别进行检测,然后进行结果分析。结果:化学发光法检测乙型肝炎表面抗原和核心抗体,与ELIS

溶血和脂浊对ELISA法检测乙肝标志物的影响

湖北省十堰市中医院(442011)任传梅张青梅摘要 目的:探讨溶血和脂浊对ELISA法检测乙肝标志物的影响。方法:采用ELISA法检测未溶血,空腹的血清的乙肝标志物和溶血的,脂浊的血清的结果比较。结果:溶血对乙肝标志物的检测有一定的影响,脂浊对乙肝标志物检测无影响。溶血和脂浊是临床检验工作中最常见的

“大三阳”“小三阳”是怎么来的?(内附乙肝五项解析)

乙型肝炎病毒是一种DNA病毒,属于嗜肝DNA病毒科,该科病毒以RNA中间体为模板经反转录合成DNA链。在电镜下观察,HBV感染者血清中存在三种形式的颗粒:Dane颗粒、小球形颗粒、丝状或核状颗粒。一般情况下,血清中小球形颗粒最多而Dane颗粒最少。常用检测方法:在我国有50%~70%的人受过感染,由

乙肝病毒血清标记物与血清HBVDNA的关系

【摘要】  目的: 探讨不同乙肝感染模式的患者与HBV-DNA定量结果进行对比分析。方法: 采用ELISA方法检测乙肝病毒血清标记物, 荧光定量PCR (FQPCR) 检测HBV-DNA, 比较二者之间的关系。结果: HBsAg、 HBeAg、 HBcAb阳性组和HBsAg、 HBeAg阳性组 H

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设

PCR法检测支原体

实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.

多重PCR法检测STEC

产志贺毒素大肠杆菌(STEC)具有很强的致病性,全球范围内由其引发的食物中毒和其他公共卫生事件呈逐年升高之势,严重威胁人类的健康。开发快速可靠的检测手段对其引发的食源性疾病的监测、控制和预防意义重大。本文结合对STEC分子生物学特征的研究,着重介绍了多重PCR检测技术在检测食品中STEC方面的

ELISA法检测丝虫抗体

丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病,通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎,晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制

ELISA法检测细胞凋亡

(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特

大鼠Ghrelin-ELISA检测法

大鼠Ghrelin ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Ghrelin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Ghrelin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Ghrelin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化