EttanDIGE荧光差异蛋白表达分析系统
原理和应用： Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上，结合了多重荧光分析的方法，在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品，并第一次引入了内标的概念，极大地提高了结果的准确性，可靠性和重复性。在DIGE技术中，每个蛋白点都有它自己的内标，并且软件全自动根据每个蛋白点的内标对其表达量进行校准，保证所检测到的蛋白丰度变化是真实的。DIGE技术可检测到样品间小于10%的蛋白表达差异，统计学可信度达到95%以上。利用Ettan DIGE技术还可以对微量（少到5μg）样本进行蛋白质组学分析，例如激光捕获显微切割（LCM）得到的样品或者很难获得的珍贵样品等。 Ettan DIGE系统包括CyDye DIGE荧光标记物，IPGphor II/Ettan DALT电泳系统，Typhoon多功能激光共聚焦扫描仪和DeCyder差异分析软件......阅读全文
杆状病毒表达系统用于表达多个非融合蛋白的转染载体
这种载体的主要特征是含有2个或2个以上相同的启动子，可表达2条或2条以上多肽链的蛋白。 如Emery和Bishop[8]等构建的pAcVC2转染质粒，含有两个方向相反的多角体基因启动子。重组病毒可同时表达多角体蛋白和淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（LCMV） N蛋白。Takehara[9]等构
荧光分析系统基本操作
在石油勘探开发过程中，地质岩心的荧光发光现象是初步判断油气显示层段的最简便、最直观实用的重要标准之一。岩心是可反复使用的宝贵实物资料，经过多次观察和取样分析后，其表面的油气会逐渐逸出、挥发，或岩心本身逐渐被腐蚀、风化甚至破坏，无法再现取心时的荧光情形。因此，岩心刚出筒时的物性、含油性特征原态永久性保
新时代下对于Western－Blotting发表文章的新要求（二）
4.提交原始数据，例如：JBC，PLOS和CELL等杂志都要求要提供原始数据 聊完了期刊杂志的一些要求，那Azure Sapphire双模式多光谱激光成像系统是如何帮助您获得满足期刊杂志Western Blotting要求的数据： ★ Sapphire是多荧光检测系统，可多达4个激光光源，同时进
图解光诱导荧光蛋白系统
GFP蛋白曾经为蛋白质定位等相关研究带来革命性的进展，而随着具有和GFP类似遗传学特征的光学指示剂蛋白的出现，蛋白质相关的动态研究也将获得更多的手段和技术，本文详细介绍了激光诱导荧光系统在蛋白质研究中的应用。 近年来随着蛋白质学研究的进展，研究人员相继发现和特异克隆了一些特殊蛋白质。这些蛋
药物研发的好帮手—蛋白质表达系统
近年来，随着生物药市场和基因工程技术的发展，重组治疗性抗体或者单抗的需求在生物药中的比例也逐年上升。重组mAbs被应用于包括癌症及免疫系统缺陷在内的许多疾病的治疗当中。重组mAbs通过基因工程技术改造后可以在多种宿主细胞表达。重组mAbs在表达后进行翻译后修饰、蛋白质折叠、组装及适当的糖基化才能具有
关于大肠杆菌重组蛋白表达系统解答
大肠杆菌（E.coli）重组蛋白表达技术经过多年的发展，相对于其他表达体系，算是非常成熟的一个体系。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点：遗传背景清楚；易于培养和控制；转化操作简单；表达水平高；成本低；周期短。本篇将对大肠杆菌重组蛋白表达系统的常见技术问题进行一一解答。1：大肠杆菌表达体系的优点是什么
药物研发的好帮手蛋白质表达系统
近年来，随着生物药市场和基因工程技术的发展，重组治疗性抗体或者单抗的需求在生物药中的比例也逐年上升。重组mAbs被应用于包括癌症及免疫系统缺陷在内的许多疾病的治疗当中。 重组mAbs通过基因工程技术改造后可以在多种宿主细胞表达。重组mAbs在表达后进行翻译后修饰、蛋白质折叠、组装及适当的糖
杆状病毒表达系统用于表达单一非融合蛋白的转染质粒
由于外加的多角体蛋白或其它的氨基酸可能对外源蛋白的生物活性或细胞定位产生影响，所以用于表达非融合型蛋白的转移载体被广泛应用。几种不同的策略被用于设计高水平表达非融合蛋白的转移载体： (1)如pAcRP[5]系列等，都在多角体基因启动子启始密码ATG上游引入一个单一的限制性多克隆位点； (2)
寻找差异表达基因方法——简化SSH法
无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官，或者是从正常的组织突变为肿瘤组织，都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因，因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法，抑制消减杂交（SSH）是比较有效的一种方法
研究不同育性的油松胚胎在蛋白质层面的表达差异
【APT出品】做组学，发文章 so easy！ Differential proteomic analysis revealing the ovule abortion inthe female-sterile line of Pinustabulaeformis Carr.
做免疫荧光如何看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达
复染细胞核，常规用过的是DAPI进行细胞核复染（蓝色）。目的是为了鉴别目的蛋白的位置是胞核表达，还是胞质表达或胞膜表达。一般来讲，如果是胞核表达，会和蓝色的细胞核颜色重叠；胞质或胞膜表达则不会重合，单独看目的蛋白的表达，会看到有个黑色的空洞的，尤其细胞图像更为明显。从楼主的图片看，貌似是在胞核表达（
CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较
CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统，为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识，特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较，从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解1．CHO细胞表达系统 （1）优点 CHO细胞属于成纤维细胞，既可以贴壁生
自动荧光显微系统：高效光控蛋白
光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一，通过结合遗传学和光学方法，科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性，以及蛋白相互作用。 在进行光遗传学实验的时候，研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式（photobleaching mode）。虽然目前特殊激光或其它通过光学
自动荧光显微系统：高效光控蛋白
光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一，通过结合遗传学和光学方法，科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性，以及蛋白相互作用。 在进行光遗传学实验的时候，研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式（photobleaching mode）。虽然目前特殊激光或其它通过
蛋白质的哪几种表达系统和方式
1.表达系统 a大肠杆菌 b哺乳动物细胞 c其他表达系统包括果蝇表达系统、杆状病毒表达系统和酵母表达系统2.表达方式 瞬时表达 稳定表达 诱导表达
重组蛋白真核表达系统技术平台的特色
重组蛋白作为生物制药在医学中作用显著，一般用转基因动物的乳腺产生。重组蛋白真核表达包括酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞表达系统、腺病毒表达系统等。一般可以正确折叠，包含各种修改。但是价格高，周期长。 重组蛋白真核表达系统技术平台的特色 快速、highly-stringent筛选：只筛选到高表达稳
用于外源蛋白质生产的细菌表达系统
细菌表达系统有各种各样的载体和宿主菌可供选择，大部分工程菌的增殖时间短, 不仅便于快速评价实验结果，而且降低了技术和设备无菌要求的严格性。经过简单的调整, 许多在实验室规模下具有的这些内在优点在大规模的自动生产过程中也具有 。实验步骤一、使用大肠杆菌生产外源蛋白有越来越多的细菌表达系统可用于外源蛋白
用于外源蛋白质生产的细菌表达系统
实验方法原理 实验步骤 一、使用大肠杆菌生产外源蛋白 有越来越多的细菌表达系统可用于外源蛋白的生产。影响选择某个表达系统的因素包括目标蛋白质的天然性质、使用者的经
使用酶标仪的细胞成像系统检测标签蛋白的表达
优势： 带细胞成像系统的功能模块扩展了微孔读板机的检测应用2. 方便检测每个细胞或每孔的标签蛋白的表达水平3. 按照一般微孔读板机的简单流程4. 细胞可视化数据输出，增加了数据可信性某些细胞蛋白存在或不存在，可代表着细胞对某些刺激的反应、某种分化的状态或特定细胞类型的独特特征或者基因
新时代下对于Western－Blotting发表文章的新要求（一）
Western Blotting技术已经问世四十多年了，依然是蛋白分析中最常用和主流的方法。但近些年Western Blotting数据重现性，稳定性，定量准确性等问题，也使这项技术被推到了风口浪尖，同时也有很多文章因为Western Blotting数据的问题而撤稿，而为了尽可能提高Weste
做免疫荧光怎么看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达
做免疫荧光怎么看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达免疫组化和免疫荧光都是蛋白定位的检测（也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜）。免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异
数字PCR在基因表达差异研究的应用
数字PCR由于检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的绝对定量，因而可以提供比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究，尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况，如：mRNA、microRNA、lncRNAs等的表达分析；等位基因的不平衡表达；单细胞基因表达分析；外泌体核酸分子定量分析等。
PNAS：小鼠模型需慎用，基因表达差异大
PNAS：小鼠模型需慎用，基因表达差异大 小鼠被广泛用于模拟人类代谢、疾病和药物应答，是医学研究中的一个基本工具。然而斯坦福大学的研究团队指出，人类和小鼠的基因表达存在着惊人的差异，不论是蛋白编码基因还是非编码基因。这项研究发表在十一月十七日的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。 Mic
面筋测定系统标准粉和特制粉的蛋白差异
关于5个不同品种面粉样品的面筋测定系统分析结果表明,和特殊面筋吸水率差异不显著。吸水率的相关性面筋蛋白质和湿面筋含量显著负相关,面粉0.01显著水平。面筋吸水率和千面筋蛋白相关性是显著的正相关。0.05显著水平,特殊的粉末在0.01显著水平。面筋测定系统测定的湿面筋蛋白含量经t检验，标准
蛋白表达结果是分析od还是比值
当蛋白中掺入了核酸之 后，OD260：OD280比值变化很明显，尤其是纯的蛋白制品中掺入了一点点核酸后，变化最明显。例如：纯的蛋白样品，其OD260：OD280比值为 0.57，而掺入5%的核酸之后，该笔直上升到了1.06。但是反过来却是不成立的，即：这个比值不能用来指示核酸被蛋白污染的程度。因为核
甲醇酵母表达系统的高效表达特性
已有多种蛋白质的基因在该表达系统中克隆成功，包括蛋白酶、酶抑制剂、受体、单链抗体等。尽管各种外源蛋白质产生的水平不一，但各种蛋白质在甲醇酵母中的产生水平均为在细菌、昆虫或哺乳动物等表达系统中产量的10～100倍[2]。如表皮生长因子（EGF）在酿酒酵母中的产量为7.4mg/L，而在甲醇酵母中为4
赵方庆团队开发环形RNA定量和差异表达分析新方法
2020年1月3日，中国科学院北京生命科学研究院赵方庆团队在《自然-通讯》（Nature Communications）杂志上发表题为Accurate quantification of circular RNAs identifies extensive circular isoform sw
Decodeseq方法显著提高差异表达基因分析的准确性
鉴定差异表达基因是许多生物医学研究项目的基础步骤，利用转录组进行差异表达（Differential Expression, DE）分析是目前最主流的方法，得到了广泛应用。例如，两个常用于转录组DE分析的算法 edgeR 和 DESeq2 已经被引用了超过上万次。 在DE分析中，如果使用的生物学
北大年轻教授最新PNAS：解析肠道病原微生物新机制
北京大学，北京分子科学国家实验室等处的研究人员发表了题为“Comparative proteomics reveal distinct chaperone–client interactions in supporting bacterial acid resistance”的文章，利用新开发的
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达（一）
简介在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众