一级菌种培养基的制备实验
一、实验目的1.了解一级菌种培养基配制的原则;2.掌握一级菌种培养基配制的工艺流程;3.学会一级菌种培养基配制的具体方法步骤;4.学会棉塞的制作方法和手提式高压蒸汽锅的使用方法。二、实验设备、工具和材料手提式高压锅、1000~1500W电炉、感量1/10g的粗天平、1000mL量杯、玻璃漏斗、漏斗架各一个,8~10cm长乳胶管一根,止流夹一个,20mm×200mm试管150支左右,铁丝筒两个,小刀和剪子一把,普通棉花250g,牛皮纸、马铃薯、琼脂和葡萄糖或蔗糖适量。三、实验步骤(1)取适量马铃薯,削去皮,挖去芽眼。称取200g,切成薄片或小块,用清水淘洗之后,放入锅内,加水1200mL,用文火煮沸20~30min,用四层纱布过滤,取滤液1000mL,如不足加水补足1000mL。(2)称取琼脂20g,洗净剪碎,加入马铃薯煮出液中,用文火加热,边煮边搅拌,直至全部琼脂融化,再用四层纱布过滤,并用热水补足1000mL,加入预先溶解的葡......阅读全文
样品制备方式
(1)无机材料溶剂清洗或长时间抽真空,以除去试样表面的污染物。如对陶瓷或金属样,用乙醇或丙酮擦洗,然后用蒸馏水洗掉溶剂,吹干或烘干。用氩离子刻蚀法除去表面污染物。擦磨、刮剥和研磨。表层与内表面的成分相同的固体样品,用SiC纸擦磨或用刀片刮剥;粉末样品采用研磨的办法使之裸露出新的表面层。真空加热法。对
TEM样品制备
样品制备由于透射电子显微镜收集透射过样品的电子束的信息,因而样品必须要足够薄,使电子束透过。l 试样分类:复型样品,超显微颗粒样品,材料薄膜样品等。l 制样设备:真空镀膜仪,超声清洗仪,切片机,磨片机,电解双喷仪,离子薄化仪,超薄切片机等。▽超细颗粒制备方法示意图来源:公开资料▽材料薄膜制备过程示意
桥粒的制备
实验材料 牛口鼻部或舌头试剂、试剂盒 柠檬酸缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 在当地屠宰场获取新鲜的牛口鼻部或舌头,立刻埋于碎冰中。对于口鼻部:用剃刀刮掉口鼻部最外面的一层(角质层的角膜),收集下面的一层(棘层)。对于舌头:从结缔组织的上面分解出表皮。2. 用剪刀将解剖来的表皮剪成 0.5 c
血清制备实验
实验材料 血仪器、耗材 低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤 1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让血块固缩);3. 当血清自然析出后, 4℃,3000 转/分,离心10 分钟,分离血清,弃去不溶物;4. 将血清移至一干净试管,并分装成小份
TEM样品制备
样品制备由于透射电子显微镜收集透射过样品的电子束的信息,因而样品必须要足够薄,使电子束透过。l 试样分类:复型样品,超显微颗粒样品,材料薄膜样品等。l 制样设备:真空镀膜仪,超声清洗仪,切片机,磨片机,电解双喷仪,离子薄化仪,超薄切片机等。 ▽ 超细颗粒制备方法示意图来源:公开资料 ▽ 材料薄膜制备
TEM样品制备
由于透射电子显微镜收集透射过样品的电子束的信息,因而样品必须要足够薄,使电子束透过。 试样分类:复型样品,超显微颗粒样品,材料薄膜样品等。 制样设备:真空镀膜仪,超声清洗仪,切片机,磨片机,电解双喷仪,离子薄化仪,超薄切片机等。
凝胶的制备
凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀,可用加热法,即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸,这样可大大中速膨胀,通常在1-2小时内即可完成。特别是在使用软胶时, 自然膨胀需24小时至数天,而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间,而且还可消毒,除去凝胶中
血涂片制备
血涂片制备(preparation of blood smears)是显微镜血细胞形态观察的前提。 1﹒操作 (1)血标本: ①静脉采血标本:用EDT A ·K2抗凝1~2h内的标本,使用玻棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1c m处加1滴抗凝血,直径约4 mm。 ②皮肤采
样品的制备
6 分析步骤6.1样品的制备测定前,应保证实验室样品至少在室温(20℃~25℃)下保持48h,以便使影响不溶度指数的因素,在各个样品中趋于一致。然后反复振荡和反转样品容器,混合实验室样品。如果容器太满,则将全部样品移入清洁、干燥、密闭、不透明的大容器中,如上所述彻底混合。对于速溶乳粉,应小心地混合,
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末
细菌中制备基因组DNA实验——小量制备
真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液
如何用制备色谱柱制备低含量的杂质?
制备色谱柱为Zorbax SB-C18 9.4*250mm及gilson馏分收集器,色谱仪为Agilent 1100或LC-6A。想用其制备面积归一化法含量为0.05%左右的杂质,初步提纯后用高分辨的LC-MS进行定性分析。如何设定色谱条件,如流量,进样量,样品的浓度,切割点的设置,是否要浓缩,
SDS碱裂解法制备质粒DNA——大量制备
实验方法原理用碱和 SDS 处理可以从大规模(500 ml)的细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或 CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化。试剂、试剂盒碱裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培养液实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液(1) 碱
SDS碱裂解法制备质粒DNA——小量制备
用碱和 SDS 处理可以从细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的质粒则可以用电泳或限制性核酸内切酶消化的方法鉴定;经聚乙二醇处理进一步纯化后,其可以用做 DNA 测序反应的模板。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理用碱和 SDS 处理可以从小量 ( 1~2 ml)细菌培养物中
质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法
实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的
SDS碱裂解法制备质粒DNA——中量制备
实验方法原理用碱和 SDS 处理可以从中度规模(20~50 ml)的细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的 DNA 产物可用于电泳分析或限制性内切核酸酶消化,经柱层析进一步纯化之后,还可用于转染哺乳动物细胞。试剂、试剂盒碱裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培
转运反应成分的制备实验——胞质液的制备
实验材料血试剂、试剂盒酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、网状细胞和红细胞胞质液的制备1. 自动物身上采血,每 7 ml 血加 1 ml 酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液(ACD;75 mmol/L 柠檬酸三钠,38 mmol/L 柠檬酸,136 mmol/L 葡萄糖,pH 5.0
SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验
实验方法原理 用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化 实验步骤
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的
SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验
用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验方法原理用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验步骤材料:缓
SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验
实验方法原理 用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验步骤 材料:缓冲液和溶液:碱裂解液 I:50 mmol/L 葡萄糖25 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)10 mmol/L EDTA(
质粒DNA的小量制备实验——碱裂解小量制备法
实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱,在特定的条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS乙酸甲乙醇仪器、耗材离心机漩涡混合器分光光度计实验步骤1
亮绿的制备方法
在盐酸或硫酸介质中,苯甲醛与N,N-二乙基苯胺缩合,产物经氧化,并转化为硫酸盐。最初生成的树脂状物质会突然固化为良好的晶体。用于亚硫酸盐测定,制造细菌培养基,用以鉴别大肠杆菌及其他乳糖发酵菌,培养分离粪便中的伤寒杆菌。
McAb的制备方法
1、体外培养 在细胞培养过程中杂交瘤细胞能产生和分泌McAb,但是一般产生的抗体量很少,约10~100μg/ml。近年来发展了各种新型培养技术和装置,包括用无血清培养液作悬浮培养法,中空纤维培养系统,全自动气升式或深层培养罐以及微囊或粒珠培养系统等。为了大批量生产McAb,有的公司已建成体内外
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS
质粒的Midi制备
· Plasmid Midi-preps (NWSFC)Diatomaceous Earth-based midi-prep. This procedure is the method of choice for isolating double stranded plasmid-b
水果样品的制备
试验过程从打开的包装(即未经消毒)中取出样品,立即转移到具玻塞的容器中,置于低温处。为避免发酵的影响,应尽快测定乙醇、总酸、挥发性酸、固形物和糖分,尤其对于果汁和新鲜水果更应如此。(如果加入在测量中所需的略过量的中性Pb(OAc)2液,则用于测定蔗糖及还原糖的那部分样品可在称量后放置几天也不致发酵。
质粒的大量制备
· Plasmid Mini and Maxi Prep Methods (Gimila Lab) · Maxi-preps and all media, solutions (NWFSC)Isolation of cosmid, plasmid and P1 DNA
半缩酮的制备
制备缩酮传统的合成方法是在酸催化下,加热回流,醛酮与醇直接反应生成缩酮,但存在反应时间长、副反应多、后处理复杂等缺点;随后各种新的合成缩酮的催化体系被不断发现,如离子液体、纳米TiO等。这些催化剂体系有效地催化了羰基缩酮反应的发生,但仍存在反应时间较长、需加热回流、工艺复杂等缺点。20世纪20年代,
siRNA的制备方法
化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的siRNA的情况