用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B分离磷酸肽实验
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B 分离磷酸肽实验 试剂、试剂盒 EDTA 乙酸铵 乙酸钠 乙酸 氯化铁 Tris-HCl Sepharose 6B 柱 仪器、耗材 SpeedVac 型旋转浓缩器 实验步骤 材料与设备Sepharose 6B 柱（1x6 cm;~5 ml), 含亚氨基二乙酸（......阅读全文
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B－分离磷酸肽实验
在进行蛋白质（phosphorylated protein) 的结构与功能分析时，接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的（未磷酸化的）肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载有铁 (正铁离子）的金属螯合填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。暂未评分点评实验，有机会获丁当
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B－分离磷酸肽实验
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B 分离磷酸肽实验 试剂、试剂盒 EDTA 乙酸铵
亲和层析凝胶指南
GE HealthcareBenzamidine Sepharose™ 6B is p-aminobenzamidine covalentlyattached to Sepharose 6B by the epoxy coupling method.p-Aminobenzamidine (PAB),
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验 试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分 CaCl2(固体)
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材 透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱 蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤 材料与设备含钙调蛋白的组分，从 DEAE 柱收集后合并所得（见实验 4)透析袋（标称截
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
试剂、试剂盒含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤材料与设备含钙调蛋白的组分，从 DEAE 柱收集后合并所得（见实验 4)透析袋（标称截留分子量
亲和层析的载体要求
理想的载体应具有下列基本条件：①不溶于水，但高度亲水；②惰性物质，非特异性吸附少；③具有相当量的化学基团可供活化；④理化性质稳定；⑤机械性能好，具有一定的颗粒形式以保持一定的流速；⑥通透性好，最好为多孔的网状结构，使大分子能自由通过；⑦能抵抗 微生物和醇的作用。 可以做为固相 载体的有 皂土、
亲和层析的载体要求
理想的载体应具有下列基本条件：①不溶于水，但高度亲水；②惰性物质，非特异性吸附少；③具有相当量的化学基团可供活化；④理化性质稳定；⑤机械性能好，具有一定的颗粒形式以保持一定的流速；⑥通透性好，最好为多孔的网状结构，使大分子能自由通过；⑦能抵抗 微生物和醇的作用。 可以做为固相 载体的有 皂土、
免疫沉淀实验——制备抗体Sepharose－偶联物
实验材料蛋白质试剂、试剂盒NaClNa2CO3乙腈溴化腈甘氨酸仪器、耗材透析管滤纸实验步骤1. 1 ~30 mg/ml 的抗体在 4℃对 0.1 mol/l NaHCO3 / 0.5 mol/l NaCl透析 24 h，期间换液3次。透析液的体积应500倍于抗体溶液。2. 于4℃10 000 g
肝素Sepharose－CL2B－的制备实验
肝素-Sepharose CL-2B 的制备实验 试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B 乙腈
肝素Sepharose－CL2B－的制备实验
试剂、试剂盒SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰（CNBr)(AldrichChemica
肝素Sepharose－CL2B－的制备实验
试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl 尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤 材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰（CNBr)(AldrichChem
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——IMAC－分离/富集磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤磷酸肽分析的常见困难是由磷酸化的低化学计量值导致的，样品中相同序列肽段的磷酸肽的含量要比非磷酸化肽段含量少得多，这种情况下即使 32p标记的 2D-PP 上的点，经全蛋白质水解及 HPLC 组分收集，已经确定磷酸肽存在，用质谱技术也难以鉴定磷酸肽。数据依赖的
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——RPHPLC－分离磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤反相 HPLC 分段收集磷酸肽重现性好，简单，且不需要特殊装备。在 RP-HPLC 中，磷酸肽根据其疏水性被分离。分离后收集的组分经 Cerenkov计数检测。对 Cerenkov计数和时间作图，显示具放射性活性的组分的计数。纯化的磷酸肽用 MS 分析；可用不
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——2DPP－分离磷酸肽
实验方法原理即使纳喷 MS/MS 技术已经成功用于直接分析蛋白酶解产生的磷酸肽但是出于以下一些原因，通常建议在质谱分析前作一些分离：(1) 磷酸肽在蛋白酶切产物中通常只占少数因此容易淹没在低率度离子产生的总背景中，肽分离技术可浓缩分析物，因此会提高信噪比。(2) 如果磷酸肽被放射性标记并具有相同比活
免疫沉淀实验——免疫沉淀放射性标记抗原
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS仪器、耗材离心机实验步骤1. 按基本方案进行，但以下说明的操作步骤已经修改：（2b）按所需选用步骤4b所提供的其中之一备择物（①，②，③）预澄清放射性抗原溶液。（4b）加入1 μl 抗原特异性抗血清，或3 μg 抗原特异性单抗，或抗质特异性杂交瘤培养上 清（克隆化细
几种分子筛凝胶及应用
做纯化的人可能经常接触到sephadex，BIO-Gel，sephacryl s-,sepharose BIo-Gel等几种填料，有时会混淆在一起，看到一个贴子较好的介绍了这些填料的区别，希望对大家有用。sephadex(葡聚糖凝胶）：是由葡聚糖苷和3-氯-1，2环氧丙烷以醚键相互铰链而成，不同
磷酸肽的的生理功能有哪些？
（1）促进成长期儿童骨骼和牙齿的发育； （2）预防和改善骨质疏松症； （3）促进骨折患者的康复； （4）预防和改善缺铁性贫血； （5）抗龋齿。 日本、澳大利亚、德国等将其应用于功能性食品中，如日本添加酪蛋白磷酸肽的补钙、补铁功能性食品，包括液体饮料、强化乳制品、饼干、糕点、糖果等。我国
关于酪蛋白磷酸肽的特性介绍
在人体肠道内 pH呈中性到弱碱性的环境中，CPP能螯合钙、铁、锌离子，保护其不被膳食中的磷酸、草酸、植酸等阴离子沉淀，从而有效促进对钙、铁、锌等的吸收和利用。CPP也正是着眼于提高钙的吸收利用而开发的新型产品，于酪蛋白磷酸肽与传统的钙吸收剂维生素D相比，具有以下特点： 1．CPP除了促进钙吸收
关于酪蛋白磷酸肽的基本介绍
酪蛋白磷酸肽(CPP)是以牛乳酪蛋白为原料，通过生物技术制得的具有生物活性的多肽，可用于各种营养、保健食品中，能有效促进人体对钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收和利用。 酪蛋白磷酸肽是用胰酶或胰蛋白酶水解的酪蛋白，经过精制、纯化制成，其核心结构为：—Se r（P）－Se r（P）－Se r（P）
关于酪蛋白磷酸肽的作用介绍
钙只有以离子形态存在时才易被吸收，而且在中性和弱碱性环境 中又容易与酸根离子形成不溶性盐而流失。CPP对钙的吸收作用主要表现为，在中性和弱碱性环境下能与钙结合，抑制不溶性沉淀的生成， 避免钙的流失，最终因游离钙浓度的提高而被动吸收。目前研究表明， CPP促钙吸收的作用主要表现在以下几个方面：
抗体纯化：SPAsepharose－cl4b亲合层析法
一、原理 葡萄球菌a蛋白（SPA）具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于 SPA-sepHarose cl-4b 柱上的IgG或不同的IgG亚类，可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。 二、试剂器材 1、spa-sephar
抗体纯化：SPAsepharose－cl4b－亲合层析法
一、原理葡萄球菌a蛋白（SPA）具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于SPA-sepHarose cl-4b 柱上的IgG或不同的IgG亚类，可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。二、试剂器材1、spa-sepharose
关于酪蛋白磷酸肽的－应用范围介绍
酪蛋白磷酸肽具有在很宽的pH范围内完全溶解的特性，可耐受高温处理，具有良好的稳定性，因此，可添加于下列各种产品中：·强化钙、铁、锌的营养保健品·奶类制品，如果奶、学生配方奶、高钙低脂奶等·儿童营养食品，如婴儿营养米粉、高钙饼干等·豆制品，如高钙豆奶粉、钙豆腐等·营养麦片、口香糖等·防龋固齿的牙膏
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验材料用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的柱子实验步骤1. 将
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验方法原理 实验材料 用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒 PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材 分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的
关于酪蛋白磷酸肽的作用机理－介绍
1、酪蛋白磷酸肽的的持钙能力 CPP的持钙能力也即一定条件下被CPP保持在溶液中的钙量的大小。在有钙离子和磷酸根存在的溶液体系中，pH呈碱性时，将有磷酸钙沉淀形成。CPP的存在可减少因磷酸钙沉淀而引起的钙损失，使较多的钙保持溶解状态。Ca：P=1：1（8mM：8Mm）和2：1（12Mm：6Mm
关于酪蛋白磷酸肽的基本－应用介绍
科学研究证明，在正常情况下，各种钙源的吸收率相差无几。牛奶之所以是众所周知且人类最喜欢的补钙食品，其原因除了牛奶含钙较丰富外，还因牛奶酶蛋白在体内经肠道蛋白酶作用可生成部分CPP，而CPP可促进钙的吸收和利用，换言之，吸收率不应成为厂家选择钙源的依据，在产品中加入适量的钙吸收促进剂CPP才是明智
Affinity－Chromatography
（一）原理 亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在液相中的相应抗体（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。 此法具有高效、快速、简便等优点
亲和层析(affinity－chromatography)技术
（一）原理亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在液相中的相应抗体（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。此法具有高效、快速、简便等优点。（