用亚氨基二乙酸(铁螯合)Sepharose6B分离磷酸肽实验

在进行蛋白质(phosphorylated protein) 的结构与功能分析时,接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的(未磷酸化的)肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载有铁 (正铁离子)的金属螯合填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏用亚氨基二乙酸(铁螯合)Sepharose6B 分离磷酸肽实验标签: 亚氨基二乙酸 Sepharose 6B 磷酸肽 蛋白质纯化与鉴定实验指南 附录 7在进行蛋白质(phosphorylated protein) 的结构与功能分析时,接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的(未磷酸化的)肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载有铁 (正铁离子)的金属螯合填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。用亚氨基二乙酸(铁螯合)Sepharose6B 分离磷酸肽实验试剂、试剂盒EDTA乙酸铵乙酸钠乙......阅读全文

用亚氨基二乙酸(铁螯合)Sepharose6B-分离磷酸肽实验

用亚氨基二乙酸(铁螯合)Sepharose6B 分离磷酸肽实验             试剂、试剂盒 EDTA 乙酸铵

用亚氨基二乙酸(铁螯合)Sepharose6B-分离磷酸肽实验

在进行蛋白质(phosphorylated protein) 的结构与功能分析时,接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的(未磷酸化的)肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载有铁 (正铁离子)的金属螯合填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。暂未评分点评实验,有机会获丁当

乙二胺四乙酸(EDTA)及其螯合物

  一. EDTA的离解平衡   在水溶液中,2个羧基 H+转移到氨基N上,形成双极离子:   EDTA 常用 H4Y 表示,由于其在水及酸中的溶解度很小,常用的为其二钠盐:Na2H2Y·2H2O ,也简写为EDTA 。    当溶液的酸度很高时,两个羧基可再接受H+ ,形成H

金属螯合亲和层析实验(二)

实验材料蛋白质试剂、试剂盒GuMCAC-EDTA缓冲液盐酸胍仪器、耗材转子离心机实验步骤1.  制备表达带组氨酸尾的融合蛋白的大肠杆菌菌体沉淀。2.  准备NTA介质层析柱,但柱子最后以GuMCAC-0缓冲液洗涤.3.  在冰浴中冻融菌体沉淀。加5 ml GuMCAC-0缓冲液,用吸管抽吸重悬,超声

铁螯合酶的基本信息

中文名称铁螯合酶英文名称ferrochelatase定  义编号:EC 4.99.1.1。催化Fe2+与有机分子发生螯合(组装)作用的酶。如催化Fe2+与原卟啉发生螯合作用形成铁卟啉(血红素)。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

铁螯合酶的基本信息

中文名称铁螯合酶英文名称ferrochelatase定  义编号:EC 4.99.1.1。催化Fe2+与有机分子发生螯合(组装)作用的酶。如催化Fe2+与原卟啉发生螯合作用形成铁卟啉(血红素)。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

微量元素氨基酸螯合物的螯合物的基本结构

螯合物是指1个或多个配位基团与金属离子之间的配位反应所形成的环状结构产物,金属氨基酸螯合物是可溶性金属盐的金属离子与氨基酸以一定数量的摩尔比(通常为1∶1~3)共价化合的产物。氨基酸的氨基和羧基与金属微量元素离子螯合,是以氧和氮作配位原子,配位体2个配位原子之间相隔2个或3个以上原子与中心金属离子共

简述螯合物的螯合反应

  又称螯合作用或螯合效应。螯合配位体 (含两个或两个以上具有孤对电子原子的配位体) 与中心离子同时形成两个或更多的配位键而生成环状结构的配位化合物,即螯合 [物] 的反应。例如,乙二胺四乙酸[EDTA,(—OOCCH2)2NCH2CH2N (CH2COO—)2]能与许多金属离子如Fe、Th、Hg、

螯合物的螯合程度的检测

如果配体和银离子结合后,紫外可见区有变化,可以用紫外光谱测定反应进行的程度;如果没有光信号变化,也可以使用电化学手段,用银-氯化银电极测定体系游离银离子浓度;如果是固体的话,只能用溶剂洗涤固体,将游离银离子洗脱,然后用原子吸收或其他手段检测银离子含量。

关于螯合物螯合程度的检测

  如果配体和银离子结合后,紫外可见区有变化,可以用紫外光谱测定反应进行的程度;如果没有光信号变化,也可以使用电化学手段,用银-氯化银电极测定体系游离银离子浓度;如果是固体的话,只能用溶剂洗涤固体,将游离银离子洗脱,然后用原子吸收或其他手段检测银离子含量。

金属螯合层析(metal-chelate-chromatography)分离纯化超氧化物歧

[原理] 金属螯合层析是利用固定相偶联的配基——亚氨基二乙酸(IDA)及金属离子发生螯合作用,该金属离子又与蛋白分子中的某些含有巯基或咪唑基的氨基酸结合。 金属螯合层析主要分为3个阶段:第一阶段是螯合介质与二价金属离子作用生成金属螯合介质;第二阶段是在一定的条件下金属螯合介质与被

金属螯合亲和层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材 层析柱转子实验步骤 1.  接种含以pET载体表达带组氨酸尾融合蛋白的大肠扦菌BL21(DE3)pLyaS菌株于10 ml M9ZB/氨苄青霉素/氯霉素培养基。于37℃摇荡培养过夜。2.  转接1

金属螯合亲和层析实验

天然MCAC纯化带组氨酸尾的可溶性融合蛋白 变性条件下用MCAC纯化带组氨酸尾的不溶性融合蛋白             实验材料 蛋白质

什么叫螯合物,螯合物有什么特点

螯合物是具有环状结构的配合物,是通过两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的螯合作用而得到。螯合物最显著的一种特性是其热力学稳定性和热稳定性。螯合环的稳定性与芳香环相似。螯合物可为不带电荷的中性分子,也可为带电的络离子,前者易溶于有机溶液中,后者可溶于水中,此性质可用于分离和分析金属离子。金属离子

高铁螯合物还原酶的基本信息

中文名称高铁螯合物还原酶英文名称ferric-chelate reductase定  义编号:EC 1.16.1.7。催化高价铁螯合物(如高铁细胞色素)中的Fe3+还原为Fe2+的酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

高铁螯合物还原酶的基本信息

中文名称高铁螯合物还原酶英文名称ferric-chelate reductase定  义编号:EC 1.16.1.7。催化高价铁螯合物(如高铁细胞色素)中的Fe3+还原为Fe2+的酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

多聚螯合物酶组化实验

EPOS 法 EnVision 法 UIP 法 PowerVision 法             实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)

多聚螯合物酶组化实验

实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和 HRP 结合在一起,形成 HRP-多聚化合物-特异性抗体巨大复合物,该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时,只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体 EPOS 试剂,孵育 30~60 min 即可完成。勿需再加

螯合物萃取体系

a. 螯合剂:螯合剂(应有较多的疏水基团)溶于有机相,难溶于水相,有些也(微)溶于水相,但在水相中的溶解度依赖于水相的组成特别是 pH 值(双硫腙溶于碱性水溶液);b. 螯合剂在水相与待萃取的金属离子形成不带电荷的中性螯合物,使金属离子由亲水性转变为亲油性; c. 螯合物萃取体系广泛应用于金属阳离子

螯合物的组成

螯合物是具有环状结构的配合物,是通过两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的螯合作用而得到。

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料测序级膜蛋白酶                                                          试剂、试剂盒二硫苏糖醇                                                                  碘代乙酰

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质(见 24. 3.1 );固相金属螯合亲和层析(IMAC) 富集磷酸肽(见 24. 3. 2 );用串联质谱对磷酸

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质(见 24. 3.1 );固相金属螯合亲和层析(IMAC) 富集磷酸肽(见 24. 3. 2 );用串

磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——IMAC-分离/富集磷酸肽

实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤磷酸肽分析的常见困难是由磷酸化的低化学计量值导致的,样品中相同序列肽段的磷酸肽的含量要比非磷酸化肽段含量少得多,这种情况下即使 32p标记的 2D-PP 上的点,经全蛋白质水解及 HPLC 组分收集,已经确定磷酸肽存在,用质谱技术也难以鉴定磷酸肽。数据依赖的

螯合物的相关应用

在水污染化学、分析化学、有机和生化等方面的应用十分广泛,如水中金属离子的分离分析、水的软化、分级沉淀、纤维染色、清洗金属、浮选、杀菌、蛋白质的水解与合成以及稳定维生素等。工业工程螯合物在工业中用来除去金属杂质,如水的软化、去除有毒的重金属离子等。比如重金属生产和使用的工厂使用重金属捕捉剂来沉淀重金属

螯合程度的检测分析

如果配体和银离子结合后,紫外可见区有变化,可以用紫外光谱测定反应进行的程度;如果没有光信号变化,也可以使用电化学手段,用银-氯化银电极测定体系游离银离子浓度;如果是固体的话,只能用溶剂洗涤固体,将游离银离子洗脱,然后用原子吸收或其他手段检测银离子含量。

螯合物的应用介绍

在水污染化学、分析化学、有机和生化等方面的应用十分广泛,如水中金属离子的分离分析、水的软化、分级沉淀、纤维染色、清洗金属、浮选、杀菌、蛋白质的水解与合成以及稳定维生素等。工业工程螯合物在工业中用来除去金属杂质,如水的软化、去除有毒的重金属离子等。比如重金属生产和使用的工厂使用重金属捕捉剂来沉淀重金属

磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——RPHPLC-分离磷酸肽

实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤反相 HPLC 分段收集磷酸肽重现性好,简单,且不需要特殊装备。在 RP-HPLC 中,磷酸肽根据其疏水性被分离。分离后收集的组分经 Cerenkov计数检测。对 Cerenkov计数和时间作图,显示具放射性活性的组分的计数。纯化的磷酸肽用 MS 分析;可用不

多聚螯合物酶组化实验——EPOS-法

长期以来,许多的研究者希望 IHC 方法更敏感、更稳定、更简单,要求多步检测系统简化,但敏感性要进一步提高,使这一技术面临巨大的挑战。在实践中,往往是步骤减少了,敏感性也降低,这是一对矛盾。一种新的多聚螯合物酶二步法在 1995 年被隆重推出,该方法与简单的二步法相比较,具有很高的敏感性、稳定性和特

多聚螯合物酶组化实验——UIP-法

实验方法原理UIP(universal immuno-enzyme polymer)法,即通用免疫酶复合物法,是 Nichirei 发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与 EnVision 法相似,不同的是 UIP 复合物为 HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物(N-Histo