磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——RPHPLC分离磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤反相 HPLC 分段收集磷酸肽重现性好，简单，且不需要特殊装备。在 RP-HPLC 中，磷酸肽根据其疏水性被分离。分离后收集的组分经 Cerenkov计数检测。对 Cerenkov计数和时间作图，显示具放射性活性的组分的计数。纯化的磷酸肽用 MS 分析；可用不同的 MS 和 MS/MS 方法。相对于 2D-PP, RP-HPLC 的缺点是高亲水性的磷酸肽不会在柱上停留，而是直接流过柱子。相反，高疏水性的肽直到最高梯度才会被洗脱，甚至不会被洗脱。因此，有可能样品中有些磷酸肽不会被检测到。总体上说， RP-HPLC 的分辨力不如 2D-PP 作图法的分辨力好。需要注意的另一点是磷酸肽会附着在金属表面。因此，如果用标准的金属注射器，会发生明显的样品丢失。使用 RP-HPLC 分析磷酸肽的一个很大的吸引力是 RP-HPLC 系统可以与ESI 质谱方便地在线连接。使用在线连接到 HPLC 系统的质谱......阅读全文
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——RPHPLC－分离磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤反相 HPLC 分段收集磷酸肽重现性好，简单，且不需要特殊装备。在 RP-HPLC 中，磷酸肽根据其疏水性被分离。分离后收集的组分经 Cerenkov计数检测。对 Cerenkov计数和时间作图，显示具放射性活性的组分的计数。纯化的磷酸肽用 MS 分析；可用不
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——IMAC－分离/富集磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤磷酸肽分析的常见困难是由磷酸化的低化学计量值导致的，样品中相同序列肽段的磷酸肽的含量要比非磷酸化肽段含量少得多，这种情况下即使 32p标记的 2D-PP 上的点，经全蛋白质水解及 HPLC 组分收集，已经确定磷酸肽存在，用质谱技术也难以鉴定磷酸肽。数据依赖的
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——2DPP－分离磷酸肽
实验方法原理即使纳喷 MS/MS 技术已经成功用于直接分析蛋白酶解产生的磷酸肽但是出于以下一些原因，通常建议在质谱分析前作一些分离：(1) 磷酸肽在蛋白酶切产物中通常只占少数因此容易淹没在低率度离子产生的总背景中，肽分离技术可浓缩分析物，因此会提高信噪比。(2) 如果磷酸肽被放射性标记并具有相同比活
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离
2D-PP 分离磷酸肽 RP-HPLC 分离磷酸肽 高分辨凝胶电泳分离磷酸肽 IMAC 分离／富集磷酸肽 实验方法原理
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离
实验方法原理磷酸化分析的原理研究的最常见的磷酸化类型是丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知发生的磷酸化还有精氨酸、组氨酸和赖氨酸的亚酰胺化，以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。这些修饰中的其中一些是化学不稳定的，通常观察不到，除非采取特殊的保护措施防止他们在蛋内质分离过程中消失。举例来说，组氨酸磷酸化是一
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离
实验方法原理 即使纳喷 MS/MS 技术已经成功用于直接分析蛋白酶解产生的磷酸肽但是出于以下一些原因，通常建议在质谱分析前作一些分离：(1) 磷酸肽在蛋白酶切产物中通常只占少数因此容易淹没在低率度离子产生的总背景中，肽分离技术可浓缩分析物，因此会提高信噪比。(2) 如果磷酸肽被放射性标记并具有相同比
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离
实验方法原理 磷酸化分析的原理研究的最常见的磷酸化类型是丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的磷酸酯化。已知发生的磷酸化还有精氨酸、组氨酸和赖氨酸的亚酰胺化，以及天冬氨酸和谷氨酸的酰化。这些修饰中的其中一些是化学不稳定的，通常观察不到，除非采取特殊的保护措
RPHPLC测定土壤中的PAHs
美国EPA推荐应用GC/MS法测定土壤中的多环芳烃，但由于其检测时间长，检测成本高，应用并不十分广泛。本文结合国家标准，简化并优化了一套适用于土壤中多环芳烃的检测方法，采用反相高效液相色谱法，缩短了检测时间，并有针对性地对16种PAHs进行特别考察，结果表明适用于现阶段研发及生产的需求。
RPHPLC测定土壤中的PAHs
美国EPA推荐应用GC/MS法测定土壤中的多环芳烃，但由于其检测时间长，检测成本高，应用并不十分广泛。本文结合国家标准，简化并优化了一套适用于土壤中多环芳烃的检测方法，采用反相高效液相色谱法，缩短了检测时间，并有针对性地对16种PAHs进行特别考察，结果表明适用于现阶段研发及生产的需求。
磷酸化位点分析实验——高分辨凝胶电泳分离磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤在聚丙烯酰胺凝胶上用 2-DE 纯化磷酸肽是最近发表的制备技术，其结果与 2D-PP 结果相似。非变性凝胶等电聚焦结合碱性 40%PAGE 胶用于磷酸肽分离及比较分析。 32p 标记样品用放射自显影或磷储屏检测。用 Edman 测序方法鉴定蛋白质并确定磷酸化位
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B－分离磷酸肽实验
在进行蛋白质（phosphorylated protein) 的结构与功能分析时，接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的（未磷酸化的）肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载有铁 (正铁离子）的金属螯合填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。暂未评分点评实验，有机会获丁当
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B－分离磷酸肽实验
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B 分离磷酸肽实验 试剂、试剂盒 EDTA 乙酸铵
关于酪蛋白磷酸肽的作用介绍
钙只有以离子形态存在时才易被吸收，而且在中性和弱碱性环境 中又容易与酸根离子形成不溶性盐而流失。CPP对钙的吸收作用主要表现为，在中性和弱碱性环境下能与钙结合，抑制不溶性沉淀的生成， 避免钙的流失，最终因游离钙浓度的提高而被动吸收。目前研究表明， CPP促钙吸收的作用主要表现在以下几个方面：
关于酪蛋白磷酸肽的基本介绍
酪蛋白磷酸肽(CPP)是以牛乳酪蛋白为原料，通过生物技术制得的具有生物活性的多肽，可用于各种营养、保健食品中，能有效促进人体对钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收和利用。 酪蛋白磷酸肽是用胰酶或胰蛋白酶水解的酪蛋白，经过精制、纯化制成，其核心结构为：—Se r（P）－Se r（P）－Se r（P）
磷酸肽的的生理功能有哪些？
（1）促进成长期儿童骨骼和牙齿的发育； （2）预防和改善骨质疏松症； （3）促进骨折患者的康复； （4）预防和改善缺铁性贫血； （5）抗龋齿。 日本、澳大利亚、德国等将其应用于功能性食品中，如日本添加酪蛋白磷酸肽的补钙、补铁功能性食品，包括液体饮料、强化乳制品、饼干、糕点、糖果等。我国
关于酪蛋白磷酸肽的特性介绍
在人体肠道内 pH呈中性到弱碱性的环境中，CPP能螯合钙、铁、锌离子，保护其不被膳食中的磷酸、草酸、植酸等阴离子沉淀，从而有效促进对钙、铁、锌等的吸收和利用。CPP也正是着眼于提高钙的吸收利用而开发的新型产品，于酪蛋白磷酸肽与传统的钙吸收剂维生素D相比，具有以下特点： 1．CPP除了促进钙吸收
磷酸化位点分析实验磷酸肽的质谱分析
实验方法原理用于确定磷酸肽中磷酸化位点的压谱方法有两种不同的基本原理。第一种方法依赖于在质谱仪条件下，如在 ESI 质谱仪的碰撞室或离子源中，或MALDI-MS 的 PSD 过程中，磷酸酯键的化学稳定性。因此，磷酸肽可通过磷酸酯键断裂产生的诊断离子鉴定。第二种方式依靠检测磷酸酯基团使肽段增加的质量数
磷酸化位点分析实验磷酸化位点的确定
磷酸肽的化学测序 磷酸肽的质谱分析 源后衰变 用酶和化学方法去磷酸化 实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验材料用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的柱子实验步骤1. 将
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验方法原理 实验材料 用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒 PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材 分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的
关于酪蛋白磷酸肽的基本－应用介绍
科学研究证明，在正常情况下，各种钙源的吸收率相差无几。牛奶之所以是众所周知且人类最喜欢的补钙食品，其原因除了牛奶含钙较丰富外，还因牛奶酶蛋白在体内经肠道蛋白酶作用可生成部分CPP，而CPP可促进钙的吸收和利用，换言之，吸收率不应成为厂家选择钙源的依据，在产品中加入适量的钙吸收促进剂CPP才是明智
关于酪蛋白磷酸肽的作用机理－介绍
1、酪蛋白磷酸肽的的持钙能力 CPP的持钙能力也即一定条件下被CPP保持在溶液中的钙量的大小。在有钙离子和磷酸根存在的溶液体系中，pH呈碱性时，将有磷酸钙沉淀形成。CPP的存在可减少因磷酸钙沉淀而引起的钙损失，使较多的钙保持溶解状态。Ca：P=1：1（8mM：8Mm）和2：1（12Mm：6Mm
关于酪蛋白磷酸肽的－应用范围介绍
酪蛋白磷酸肽具有在很宽的pH范围内完全溶解的特性，可耐受高温处理，具有良好的稳定性，因此，可添加于下列各种产品中：·强化钙、铁、锌的营养保健品·奶类制品，如果奶、学生配方奶、高钙低脂奶等·儿童营养食品，如婴儿营养米粉、高钙饼干等·豆制品，如高钙豆奶粉、钙豆腐等·营养麦片、口香糖等·防龋固齿的牙膏
hplc分离一个简单的多肽该选用什么样的流动相、梯度和...
hplc分离一个简单的多肽该选用什么样的流动相、梯度和柱子？RP-HPLC,C18柱可以制备很少量的肽。如果用RP-HPLC，首先应该用同类型的分析柱子分析一下多肽含多少杂质，设置缓缓的梯度的分离样品，在根据分析柱子跑出的峰形，逐渐放大纯化的方法。
磷酸化位点分析实验_磷酸肽的化学测序
实验方法原理磷酸化位点的确定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白质被纯化，如果可能蛋白质要均一；磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物，其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列，定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法， 2D-PP 作图、 HPLC 或 lMAC
磷酸化位点分析实验_磷酸肽的化学测序
实验方法原理磷酸化位点的确定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白质被纯化，如果可能蛋白质要均一；磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物，其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列，定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法， 2D-PP 作图、 HPLC 或 lMAC
磷酸化位点分析实验磷酸化位点的确定
实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白质被纯化，如果可能蛋白质要均一；磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物，其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列，定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法， 2D-PP 作图、 HPLC 或 l
关于酪蛋白磷酸肽的结构和生产工艺介绍
一、酪蛋白磷酸肽的结构： 酪蛋白磷酸肽（CaseinPhosphopeptides，简称CPP）是以牛乳酪蛋白为原料，通过生物技术制得的具生物活性的多肽。CPP分子由二十到三十几个氨基酸残基组成，其中包括4～7个成簇存在的磷酸丝酰基。大量试验证明，CPP能有效地促进人体对钙、铁、锌等二价矿物营
抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验
实验方法原理 实验材料 融合后的候选杂交瘤细胞系BSA 交联的同种磷酸肽BSA 交联的同种非磷酸肽BSA 交联的非同种磷酸酪氨酸肽BSA 交联的同源磷酸肽试剂、试剂盒 筛选稀释液阴性对照（用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫前血清）阳性对照（用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫后血清）仪器、耗材 HT 培养基96
抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 融合后的候选杂交瘤细胞系 BSA 交联