TNFα生物学活性检测方法

光密度法 实验材料 小鼠L929细胞 试剂、试剂盒 TNF标准品 无水乙醇 乙酸 蒸馏水 结晶紫 完全培养基 放线菌素-D FCS-DMEM培养液 仪器、耗材 超净工作台 96孔细胞培养板 酶标仪 显微镜 移液枪 试管 闭塞名 ......阅读全文

TNFα生物学活性检测方法

光密度法 实验材料 小鼠L929细胞 试剂、试剂盒 TNF标准品

TNFα生物学活性检测方法

基本原理TNF的生物学活性之一是能直接杀伤肿瘤细胞。TNF与相应受体结合后向细胞内移,被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低,各种酶外泄,引起细胞溶解。肿瘤细胞株对TNF-α的敏感性有很大的差异,用放线菌素D、丝裂酶素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞,可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。材料和试剂1,完

TNFα生物学活性检测方法——光密度法

TNF的生物学活性之一是能直接杀伤肿瘤细胞。TNF与相应受体结合后向细胞内移,被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低,各种酶外泄,引起细胞溶解。肿瘤细胞株对TNF-α的敏感性有很大的差异,用放线菌素D、丝裂酶素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞,可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。实验材料小鼠L929细胞

细胞因子生物学活性检测

实验方法原理 白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原

干扰素生物学活性检测

实验方法原理干扰素能刺激某些指示细胞(如人羊膜上皮细胞Wish株、人喉癌细胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺单层细胞)产生抗病毒蛋白,从而使细胞免受水疱性口炎病毒(VSV)的攻击,根据待测样品不同稀释度的保护能力,计算出干扰素生物学活性单位。实验材料VSVWISHHeP-2细胞株试剂、试剂盒MTT二甲亚

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理    活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、   青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于10

IL10生物学活性检测

实验材料 小鼠IL-4试剂、试剂盒 FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥

检测细胞生物学活性有哪些方法

根据每细胞定重量设计用于单细胞、细胞及丝状体微物测定定体积品通离或滤菌体离经洗涤再离直接称重求湿重丝状体微物滤用滤纸吸菌丝间自由水再称重求湿重论细菌品丝状菌品放已知重量平皿或烧杯内于一05℃烘干至恒重取放入干燥器内冷却再称量求微物干重 要测定固体培养基放线菌或丝状真菌先加热至50℃使琼脂熔化滤菌丝体

IL4生物学活性检测

实验材料 IL-4诱生试剂、试剂盒 生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材 细胞培养板培养箱实验步骤 一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待

IL1生物学活性检测

实验方法原理 IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠胸腺细胞增殖。进一步通过3H-TdR掺入法或染料摄入法判定小鼠胸腺细胞增殖量,推定IL-1的生物学活性。通过检测IL-1的生物学活性,可了解单核-巨噬细胞等的功能。实验材料 小鼠胸腺细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液L

肿瘤坏死因子α生物学活性检测

实验方法原理TNF-α受体广泛地分布于多种肿瘤细胞和血细胞,根据TNF-α与相应靶细胞结合后引起不同的生物学效应,建立了多种检测TNF-α生物学活性方法。某些肿瘤细胞膜表面的TNF-α受体与TNF-α结合后,可导致这些肿瘤细胞的死亡,可通过检测对肿瘤细胞的杀伤能力,来反映TNF-α的生物学活性。若这

IL8生物学活性检测

(一)原理IL-8对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理盐水溶液。 (2)淋巴细胞分层液比重为1.077+(-)0.001。 (3)2%琼脂糖:称取2g琼脂糖,加入到10

IL10生物学活性检测实验

实验材料小鼠IL-4试剂、试剂盒FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材离心机培养箱实验步骤D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥展开 注

IL6生物学活性检测实验

实验材料IL-6的诱生试剂、试剂盒FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用MH60

IL6生物学活性检测实验

实验材料 IL-6的诱生试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用M

IL8生物学活性检测实验

IL-8中对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。实验材料IL-8的诱生试剂、试剂盒右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材洁净载玻片打孔器离心机培养箱实验步骤一、IL-

IL8生物学活性检测实验

实验材料 IL-8的诱生试剂、试剂盒 右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材 洁净载玻片 打孔器离心机培养箱实验步骤 一、IL-8的诱生1.  常规分离PBMC,洗涤后,调细胞浓度为5×106/ml。2.  将细胞接种于24孔细胞培养板,每孔0

IL4生物学活性检测实验

实验材料IL-4诱生试剂、试剂盒生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材细胞培养板培养箱实验步骤一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的

IL2生物学活性检测实验

实验方法原理实验材料 人外周血T细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 一、人外周血T细胞分泌IL-2的诱生1.  人PBMC分离:采用常规淋巴细胞分层液浓度梯度离心法分离PBMC,用10%FCS-RPM

IL2生物学活性检测实验

白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物学活性,可

抗体的生物学活性

抗体的生物学功能:可以中和毒素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原的过程中起决定性作用;激活补体产生攻膜复合物使细胞溶解破坏。人的抗体IgG1~3和IgM与相应抗原结合后,可因构象改变而使其CH2和CH3结构域内的补体结合点暴露,

生物学活性测定方法

用于细胞因子生物学活性测定,对细胞因子前体或其降解产物与可溶性受体结合的细胞因子、细胞因子聚合物等,均不能用此法检测。细胞因子受体拮抗物、细胞因子的天然抗体和类细胞因子等,也将干扰细胞因子活性的测定。细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点:①操作繁琐;②易受干扰;③敏感性较高;④特异性不高。

补体的生物学活性

  补体系统是人和某些动物种属,在长期的种系进化过程中获得的非特异性免疫因素之一,它也在特异性免疫中发挥效应,它的作用是多方面的。补体系统的生物学活性,大多是由补体系统激活时产生的各种活性物质(主要是裂解产物)发挥的。补体成分及其裂解产物的生物活性列于表3-6。补体成分或裂解产物生物活性作用机制C5

细胞因子生物学活性检测实验-古朵实验√

白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL

细胞因子生物学活性检测和浓度测定方法

细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子

简述抗体的生物学活性

抗体的生物学功能:可以中和毒素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原的过程中起决定性作用;激活补体产生攻膜复合物使细胞溶解破坏。人的抗体IgG1~3和IgM与相应抗原结合后,可因构象改变而使其CH2和CH3结构域内的补体结合点暴露,

白细胞介素6生物学活性检测

实验方法原理IL-6在体外能促进B细胞杂交瘤的生长,故又称为杂交瘤生长因子(HGF)。小鼠B细胞杂交瘤7TD1是一株对IL-6依赖的细胞系,由Van Snick 1986年建立,只有在IL-6存在的培养基中才能生长,可以作为指示细胞来测定待检样品中IL-6水平。这类IL-6依赖的小鼠B细胞杂交瘤细胞

白细胞介素2生物学活性检测

实验方法原理IL-2主要由活化T细胞产生,又为T细胞增殖所必需,故称T细胞生长因子( TCell Growth factor, TCGF )。IL-2产生的水平反映T细胞的功能,仅是免疫调节重要的研究对象,而且与临床多种疾病密切相关,CTLL是C57BL/6来源的。鼠杀伤性T淋巴细胞细胞系,由Gil