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IL10生物学活性检测

实验材料 小鼠IL-4试剂、试剂盒 FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥收起 注意事项 ①取生长旺盛的D36细胞用IMDM培养液洗涤2次,悬于20%FCS-IMDM培养液,并调制浓度为2×104/ml。②~⑥参考IL-4测定。......阅读全文

白细胞介素-1生物学活性检测

实验方法原理白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞

唾液中白细胞介素与口腔癌的关系

  人类唾液中富含多种成分,如免疫球蛋白、激素、游离氨基酸、无机离子等,这些成分很好地反映了机体生物学功能及状态。除此之外,经口服或注射的药物亦可发现于其中。然而,这些成分并非是一成不变的,机体在受到疾病的侵扰下,体内免疫水平发生改变,分泌到唾液中的物质种类和含量发生相应改变,唾液用于疾病的诊断越来

细胞因子的检测

随着免疫学理论研究的深入,发现的细胞因子日益增多,并在免疫应答的调节和效应中起着重要作用,其在体内水平的高低直接反映机体的免疫状况。细胞因子检测的方法主要分三类:①细胞生物学活性检测法。②免疫学标记技术,常用ELISA。③分子生物学方法,常用逆转录PCR检测细胞因子的mRNA转录的情况。现以生物活性

IL-1的体外诱生实验

实验概要IL-1主要由活化的单核/巨噬细胞产生,具有广泛的生物学活性。IL-1包括IL-1α和IL-1β,两者分子量相近,且均能与IL-1R结合,故具有相似的生物学活性,常用的IL-1生物活性检测法对两者均适用。常用的IL-1生物活性检测法包括:小鼠胸腺细胞增殖法、L929细胞增殖法、D10G4.1

IL-1生物学活性检测实验——小鼠胸腺细胞增殖法

白细胞介素-1(IL-1)主要是由活化的单核-巨噬细胞合成和分泌的一种细胞因子,具有活化淋巴细胞、协同刺激胸腺细胞增殖、参与抗体产生和促炎症反应等多种生物学功能。IL-1有IL-1α和IL-1β构成,结合同种受体,表现相同的生物学活性。实验方法原理IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠

IL-2生物学活性检测(MTT)原理材料和方法

(一)原理白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物

IL-2生物学活性检测实验

白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物学活性,可

IL-2的体外诱生

实验概要IL-2主要由活化的CD4 T细胞产生,主要是促进T淋巴细胞的增殖与分化。IL-2是机体免疫网络中最重要的细胞因子,因此IL-2的检测已成为评价机体免疫功能状态的重要指标之一。但由于IL-2是通过自分泌或旁分泌方式发挥其生物学效应的,在生理性免疫应答过程中,IL-2不出现于血液等体液中,故体

生物发光技术在生命科学中的应用

  随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。   1 生物发光的特点   根据产生光子的

生物发光技术在生命科学中的应用

  随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。   1 生物发光的特点   根据产生光子的

Science:合成生物学用于慢性炎症的精准医疗

  根据特定疾病的分子标记选择相应的治疗方法和使用剂量是精准医学的本质,在未来的岁月里这是一个重大的研究计划。通过Schukur等人本月18日发表在Science上的研究表明在这一领域中,特别是在治疗慢性炎症性疾病方面,提供了一个重大的概念性进展。研究表明,合成生物学可用于生成和选择性结合细胞因子信

生物发光技术在生命科学中的应用(二)

为了进一步提高检测基因的效率,我们对萤光素酶基因序列的密码子进行了优化,使得它在多种哺乳细胞中的表达水平提高了5~10倍;同时,为了减少对基因的非特异性调控,我们也对萤光素酶的载体进行了优化,去除了载体上哺乳动物转录因子结合序列的保守序列,从而大大降低了实验的本底,显着提高了实验的相对信号强度。优化

2017年5月Science期刊不得不看的亮点研究

  5月份即将结束了,5月份Science期刊又有哪些亮点研究值得学习呢?小编对此进行了整理,与各位分享。  1.Science:重磅!开发出延缓癌细胞生长的新方法  doi:10.1126/science.aai9372  癌症是一种非常复杂的疾病,但是它的定义是相当简单的:细胞发生异常和不受控制

炎症反应相关研究进展一览

  1. Sci Sig:炎症机制研究新突破  炎症反应是机体应对损伤或者感染时发生的免疫反应,然而这一过程如果失控之后将导致疾病的发生。最近,来自莫纳什生物医学研发研究所的研究者们发现了炎症反应过程中的关键生物学事件。该发现或许能够促进新的治疗炎症疾病的疗法的开发,例如动脉粥样硬化、中风以及II型

IL-8生物学活性检测

(一)原理IL-8对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理盐水溶液。 (2)淋巴细胞分层液比重为1.077+(-)0.001。 (3)2%琼脂糖:称取2g琼脂糖,加入到10

IL-8生物学活性检测实验

IL-8中对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。实验材料IL-8的诱生试剂、试剂盒右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材洁净载玻片打孔器离心机培养箱实验步骤一、IL-

重组人蛋白细胞因子的研究选择—细胞因子

1.重组蛋白表达体系MCE 重组蛋白表达体系主要有:大肠杆菌,酵母细胞,昆虫细胞和哺乳动物细胞。2.重组蛋白纯度和浓度测定重组蛋白纯度测定方法:a. SDS-PAGE 测定法;b. HPLC 测定法;c. 银染测定法。重组蛋白浓度测定方法:a. Bradford 蛋白定量测定法;b. BCA 蛋白定

免疫系统对神经内分泌系统的调控(二)

  二、细胞因子对神经内分泌系统的影响  细胞因子作为免疫递质可影响神经内分泌的各项机能,其作用的生物学基础有以下几方面:(1)循环血中可检测到IL-1、IL-6、TNF、IL-2等细胞因子,且在一定条件下浓度有较大波动;(2)神经细胞及神经内分泌细胞可稳定或受诱导而合成IL-1、IIL-

IL-6的临床应用价值

白细胞介素,简称白介素,是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子,它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息,激活与调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。     IL-6属

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。

NALP3炎性体与非感染性炎症疾病及其通路研究工具

  一、NALP3炎性体的结构和分布   NALP3炎性体是一类分子量约为700kDa的大分子蛋白复合体,由核苷酸结合寡聚化结构域样受体(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors,NLRs)家族成员NALP3、衔接蛋白ASC

白细胞介素种类及功能介绍

白细胞介素(interleukins, ILs),简称白介素,最初是指由白细胞产生并在白细胞之间起调节作用的细胞因子,均为小分子多肽或糖蛋白类物质。1979年,第二届国际淋巴因子专题会议将免疫应答过程中白细胞间相互作用的细胞因子统一命名为白细胞介素,并规定其命名规则。目前至少发现了38个白细胞介

IL-4生物学活性检测实验

实验材料IL-4诱生试剂、试剂盒生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材细胞培养板培养箱实验步骤一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算

细胞因子的生物学活性

  细胞因子具有非常广泛的生物学活性,包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和细胞杀伤效应,促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达,促进炎症过程,影响细胞代谢等。  一、免疫细胞的调节剂  免疫细胞之间存在错综复杂的调节关系,细胞因子是传递这种调节信号必不可少的信息分子。例如在T-B细胞

CAR-T治疗肿瘤的毒副反应及临床对策

  1  CAR-T细胞疗法的生物学毒性  CAR-T细胞疗法毒性反应的主要潜在机制包括:CAR-T细胞攻击共表达肿瘤抗原的正常组织或器官,例如抗CD19的CAR-T细胞攻击损伤正常B细胞,甚至可导致B细胞耗竭。[10-11]在某些不可预知的情况下,即使未表达CAR-T细胞的靶抗原,若正常组织所带细

肺癌治疗新思维:靶向肿瘤衍生外泌体免疫治疗

  肺癌是全球最常见癌症之一,也是癌症相关死亡的主要原因。肺癌的两种组织学亚型为NSCLC和SCLC,其中NSCLC包含80%以上的肺癌,如腺癌,鳞状细胞癌和大细胞癌。外泌体是起源于大多数细胞的小囊泡,广泛分布于生物体液,如唾液,血浆,尿液和母乳中。外泌体能够通过转移其内含物,如RNA(mRNA和非

降钙素原在不同临床科室中的应用

感染一直是临床各科医师所面临的重大课题,尽管监测手段多,但仍缺乏敏感而特异的动态监测指标。虽然血细胞分析可反应患者细菌感染的情况,但在创伤、应激时也会升高; 血菌培养只在大量细菌入血时才能获阳性结果; 急性期反应蛋白( C-reactive protein,CRP) 在严重细菌感染时表现为血浆浓度明

免疫学检验——免疫细胞的分离及其表面标志检测技术

  第一节  免疫细胞的分离  一、外周血单个核细胞的分离  将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合,其比重为1.077±0.002,可作为常规的淋巴细胞分离液,即Ficoll分离液。  主要用于分离外周血中单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法,其分布由上到下依次为:稀释

当前临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要