胶体金免疫层析法检测蛋白A抗体实验方法与步骤

摘 要: 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。 方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组 的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。 血清中IgG与测试条上金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。 结果 用GICA与ELISA试剂盒对比检测了326份血清标本中抗CagA抗体,本方法的特异性为95.8%,敏感性为97.3%,两法符合率为96.6%。 结论 GICA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。关键词:螺杆菌,幽门;细胞毒素相关蛋白A/ 分析;胶体金;免疫 层析;抗体/ 分析中国图书馆分类号 R 573一、引言幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp) 与......阅读全文

胶体金免疫层析法检测蛋白A抗体实验方法与步骤

摘 要: 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。 方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组 的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。 血清中IgG与测试条上

胶体金免疫层析法对抗幽门螺杆菌相关蛋白A抗体的检测

实验概要本实验建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。  血清中IgG与测试条上金标记

常用的免疫胶体金检测技术胶体金免疫层析法

胶体金免疫层析法将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在

胶体金免疫层析法对抗幽门螺杆菌相关蛋白...

实验概要本实验建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。  血清中IgG与测试条上金标记

层析法免疫胶体金检测试剂的测试原理

层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定

胶体金免疫层析法检测尿hCG的质量控制方法探讨

  检测人绒毛膜促性腺激素(phCG)成为正常早期妊娠、异位妊娠、葡萄胎和绒癌等疾病诊断与鉴别诊断的重要方法。由于胶体金免疫层析法(GICA)的广泛应用,使尿hCG的定性检测变得简单、快速。但目前GICA亟待解决室内质量控制问题。我们以胶体金早早孕检测试纸条为例,通过几个指标,对试纸条进行质量评价,

免疫胶体金技术的基本知识

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

胶体金免疫层析法在乙型肝炎病毒表面抗原检测上的应用

实验概要本实验用胶体金免疫层析法检测了乙型肝炎病毒表面抗原。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs),制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。实验原理免疫层析技术是90年代初

胶体金免疫层析法在乙型肝炎病毒表面抗原检测上的应用

实验概要本实验用胶体金免疫层析法检测了乙型肝炎病毒表面抗原。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs),制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。实验原理免疫层析技术是90年代初

雌二醇检测实验——免疫胶体金试纸法

雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,检测雌二醇可用于(1)食品安全中激素添加剂测定(2)养殖饲料中非法激素的添加(3)临床样本的快速测定。实验方法原理采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定在硝酸纤维膜上的雌二醇结合物相结合,固定有雌二醇结合物的检测线处就显现明显

酶联免疫法的检测方法双抗体夹心法的步骤

  双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:  一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。  二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。  三、加酶标抗体:使固相免疫复

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原的评价

【 摘要 】 目的 对4种胶体金免疫层析测定(GICA)试条检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的性能、结果等技术参数进行评价,为各实验室的选用提供参考。方法 采用GICA法和酶免疫(EIA)法对定值的HBsAg样品和2 158份全血或血清标本同时测定,并结合有关物理现象作观察,对4种GIC

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原的评价

【 摘要 】 目的 对4种胶体金免疫层析测定(GICA)试条检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的性能、结果等技术参数进行评价,为各实验室的选用提供参考。方法 采用GICA法和酶免疫(EIA)法对定值的HBsAg样品和2 158份全血或血清标本同时测定,并结合有关物理现象作观察,对4种GI

三聚氰胺检测方法比较

 2007年3月, 美国发生多起因食用宠物食品而导致宠物中毒死亡事件。2008 年9月, 中国发生因食用三鹿婴幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾结石病症的严重事件。两起事件的原因都是在食品或饲料中非法添加大剂量三聚氰胺。因此, 如何快速准确的分析食品和饲料中的三聚氰胺成为食品企业、食品管理机构和广大消费者密切

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究   刘仁沿1 , 梁玉波3 1 , 陈 媛2 , 许道艳1 , 陈冰君1 , 刘永健1   (1. 国家海洋环境监测中心,辽宁大连116023 ;   2. 江西中德生物工程有限公司,江西南昌330029)   摘 要:腹泻性贝毒是一类分布较

抗原/抗体检测试剂运用的方法

  抗原/抗体检测试剂均基于抗原与抗体特异性结合的免疫学原理,常用的方法学主要有胶体金法,免疫荧光层析法、酶联免疫法和化学发光法。胶体金法操作便捷,可直接目视判读,一般15分钟即可完成检测;免疫荧光层析法与胶体金法一样操作便捷,检测迅速,但需要仪器判读;酶联免疫法可采用常规酶标仪判读,一般灵敏度较高

胶体金标记技术(制备方法和应用)

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细

侧流免疫层析技术在真菌毒素检测中的应用

    1、侧流免疫层析检测技术    侧流免疫层析检测技术(LFIA) 也称横向流动免疫检测技术,是出现于20世纪60年代初期的一种独特的免疫分析方式,以条状纤维层析材料为固相,借助毛细管的吸附作用使样品在层析材料上移动,其中样品中的待测物与层析材料上一定区域的抗体结合,通过酶促显色反应或

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 1、侧流免疫层析检测技术    侧流免疫层析检测技术(LFIA) 也称横向流动免疫检测技术,是出现于20世纪60年代初期的一种独特的免疫分析方式,以条状纤维层析材料为固相,借助毛细管的吸附作用使样品在层析材料上移动,其中样品中的待测物与层析材料上一定区域的抗体结合,通过酶促显色反应或直接使用着色标

什么是胶体金法?胶体金法定义及分类

胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫

胶体金及金标检测技术研究进展

继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)之后,一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique, ICG)逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物,利用抗原抗体特异性反应,对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来,该技术因其操作简

免疫胶体金(Immune-colloidal-gold)基本原理和常用的免疫胶...

免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶体金胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学

即时检验(POCT)的技术原理及分类(2)

二、多层涂膜技术 多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来。将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片。采用多层涂膜技术制成的干片,比干化学纸片平整均匀,用仪器检测,可以准确定量,如目前临床使用的干板化学分析系统,可用于大多数血液化学成分,如蛋白质、糖类、脂类、酶、电解质、非蛋白氮类及一些血药浓度的监

胶体金标记的抗体是什么意思

  胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。  1971年Faulk 和Taytor将胶体金引

金免疫层析试验

      1.原理   金免疫层析试验(dot immunogold chromatographic assay,DICA)是用胶体金标记技术和蛋白质层析技术结合的以微孔滤膜为载体的快速的固相膜免疫分析技术。本项技是将各种反应试剂分点固定在试纸条上,检测标本加在试纸条的一端,通过毛细血管作用使

免疫胶体金的制备及其在医学检验中的应用

  摘要免疫胶体金技术是四大免疫标记技术之一,问世二十多年来发展十分迅速,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。本文从胶体金技术的基本原理、制备方法、标记技术和实际应用等几个方面对胶体金技术作了较系统介绍。  1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此

胶体金标记实验的操作方法与步骤

胶体金标记实验的实验过程主要包含以下步骤:胶体金标记蛋白的制备及其与胶体金之间的用量比例的确定、胶体金和蛋白的结合、胶体金标记蛋白的纯化与质量检测等。1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的p

辣椒制品中苏丹红I的快速检测-胶体金免疫层析法(二)

5.2.3 辣椒粉称取辣椒粉3g(精确至0.01g)于50mL离心管中,加入8mL乙腈(3.1.1)提取,涡旋振荡1min后,6000r/min离心5min。转移上清液于10mL离心管中,吹干后加入2mL氢氧化钠溶液(3.1.6),涡旋混匀30s后置于80℃水浴皂化5min。再加入2mL正己烷(3.

辣椒制品中苏丹红I的快速检测-胶体金免疫层析法(一)

1 范围本方法规定了辣椒制品中苏丹红I的胶体金免疫层析快速检测方法。本方法适用辣椒酱、辣椒油、辣椒粉中苏丹红I的快速测定。2 原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的苏丹红I与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制了抗体和检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化,通过检测线与控制线(C

免疫层析法检测原理分类介绍

双抗体夹心•以 hCG试剂为例金标为鼠源性抗β-hCG单克隆抗体与胶体金的复合物,测试线包被羊抗α-hCG多克隆抗体,控制线包被羊抗鼠多克隆抗体。妇女受孕的“指示剂” hCG是一种肽,包含一条和FSH(促卵泡成熟激素),FLH 具有同源性的α链和一条高度特异的β链。当待测尿液或血清中含有一定量的hC