微生物细胞体内实现多色荧光信号的同时成像

荧光蛋白的发现革新了生命科学的研究,应用荧光蛋白可以观测到细胞内部的活动,例如荧光蛋白可以标记特定的蛋白,也可以作为报告探针用于检测特定基因的活性。荧光蛋白的开发和进化使其光谱得到了全面的扩展,也使得多个荧光蛋白的同时使用成为可能。 目前,多色成像较多局限于两个荧光蛋白的同时使用。通常是选取两种光谱相差很大的荧光蛋白,以实现双色标记或检测。例如红色与绿色荧光蛋白同时使用,或者蓝色与黄色荧光蛋白同时使用,但很难实现三种及以上荧光蛋白的同时使用。绝大多数荧光蛋白的激发和吸收光谱都很宽,光谱重叠不可避免,这也是限制多色荧光蛋白同时使用的主要原因。实际上,针对绝大多数的信号传导系统,研究人员迫切需要选取多种荧光蛋白以实现对系统内上下游多个信号(大于2个)的同时检测,但光谱重叠会不可避免地导致不同荧光信号之间相互干扰,使信号失真,进而无法得到可靠的数据。 针对以上问题,中国科学院深圳先进技术研究院合成所金帆团队提供了一套完整的多色......阅读全文

原子荧光测量无信号或信号异常

测量无信号或信号异常(所有曲线测量值很小) 1)、仪器电路故障: 判断方法:在灯能量显示处反射,有能量带变化,仪器电路正常。否则,仪器电路不正常。 ★2)、反应系统: 管道堵、漏,水封无水、未进或进不足样品和还原剂(检查进样管路),氢化物未进入原子化器 ★3)、未形成氩氢火焰 还原剂是否现配、还原剂

荧光仪信号小的原因

荧光仪信号小的原因 1.原子化器的高度 2.硼氢化钾的浓度及稳定性 3.蠕动泵及管路的连接与老化程度(是否有漏气) 4.反应器中能否看到酸液(样品溶液)与硼氢化钾作用. 硼氢化钾没有到反应块的话肯定是没有信号的。如有明显的气泡产生,则看看别的方面。 5.HCL的设置情况(位置--灯电流) 6.观察

原子荧光无信号问题

一.原子荧光无信号问题1.     进液不完全,未正常反应。(仅限手动进样方式)观察进样方式是否正确,进样量是否满足定量环要求。2.     标液失效可以配置无机形态的单标,从载流针位置进标液试下是否有信号,如果信号正常,在从六通进样阀位置进样看看。如果没有信号,检查流动相配置是否正确,柱压是否正常

荧光倍频峰会随荧光信号减弱而减弱吗

一般来说,扫描荧光光谱应该从波长大于激发光的波长约 5 nm 处作为扫描起点,原因有两点:1) 避免激发光的干扰;2) 从能级上来看,荧光光谱不可能在小于激发波长的位置采集到信号.因为激发光的能量决定了将分子中的电子激发至能跃迁到的最高能级,因此,从这个能级向下跃迁而发出的荧光波长不可能小于激发光的

怎么才能获得原子荧光信号

原子荧光光谱(AFS):典型原子荧光检测过程是以氢化物/冷蒸气发生方式实现样品的导入,氩氢扩散火焰原子化器实现被测元素的原子化,自由原子被空心阴极灯激发后发射的原子荧光,以无色散光路被 光 电 倍 增 管 接 收,获 得 原 子 荧 光 信 号。

时间分辨荧光免疫分析信号原理

  普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射

荧光定量PCR的荧光信号强度和什么有关系

常规PCR中,在扩增反应结束之后,我们一般通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,无法对PCR扩增反应进行实时检测,也无法对起始模板准确定量,而很多情况下,我们所感兴趣的是起始模板量,如转基因动植物中插入某种外源基因的拷贝数或者病人中某种病毒DNA/RNA的精确copy数等,如此,荧光定量PCR

荧光标记杂交信号的检测方法

由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为DNA芯片进一步微型化提供了重要的检测方法的基础。大多数方法都是在

荧光标记杂交信号的检测方法

使用荧光标记物的研究者最多,因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为D

荧光标记杂交信号的检测方法

使用荧光标记物的研究者最多,因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为D

原子荧光不出信号是怎么回事

很明显管道有余汞,用高浓度的含盐酸载流液走空白清洗数次,知道背景荧光降到2000吧,再做曲线.

原子荧光基线低或者峰信号低

一.原子荧光基线低或者峰信号低1检查泵管和压块是否正常。  检查泵管是否已经失去弹性,压块是否能够压紧。(可以调节压块上方的钢片,向下调整,增大向下的压力)2 检查仪器气液分离器中反应是否正常,是否U型管两边都有气泡生成,如果反应较弱,检查还原剂是否有结块硬化的现。3检查灯问题。元素灯经过长时间使用

原子荧光测砷时空白信号的问题

前几次测砷时空白信号一般为10左右,内控信号为40多,昨天同样的方法测定时,空白降为2,内控将为8,而且测定样品时信号值也为7~8。于是重新配了内控样,重新配了试剂,又测,还是这个结果,电阻丝是新换的,空心阴极灯用的很久了,有两个,都试了,结果一样。 1. 还原剂是否新配,浓度多少。可点着火 2.

荧光定量PCR检测负对照有信号的原因

(1)引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。(2)模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。(3)实验器材污染:移液器、水、枪头或者荧光定量PCR孔内有荧光污染。

荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术(二)

       多种PSA™多重染色        PSA™系统经过设计,可与其他荧光发生器,细胞和组织染色技术以及其他PSA™成像套件兼容,从而可以同时可视化多个目标。与TSA和荧光二抗相比,PSA™的检测阈值较低,还可以检测在同一宿主物种中产生的,但信号之间无明显串扰的两个靶标。PSA™成像兼

荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术(三)

       灵活的工作流程:与IHC,ICC,ISH和流式细胞仪兼容:        PSA™成像技术可适用于能在其检测方案中添加HRP的任何应用,并且与免疫学应用中常用的样品类型和荧光成像平台兼容。与传统的IHC,ICC,ISH和FC应用程序结合使用时,PSA™成像可显著提高检测灵敏度,而不会降

绿色荧光蛋白在信号转导中的应用

  新近研究发现,某些突变的 GFP 能够发生荧光共振能量转移 (fluorescence resonance energy transfer,FRET)。FRET 是一种从荧光分子的激发状态到临近基态接受分子之间量子力学能量转移的现象。FRET 发生的前提条件是,荧光接受分子必须在荧光提供分子释放

荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术(一)

       Power Styramide™信号放大(PSA™)是一种新颖的酶检测信号放大方法,用于检测细胞和组织中的低丰度靶标。通过将iFluor™染料的卓越亮度和光稳定性与多HRP介导的PSA™成像相结合,可产生明亮的荧光信号,其准确性和灵敏度明显高于传统的免疫组织化学,免疫细胞化学和原位

关于流式细胞仪的荧光信号的介绍

  在实际使用中,仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时,可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。  荧光信号主要包括两部分:①自发荧光,即不经荧光染色细胞内部的 荧光分子经光照射后所发出的荧光;②特征荧光,即由细胞经染色

流式细胞仪荧光信号等相关内容

  在实际使用中,仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时,可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。  荧光信号主要包括两部分:①自发荧光,即不经荧光染色细胞内部的 荧光分子经光照射后所发出的荧光;②特征荧光,即由细胞经染色

如何减小或消除荧光光谱上的散射信号干扰

小弟最近做荧光,在荧光物质的发射区总是会有来自激发光信号的干扰,且干扰强烈,请问一下大家怎样能消除掉这些干扰。 谢谢 荧光分析法上说,可以调节狭缝宽度,但我觉得效果也不好。那你就换个激发波长试试吧,不用最佳激发波长激发,避开发射峰。lee10yie(站内联系TA)可以先测定空白溶液的荧光光谱(从图上

如何减小或消除荧光光谱上的散射信号干扰

小弟最近做荧光,在荧光物质的发射区总是会有来自激发光信号的干扰,且干扰强烈,请问一下大家怎样能消除掉这些干扰。 谢谢 荧光分析法上说,可以调节狭缝宽度,但我觉得效果也不好。那你就换个激发波长试试吧,不用最佳激发波长激发,避开发射峰。lee10yie(站内联系TA)可以先测定空白溶液的荧光光谱(从图上

流式细胞仪荧光信号的组成部分介绍

  荧光信号主要包括两部分:  ①自发荧光,即不经荧光染色,细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光;  ②特征荧光,即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光,其荧光强度较弱,波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号,在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。  在免疫细胞化学等测量

原子荧光检测时无信号的原因以及解决方法

一、     无载气或无屏蔽气检查气路是否打开,确保压力表主表压力在2.0MPa以上,分压表在0.2~0.3MPa之间。屏蔽气与载气接错或炉芯破裂,两气混合。二、     氢化物反应没有发生确保泵管路连接正确,压管阀压紧,泵管无破损漏液现象,硼氢化钾要现用现配,仔细观察反应块内会有气泡生成。三、  

我国学者研制多色荧光成像技术,可精准分离特定信号

  荧光蛋白的发现革新了生命科学的研究,应用荧光蛋白可以观测到细胞内部的活动,例如荧光蛋白可以标记特定的蛋白,也可以作为报告探针用于检测特定基因的活性。荧光蛋白的开发和进化使其光谱得到了全面的扩展,也使得多个荧光蛋白的同时使用成为可能。图:(左)1-4色荧光报告系统的质粒系统示意图,(右)串色校正后

微生物细胞体内实现多色荧光信号的同时成像

  荧光蛋白的发现革新了生命科学的研究,应用荧光蛋白可以观测到细胞内部的活动,例如荧光蛋白可以标记特定的蛋白,也可以作为报告探针用于检测特定基因的活性。荧光蛋白的开发和进化使其光谱得到了全面的扩展,也使得多个荧光蛋白的同时使用成为可能。  目前,多色成像较多局限于两个荧光蛋白的同时使用。通常是选取两

分析X射线荧光光谱仪没有峰位信号的原因

  1、探测器的前置放大电路出现故障,出现的噪声信号为电路噪声,不是X射线信号。  2、测角仪的θ和2θ耦合关系发生混乱,通常是控制θ和2θ耦合关系的CMOS中的数据由于电池漏电等原因丢失,这时需要重新对光。

原子荧光测定样品时也经常出现信号溢出的情况

在用原子荧光测定化妆品中汞时,采用的样品前处理方法是微波消解法,空白的荧光强度很大,测定样品时也经常出现信号溢出的情况,不知是什么原因? 1. 空白的荧光强度很大有可能是试剂污染,或者是灯电流和负高压设定值太高。测定样品时出现信号溢出说明你的样品中汞含量相当的高,管路被污染了。 建议1.用盐酸或硝酸

能量色散X射线荧光光谱仪信号处理系统研究

近几十年来,X射线荧光光谱仪不断的发展和完善,并且X射线荧光分析技术的应用领域越来越广泛,不仅在地质、矿物、石油等领域被广泛应用,在化工、医疗等领域也大放异彩。现代能量色散X射线荧光(EDXRF)光谱仪的主要组成部分有:X射线发生器(X射线管、高压电源)、检测系统(准直器、探测器)、信号处理电路(放

我国科研人员开发出新型高灵敏钙信号荧光蛋白探针

近日,北京师范大学认知神经科学与学习国家重点实验室教授章晓辉团队、北师大生命科学学院教授王友军团队与中国科学技大学教授唐爱辉团队合作开发构建了一类新型的检测钙信号的荧光蛋白探针“尼莫”(NEMO),该探针具有更强和更精准的定量测定性能。近日,该成果在线发表于期刊《自然-方法》。生命体的许多活动都离不