NCBI使用方法之二:如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列
1、进入NCBI主页在search后面选择Gene,在for后面填写需要查找的基因的名字。点击“Go”,出现了很多基因序列,在每个序列的右边还有“Order cDNA clone” 的链接,这些序列中有些序列是跟你的目的基因同名的,有些是别名(Other Aliases)与你的目的基因一致,根据每个序列的介绍认真选择你的目的基因。上图中我需要的IL6是标号为2的序列。2.1、查找cDNA序列2.1.1、点击Order cDNA clone, 出现目的页面如图所示:2.1.2、点击Clone Sequence后面的链接即可得到cDNA序列。点击后如图所示(只抓取其中一部分):2.2、查找mRNA、蛋白序列回到步骤1点击“Go”之后出现的页面,点击目的基因的名字,出现以下页面(只抓取相关部分):页面的下半部分,即可以获取mRNA和蛋白序列的部分:找到“NCBI Reference Sequences (RefSeq)”,它......阅读全文
NCBI使用方法之二:如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列
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如何在NCBI上查找引物序列
在NCBI中BLAST引物(注意选择BLAST的数据库),然后再Blast结果中找寻符合要求的序列。后面会列出很多链接,直接就能看到NCBI号 进入http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/Blast.cgi?PAGE=Nucleotides&PROGRAM=blastn&
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NCBI使用方法之一:Map-viewer查找基因序列,RNA,启动子
下面以人的IL6(白细胞介素6)为例讲述一下具体的操作步骤 一、打开Map viewer页面,网址为 在search的下拉菜单里选择物种,for后面填写你的目的基因。 二、点击“GO”: 三、在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框
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如何快速查找LncRNA序列
查找LncRNA序列的网站有很多,包括Genebank,Ensembl,RefSeq,UCSC数据库等。今天,小编就给大家讲讲如何通过LncRNA ID号查找LncRNA的序列。 一.根据LncRNA来源数据库,进入相应链接。 1. Genebank:https://www.ncb
如何快速查找LncRNA序列?
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如何利用BankIt向NCBI在线提交序列
相关专题向NCBI提交序列常用的方法有两种,其一是在线提交的BankIt,其二是用软件Sequin。在此结合网络牛人实际操作经验来总结下如何通过BankIt在线提交DNA 或RNA序列,供参考。1.整理序列信息:包括病原采集地、病原的寄主、寄主症状、采集人等基本信息;还有序列分析结果,包括序列全长大
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向NCBI提交序列常用的方法有两种,其一是在线提交的BankIt,其二是用软件Sequin。在此结合网络牛人实际操作经验来总结下如何通过BankIt在线提交DNA 或RNA序列,供参考。1.整理序列信息:包括病原采集地、病原的寄主、寄主症状、采集人等基本信息;还有序列分析结果,包括序列全长大小,开放
使用NCBI设计引物的教程
引物设计是PCR实验的关键步骤之一。正确的引物设计能有效提高实验的成功率。NCBI提供了一些强大的工具来辅助引物设计,本文将详细介绍如何使用NCBI工具设计引物。一、了解NCBI标记类别在NCBI中,常见的标记符号通常以两个字母开头,后接一组数字。这些符号表示不同类型的序列,对于选择正确的模板序列至
RNAi技术专有名词(2)
21.Homologous Chromosome:同源染色体一对染色体,分别来自父本和母本,染色体上有着相同的线性基因序列。 22.Recombinant Clone:重组克隆将不同来源的DNA片段合成在一个DNA分子中,这种技术称为重组,得到的分子为重组克隆。 23.Ribonucleic
生物信息学应用:序列分析,电子克隆等初探
生物信息学可指利用信息技术管理和分析生物学数据。这就意味着生物信息学所涉及的范围相当广泛,从人工智能、机器人一直到基因组(genome)分析。就基因组分析这一角度来看,生物信息学主要是指核酸和蛋白质序列数据的计算机处理和分析。近年来,蛋白质结构数据的快速增长,使蛋白质三维结构的处理分析也归入到生物信
RNAi相关术语
1.RNAi :(RNA interference)RNA干扰一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference,RNAi ,也译作RNA干预或者干涉)。它也是体内抵御外在感染的一种重要保护机制
功能基因cDNA序列的分析
(一) cDNA序列的测定一.原理DNA 序列测定技术,目前主要是根据Sanger 等提出的酶法和Maxam和Gilber 提出的化学降解法,这两种方法的原理大致相同。这里主要介绍Sanger 的酶法——双脱氧链终止法。双脱氧链终止法是Sanger 等人于1977 年建立起来的。它是利用了2'
设计引物用cds序列和cdna序列的区别
cDNA和mRNA的序列是互补的,如果用两个引物,最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段。由于引物方向从5‘至3’,所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可。
核酸序列分析
【实验目的】1、 掌握已知或未知序列接受号的核酸序列检索的基本步骤;2、 掌握使用BioEdit软件进行核酸序列的基本分析;3、 熟悉基于核酸序列比对分析的真核基因结构分析(内含子/外显子分析);4、 了解基因的电子表达谱分析。【实验原理】针对核酸序列的分析就是在核酸序列中寻找基因,找出基因的位置和
核酸序列分析实验
实验方法原理针对核酸序列的分析就是在核酸序列中寻找基因,找出基因的位置和功能位点的位置,以及标记已知的序列模式等过程。在此过程中,确认一段 DNA 序列是一个基因需要有多个证据的支持。一般而言,在重复片段频繁出现的区域里,基因编码区和调控区不太可能出现;如果某段 DNA 片段的假想产物与某个已知的蛋
如何查找蛋白质的分子量大小
www.uniprot.orgUniProt是一个集中收录蛋白质资源并能与其它资源相互联系的数据库,也是目前为止收录蛋白质序列目录最广泛、功能注释最全面的一个数据库。 UniProt是由欧洲生物信息学研究所(European Bioinformatics Institute)、美国蛋白质信息资源(P
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如何查找质粒图谱
方法一:使用Vector NT 软件 做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。这款软件的软件包里面会包括invitrogen公司的所有质粒图谱信息和
分子生物学常用数据库汇总及推荐
分子生物学主要研究具体生物大分子在某一生物学行为过程中的表达变化、功能和作用方式;主要涉及基因的表达调控、蛋白相互作用、信号分子间的交互对话等。分子生物学实验常需要我们在具体实验前对所关注的基因的一些基本信息、可能受哪些因素调控、与哪些分子可能存在潜在的相互作用,可能参与哪些生物学行为等进行一些初步
cDNA文库组标准流程二:mRNA的分离
1.Oligotex mRNA Kits (QIAGEN)法 准备工作:1.将Oligotex Suspension 置于37℃水浴中,旋转混匀,溶解Oligotex.,然后置于室温。2.将OBB Buffer置于37℃水浴中,旋转混匀,重溶沉淀物,然后置于室温。3.将OEB Buffer 置于7
如何查找microrna的前体
在NCBI主页输入要查找的miRNA的名称,all database中选择GENE;在搜索结果中选择目的miRNA,在NCBI reference sequences(RefSeq)栏中点击目的miRNA的ID号即转到序列,还可以通过链接到UCSC、miRBase查找。
cDNA文库的构建和筛选—在外界环境压力条件下,...(二)
8 标记探针的合成9 Northern 印迹(1)10X MOPS 缓冲液: 200 mmol/L MOPS, 50 mmol/L 乙酸納, 10 mmol/L EDT A , pH 7. 0。(2)I. 25% 甲醛变性胶:将 3.75 g 琼脂糖溶于 217 m L 双蒸水中,加 E B 至
基因表达轮廓(gene-expressed-profile)技术2
经过这轮RDA过程,Tester中的目的DNA将得到第一次富集。将第一轮产物更换新接头,进行第二轮RDA过程,目的DNA可得到进一步的富集。该技术假阳性很低。但仍不能解决个体mRNA在丰度上存在巨大差异的问题,当靶序列浓度较低时,其富集受抑制。3:抑制消减杂交(suppression subtrac
用PCR扩增cDNA库中的特异序列
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库,然后用抗体或 DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因,但建立和筛 选CDNA库是一项非常耗时.费力的工作,而且用寡聚核苷酸作探针进行筛选需大量蛋 白质序列结构的资料。聚合酶链的反应(PCR)方法可使一种特
PCR扩增CDNA库中的特异序列策略
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库,然后用抗体或 DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因,但建立和筛 选CDNA库是一项非常耗时.费力的工作,而且用寡聚核苷酸作探针进行筛选需大量蛋 白质序列结构的资料。聚合酶链的反应(PCR)方法可使一种特异D
如何设计基因cds序列的pcr引物
提取细胞总RNA然后用试剂盒反转录成cDNA,用cDNA作为模板扩增基因的CDS区,然后想要转染进细胞中。比如MYOD1基因,首先在NCBI找到它的mRNA序列,然后找到它的CDS序列,全部复制下来,在primer5.0中。正向引物直接从CDS的第一个核酸开始(比如18bp),反向引物从CDS最后一
手把手教你设计引物(图文并茂)
宽度:713 px高度:435 px维持原图长宽比:确认不知不觉几年下来自己也快毕业了,感谢丁香园这些年来的帮助。没有什么可回报的东西,就发个帖教教新人如何设计引物吧,尽量做到手把手的教,图文并茂。引物设计的帖子不少,以前很多战友会推荐Oligo、PrimerPremier、DNA man等等软件。
应用mRNA反转录扩增cDNA(RTPCR)
实验方法原理 酶促催化使RNA反 转 录 为cDNA第一链。 一 条寡聚脱氧核苷酸引物先 与 mRNA杂交,然 后 由RNA依赖的DNA聚合酶催化合成相应互补的cDNA拷贝,后者能进一步 用 于PCR扩增。依据实验的不同目的,针对单链cD