微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验
实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。4. 离心（800～1000rpm，5min）弃上清液，用PBS洗涤细胞2次。5. 加入50μl荧光（FITC或PE）标记的第二抗体，室温下避光染色30min。6. 上流式细胞仪检测。 展开 注意事项 1. 新鲜全血一般室温......阅读全文
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备
实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。4. 离心（800～1000rpm，5min）弃上清液，用PBS洗涤细胞2次。5. 加入
微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
实验步骤目前制备全血细胞样品的方法很多，且很成熟，常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后进行特异性荧光染色，其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP（免疫学样品处理器）进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×
微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
实验步骤 目前制备全血细胞样品的方法很多，且很成熟，常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后进行特异性荧光染色，其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP（免疫学样品处理器）进行快速制备微量全血样品的方法。1
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验
实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。4. 离心（800～1000r
微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
目前制备全血细胞样品的方法很多，且很成熟，常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后进行特异性荧光染色，其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP（免疫学样品处理器）进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或ED
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验 实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置1
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验
实验步骤1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。4. 离心（800～1000rpm，5min）弃上清液，用PBS洗涤细胞2次。5. 加入5
流式细胞术荧光那些事儿
自上世纪70年代问世以来，流式细胞术（FCM）在基础科研和临床诊断和治疗上得到了越来越广泛的应用。但是，做FCM往往会遇到荧光信号太弱的情况。好不容易搞了一管细胞去做流式，却做不出荧光信号。真的是急死个人。其实，毛博也是到米国做博士猴以后才开始做流式的。时间不算长。但是做得非常非常多。每天都要做好几
流式细胞术单抗直接荧光需要几种对照？
首先确认你用的直标抗体的荧光染料是什么，再确定该抗体的来源种属，选择相应的同型对照。如：你现在想检测小鼠淋巴细胞表面的CD4抗原， 荧光染料为FITC， 抗体来源为大鼠的IgG1亚型， 即Rat anti Mouse CD4-FITC （IgG1）， 你所需要的同型对照就应该是Rat IgG
流式细胞术
一. 流式细胞术概述流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体, 同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,可对
流式细胞术怎么调节荧光补偿FITC/PE/PerCP/APC
现在的机器都是自动调节，不过也要做好准备工作。我大致说一下原理。做补偿调节，需要以下的样本，无任何染色的样本，分别是FITC， PE， PerCP还有APC单染阳性的样本，所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代，你需要画出这四个颜色两两配对的散点图，比如FITC-PE， FITC-PerCP，
流式细胞术介绍
流式细胞术（flowcytometry，FCM）是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术，使被测溶液流经测量区域，并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性，从而对高速流动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的方法。 首先，待测细胞经处理或染色后被压人流
流式细胞术简介
流式细胞术是一种细胞分析技术，它在20世纪50年代首次被用于测量细胞体积，可在细胞随快速流动的流体直线通过观察孔时进行检测。从那时起，许多工程师和研究人员不断创新，最终带来了现代流式细胞仪。在流式细胞仪中，溶液中的细胞以每秒10,000个细胞（或更多）的速度通过仪器的激光束，进而对细胞进行检测。如今
读懂流式细胞术
流式细胞术，顾名思义，是研究细胞的一种技术，但是它的研究对象绝对不仅仅局限于真核细胞，还可以研究细菌、病毒以及各种蛋白等等。无论你是基础科研工作者还是临床医生，你都用得上这项技术。自1974年BD公司和斯坦福大学联合研制出世界上第一台商用流式细胞仪以来，作为集N个学科的智慧于一身，将计算机技术、电子
流式细胞术原理
流式细胞术公开课会形成鞘液流（鞘液是为了保证细胞在中间形成单个排列的细胞流，因为要保证激光覆盖整个样本中心流）在外周，样本流在中央的层流状态，使得样本仅在轴心激光照射到样本流上，激光60um宽，20um高（宽高有限，只有样本流刚好在中间才能保证激光能覆盖样本流细胞）样本流中的细胞表面的荧光抗体受到激
流式细胞术原理
FSC通道FSC，即前向角散射，它的值代表细胞的 大小 。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小，利用FSC值对细胞进行分群和分类。SSC通道SSC，即侧向角散射，它的值代表 细胞的颗粒度 （granularity）。细胞越不规则，细胞表面的突起越多，细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物
流式细胞术原理
FSC通道FSC，即前向角散射，它的值代表细胞的 大小 。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小，利用FSC值对细胞进行分群和分类。SSC通道SSC，即侧向角散射，它的值代表 细胞的颗粒度 （granularity）。细胞越不规则，细胞表面的突起越多，细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物
流式细胞术原理
流式细胞术是一种细胞分析技术。流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。流式细胞术是一种用于细胞计数、细胞分
流式细胞术简介
一、流式细胞术发展简史 流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是：①测量速度快，最快可在1秒种内计测数万个细胞；②可进行多参数测量，可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量，并具有明显的统计学意义；③是一
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验
活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光）实验材料细胞初始抗体试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，轻摇，收获细胞。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验
活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光） 活细胞表面抗原的荧光染色（间接免疫荧光） 实验材料 细胞
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验
活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光） 活细胞表面抗原的荧光染色（间接免疫荧光） 实验材料 细胞
流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验2
活细胞表面抗原的荧光染色（间接免疫荧光）实验材料细胞试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，收获细胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化时间长。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。操作始终在冰上进行。2. 用 4
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
流式细胞术和流式细胞仪
1、流式细胞仪(Flow Cytometer)：是集光电子物理，光电测量，计算机，细胞荧光化学，单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。2、流式细胞术(Flow Cytometry)：利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速（每秒可达1000-10000个）的定量分析和分选（纯度可达
流式细胞术的展望
流式细胞仪从细胞技术开始发展到今天，60年代至70年代是其飞速发展时期，激光技术、喷射技术以及计算机的应用使流式细胞仪在原理和结构上形成了固定的模式。80年代则是流式细胞仪的商品化时期，这期间不断有新型号的仪器推出，在多参数检测技术上不断提高。进入90年代，随着微电子技术特别是计算机技术的发展，计算
流式细胞术基本简介
流式细胞术（英语：flow cytometry）是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术（Flow Cytometry，FC）是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号，实现高速、
流式细胞术实验步骤
流式细胞术实验：1、制备细胞悬液，计数2、分装，按照每个EP（1.5ml）管1-2*10 6个细胞分装，3500rpm，4度离心。3、用100ulPBS重悬，加入10ul大鼠血清封闭，4度避光30min。4、加入相应的荧光标记的抗体，混匀，避光，4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗两遍。6、用