植物基因转化方法分为这三种！
农杆菌介导基因转化： 转化原理:农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减速分裂稳定的遗传给后代，这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。 特点：操作简便、成本低、转化率高，广泛应用于双子叶植物的遗传转化。 基因枪转化： 转化原理：利用火药爆炸或高压气体加速，将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。 特点：基因枪转化率......阅读全文
植物基因转化技术
相关知识植物基因转化技术是指将外源基因导入植物细胞或组织，获得转基因植物的技术。植物基因转化技术总体上可分为两大类：1 以生物体为介导的基因转移法；2 DNA直接导入法。前者如农杆菌介导法，植物病毒介导法；后者如基因枪法、电击法、聚乙二醇法、脂质体法及花粉管通道法。其中应用最广的是根癌农杆菌介导法。
植物基因转化常用方法
一 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转
植物基因转化常用方法
一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转
植物基因转化常用方法3
（三）改良植物性状的策略 基因克隆技术提供了一种新的改良植物的方法，它可以直接的改变植物的基因型。有两种策略可以应用。 1） 基因附加：通过添加1个或多个基因改变植物的性状。 2） 基因扣除：利用基因工程技术使一个或多个植物已经存在的基因失活。 灭活植物基因是通过反义技术来实现的。将外源基因
植物基因转化常用方法2
（二）Ti质粒转化植物细胞的战略 １ . Ti质粒的改造 有以下理由使天然的Ti质粒不能作为表达载体使用： a. 生长在培养基上的植物转化细胞产生大量的生长素和分裂素阻止了细胞再生长为整株植物，因此，必须除去生长素和分裂素基因。 b. 有机碱的合成与T-DNA的转化无关，而且可能会影响植物细
植物基因转化常用方法4
1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程，获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择，它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性，阻止或减缓害虫生长，许多植物能产生蛋白酶抑制剂，如豇豆和common bean, 他们的基因已经被成功的转移到其
植物基因转化方法分为这三种！
农杆菌介导基因转化： 转化原理:农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到
植物培养与转化
实验概要本实验介绍了由农杆菌介导的植物转化方法。主要试剂LB培养基，5%蔗糖溶液，0.02% Silwet L-77，含0.8%琼脂的1/2 MS (Hygromycin)固体培养基，30uMDex，50uM雌激素主要设备人工气候室，4℃冰箱，22℃光照培养箱实验材料农杆菌，植物实验步骤1. 植物培
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物 遗传转化 【目的】：学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】：以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。 【内容】：1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养 3、烟草叶片与对
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物遗传转化 【目的】：学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】：以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。 【内容】：1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养
农杆菌介导的植物遗传转化
实验概要以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。主要试剂70%乙醇0.1% HgCl2无菌水卡那霉素(kan)羧苄青霉素(Cb)培养基：LB培养基100ml；MS 盐溶液(pH 7.0)100ml，
根癌农杆菌介导的植物转化－叶盘转化法
一、原理以根癌农杆菌介导的遗传转化是目前最有效的途径之一。根癌农杆菌对植物释放的化学物质产生趋化反应，向植物受伤组织集中。经共培养后，受伤部位的化学诱导物透过农杆菌的细胞膜使Ti质粒上的Vir基因活化。Vir基因产物使Ti质粒上的T－DNA进入植物细胞，并整合到植物核基因组中。插入在T－DNA左右边
基因枪法转化大麦实验
实验材料麦穗试剂、试剂盒植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材EP 管移液枪实验步骤1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，调到合适
基因枪法转化小麦实验
实验材料幼胚盾片 试剂、试剂盒乙醇 漂白消毒剂
基因枪法转化大麦实验
实验材料麦穗 试剂、试剂盒植物凝胶 乙醇
转基因技术的转化过程
(1）提取目的基因 从生物有机体复杂的基因组中,分离出带有目的基因的DNA片段，或者人工合成目的基因，或从基因文库中提取相应的基因片段和PCR技术进行目的基因的增殖。 (2)将目的基因与运载体结合 在细胞外, 将带有目的基因的DNA片段通过剪切、粘合连接到能够自我复制并具有多个选择性标记的运输
外源基因转化的用途
利用外源基因转化已经产生了转基因学科，利用重组DNA技术可以将以前没有的新特性引入生物体。通过转基因创造的生物体很多，从细菌到哺乳动物，包括绵羊和猴子，它们有多种用途：用于研究发育遗传学、疾病过程和基因调控等。转基因动物可以生产药物，并增加牛奶或肉类的产量。来自转基因动物的组织和器官可以用于输血和移
植物转基因技术
1)农杆菌介导转化法 将外植体放入含有外源基因的农杆菌(Agrobacteriumtume／ociens)菌液中浸泡，然后转入共培养基，再转入筛选培养基诱导抗性愈伤组织和抗性芽，生根后的抗性植株移栽至营养钵生长。(2)基因枪法 又称微弹轰击法。其基本原理是将外源DNA黏附在微小的金粒或钨粒表面，然后
植物雌雄－基因可辨
大多数人不知道的一点是，我们在超市里购买的黄瓜是纯粹的“女性”——它们由精心杂交培育的、只生产雌花的植株生长而来。长久以来，农民们都知道“女性”因素对于农作物成功的重要性：雌花比例越高，种子和果实的产量越大。最近，科学家揭示了植物性别决定的分子基础。 在《科学》上发表的一篇文章中，以色列巴伊
基因枪活体植物基因转染
本实验所用基因传递系统（基因枪）原理：低压基因递送系统（GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1），根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计，是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示，当左侧出现输入气体压力时（如：氦气），两个腔室之间将形成巨
癌基因转化细胞：基因组DNA转染法
实验概要 癌基因转化细胞实验步骤1．提取基因DNA（含癌基因）。2．DNA准备：取供体DNA50～100微克，加3M NaCl或醋酸钠使最终浓度至0.3M混匀。3．再加2倍体积无水乙醇，3000转/分离心10分钟，去上清。4．加入转染缓冲液，待DNA充分融解后，再加入2.5M CaCl2，令最终浓度
基因枪法转化小麦实验（二）
实验材料 BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒 无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉（0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中，加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min，短暂离心 3s，然后弃上清。
影响基因枪转化的因素？
首先是气源的压力大小，以及射击距离，实验证明轰击次数太多也会造成对细胞的伤害，因此一般以2-3次为宜。
基因枪法转化小麦实验（一）
实验材料 幼胚盾片试剂、试剂盒 乙醇漂白消毒剂仪器、耗材 诱导培养基实验步骤 下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法，幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种，幼穗转化比幼胚盾片转化更有效，如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier，以及其他小
基因枪法转化大麦实验（一）
实验材料 麦穗试剂、试剂盒 植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材 EP 管移液枪实验步骤 1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，
基因电转化技术的创新介绍
常规的转染包括脂质体，电转化和病毒法。普通的293、Hela等细胞系，脂质体转染也能达到70-80%。而对于其他一些极难转染的细胞，如原代神经元，原代神经干细胞，免疫细胞等来说，脂质体转染不仅转化效率很低（约10%），而且细胞死亡率极高。因此有些研究人员不得不转用更加昂贵而且毒性更大的病毒包被法。病
基因枪法转化大麦实验（二）
4. 粒子轰击幼胚(1) 幼胚渗透处理轰击前，取分离 1 天后的幼胚，放在高渗培养基中处理 4 h。每皿 20~30 枚幼胚，置于培养皿中心 1.6 cm2 范围内，盾片朝上。胚可以放得紧密一些，但相互之间不要碰到。轰击之后幼胚继续高渗处理 16 h。(2) 基因枪准备① 基因枪所有组件和内部的枪体
转基因植物中的筛选基因
基因工程（DNA重组技术）是在离体条件下对不同生物的遗传物质（DNA）进行人为“加工”，并按照人们的意愿重新组合，以改变生物的性状和功能，然后再通过适当的载体将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞中表达，从而获得新的生物机能。这种利用基因工程技术获得的植物一般称为“基因工程植物”。自
基因工程技术转化正加速
“传统的抗体在人体或动物身上反复使用的时候会产生第二抗体，我们现在通过采用国际上先进的基因工程表达手段，当抗体到达目标之后，不会产生第二抗体，可以反复使用，效果好很多。”近日，在青岛国际院士港内，博隆基因公司技术负责人尹燕博介绍，公司团队在前期科研基础上，开展新型基因工程疫苗、治疗性抗体等生物制
基因工程技术转化正加速
“传统的抗体在人体或动物身上反复使用的时候会产生第二抗体，我们现在通过采用国际上先进的基因工程表达手段，当抗体到达目标之后，不会产生第二抗体，可以反复使用，效果好很多。”近日，在青岛国际院士港内，博隆基因公司技术负责人尹燕博介绍，公司团队在前期科研基础上，开展新型基因工程疫苗、治疗性抗体等生物制