应用FLIPR系统检测iCell心肌细胞钙振荡(二)
化合物对心肌细胞跳动的峰值参数的影响用FLIPR Tetra系统在化合物添加24小时后进行钙振荡信号的检测和记录。iPSC2s与之前版本的iPSCs以相同的方式进行实验,通过形成缝隙连接并同步振荡,检测到钙敏感染料指示的峰值频率。新型细胞比之前版本的细胞可提早4-5天用于检测实验,同时因其更低的污染风险和一个整体较短的时间周期并得到类似的结果,明显改善了筛选的工作流程。用于实验研究的抗肿瘤化合物包括:舒尼替尼、伊马替尼和星形孢菌素(由于毒性原因而不作临床使用的化合物)均是激酶抑制剂;白消安,一个烷基磺酸盐;阿霉素,一种蒽环类药物;依托泊苷,一种拓扑异构酶II抑制剂;而紫杉醇会干扰细胞管蛋白的生成。在化合物添加24小时后,一些钙振荡信号变化明显异于对照组(图2)。舒尼替尼的振荡频率较低,且在10%峰值高度的峰宽显著大于对照组。其它具有相似钙振荡结果的抗癌化合物包括伊马替尼(Imatinib)和星形孢菌素(Staurospori......阅读全文
应用FLIPR系统检测iCell心肌细胞钙振荡(二)
化合物对心肌细胞跳动的峰值参数的影响用FLIPR Tetra系统在化合物添加24小时后进行钙振荡信号的检测和记录。iPSC2s与之前版本的iPSCs以相同的方式进行实验,通过形成缝隙连接并同步振荡,检测到钙敏感染料指示的峰值频率。新型细胞比之前版本的细胞可提早4-5天用于检测实验,同时因其更低的
应用FLIPR系统检测iCell心肌细胞钙振荡
药物有效性和安全性筛选成本的持续增加导致了对创新技术的需求,从而在药物发现过程中更早地进行表征和特性的检测分析。FDA正在制定化合物检测的指导方针,以确保药物的安全性,使得药物无需因为不良反应而撤市, 例如阻断心脏hERG通道,并导致像尖端扭转型室性心律失常这样的症状。这一方向被称为全面的体外心
应用FLIPR系统检测iCell心肌细胞钙振荡(一)
简介药物有效性和安全性筛选成本的持续增加导致了对创新技术的需求,从而在药物发现过程中更早地进行表征和特性的检测分析。FDA正在制定化合物检测的指导方针,以确保药物的安全性,使得药物无需因为不良反应而撤市, 例如阻断心脏hERG通道,并导致像尖端扭转型室性心律失常这样的症状。这一方向被称为全面
应用FLIPR-钾离子通道检测试剂盒对hERG通道阻断...(二)
应用FLIPR 钾离子通道检测试剂盒对hERG通道阻断剂特性的分析电生理实验为便于结果比较,所有同样的hERG 通道阻断剂均在IonWorks Barracuda1 全自动膜片钳系统进行了检测得到相应的IC50 值(图4)。为观察化合物的频率依赖性效应,电压刺激命令均以0.1Hz 频率在加样前后分别
FLIPR荧光检测法的相关介绍
近年来,光学测定技术在美、英两国研究人员在高通量筛选检测中,努力进行了光学测定方法的研究,建立了大量的非同位素标记测定法,如用分光光度检测法筛选蛋白酪氨酸激酶抑制剂、组织纤溶酶原激活剂等,均获得成功。 放射性检测技术美国学者GanieSM在高通量药物筛选研究中,应用放射性测定法,特别是亲和闪烁
药物研发早期阶段EarlyToxTM心肌毒性检测试剂盒...(三)
与钙染料比较多种钙离子指示染料以及其各自在细胞跳动、平均峰值振幅以及峰值频率等方面的作用进行了4小时长时间的实验比较。这些染料包括EarlyTox心急毒性染料, FLIPR. Calcium 5 试剂盒 (Molecular Devices)和Fluo-4 Direct 试剂盒(Invitr
高通量筛选的FLIPR荧光检测法介绍
近年来,光学测定技术在美、英两国研究人员在高通量筛选检测中,努力进行了光学测定方法的研究,建立了大量的非同位素标记测定法,如用分光光度检测法筛选蛋白酪氨酸激酶抑制剂、组织纤溶酶原激活剂等,均获得成功。 放射性检测技术美国学者GanieSM在高通量药物筛选研究中,应用放射性测定法,特别是亲和闪烁
应用FLIPR-钾离子通道检测试剂盒对hERG通道阻断...(一)
应用FLIPR 钾离子通道检测试剂盒对hERG通道阻断剂特性的分析简介药物诱导的hERG (human ether-a go-go-related gene) 离子通道被阻断可能导致严重的致死性室性心律失常——尖端扭转型室性心动过速(torsade de pointes, TdP)。近年来,一批
基于单片机系统的竹筒端面检测系统的研发与应用(二)
引言上次小编介绍了基于工控机的竹筒端面检测系统,本文小编主要介绍一下基于单片机系统的竹筒端面检测系统的研发与应用。基于单片机的竹筒端面检测系统同样为自动化的检测系统,可检测竹筒的外径、内径、厚度、检测数量等。1、单片机单片机(Microcontrollers)是一种集成电路芯片,是采用超大规模集成电
胞浆钙振荡发生机制
胞浆钙振荡发生机制(calcium oscillations):体内所有细胞受到生理性刺激后,所产生的最早的反应之一是胞浆中钙离子浓度的升高。钙离子浓度的升高在单个细胞水平是以振荡的形式出现的,即钙离子浓度随着时间的变化出现很规则的钙峰。钙振荡的出现使得胞浆钙离子浓度可以同时进行两种方式的调制,即振
激光雨滴谱系统的应用(二)
高速公路监测工厂污染监测 南极气候监测 机场应用 移动气象观测车二、 原理:应用激光原理对高速运动物体进行测定。可测定运动物体的总量,大小,强度,和运动速度。它的优越性能尤其表现在对微小物体的测定,测定对象最小直径达到0.16mm。三、 特点:◎坚固、紧凑、轻巧◎几乎无需保养 ◎容易安
胞浆钙振荡的发生机制
胞浆钙离子震荡是细胞内最突出的信号。钙离子充当细胞内调节的第二信使。钙离子波等共同称作第二信使信。所谓钙振荡是指胞质内钙离子以浓度振荡的方式转导多种调控信息,影响细胞分化、成熟和凋亡等各种过程。胞浆钙振荡发生机制(calcium oscillations):体内所有细胞受到生理性刺激后,所产生的最早
利用光遗传方法在FLIPRT-ETRA系统上对Cav1.3通道的研究—1
介绍Cav1.3是一种L型电压门控钙通道,是药物发现的重要治疗靶点。有研究表明,一些药物对Cav1.3通道产生了状态依赖性的效应1,这意味着这些药物的效应随着膜电位的变化(Vm)以及随之而来的通道状态的改变(开放、关闭、失活)而发生变化。由于这可能为病理上过度激活的Cav1.3通道提供了高度期望的选
xCELLigence系统实时检测神经毒性(二)
1.5 荧光与光学显微镜 在PEI包被 IbiTreat µ-Slide 8-孔反应板(德国Munich,Ibidi) 上培养皮质神经元细胞,培养 6 天。然后,将培养细胞固定于 +4°C 磷酸缓冲液(PBS)(pH 7.4) 多聚甲醛中。使用 0.2% Triton X-100/PBS
2010年生命科学领域十大创新产品公布
《科学家》网站日前评选出了2010年度生命科学领域的十大创新产品。美国西北大学分子化学家Neil Kelleher、普林斯顿大学基因组研究学者Amy Caudy、西北太平洋国家实验室生物学家H. Steven Wiley以及454 Life Sciences的创始人Jonatha
ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(二)
ClonePix2系统成像和挑取表达GPCR(M1)的细胞克隆 ClonePix2 成像和挑取阳性(CHO-M1)和阴性(CHO-K1)细胞。明场成像识别每个克隆的位置和形态,荧光成像识别高表达的M1。对PE标记的抗体,使用Cy5通道曝光6,000ms。 无论是直接标记方法还是双抗体方法,根据C
新生大鼠心肌细胞原代培养实验(二)
3. 用第二套手术器械进行下列操作。用眼科直镊和眼科弯剪把培养皿中的心脏周边的血凝块及纤维组织剔除掉,放在另一个预先装好D-Hank's液的培养皿中,把心脏组织再洗一遍后,将心脏组织放在另外一个培养皿中(或者其它合适容器中,视个人习惯),加少许 0.06%胰酶,用眼科弯剪将心脏
GPCRs药物研发和筛选Molecular-Devices-FLIPR
导言:如何加速药物研发进程?何种利器可解决药物开发的瓶颈?如何在宝贵而丰富的天然药物资源中开发出现代化新药?单抗、疫苗、重组蛋白等大分子药物爆发式增长,您期待最快速开发出新药从而占据一席之地吗? Molecular Devices公司针对药物开发过程中的最关键步骤提供了完整的解决方案。药物筛选,
应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性(二)
方法细胞接种和转染HEK293细胞(80%融合度)用胰酶消化后分到96孔白板中,每孔15,000细胞。当细胞超过50% 融合度时,用NF- κB-RE 萤火虫荧光素酶和海肾对照组质粒对细胞进行共转染,其中使用三种不同比例FuGENE和DNA组合方式,转然后,细胞置于37°C培养箱中培养24h。
ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(一)
ClonePixTM 2系统提供了一种全新、快速评估哺乳细胞系GPCR靶蛋白表达水平的方法 1. 用哺乳表达系统快速评估GPCR靶蛋白的內源表达水平 2. 增加发现最优细胞反应器的可能性 3. 减少细胞系/抗体开发的时间—避免有限稀释法 背景 哺乳细胞GPCRs的内源表达通常是非常低
心肌细胞流式检测AV/PI个人经验
原代培养细胞,关键是消化,我一般酶液是新配的,要足量啊(又一次还剩三排的时候,一同学把酶液碰到水浴锅,害的我借得酶液,耽误了时间,而且组间数据紊乱,最后浪费细胞和染料,大家要注意保护好酶液啊),这样每次心理都有底,而且放入水浴37度30min,甚至扔到培养箱(不建议采用)升温。消化前,用温PBS轻洗
农业小环境检测系统使用说明(二)
4、 查看记录――选择后进入查看选项选择界面如图2-8,标记“√”需要删除,标记“◆”为当前选项。查看(√查看)● 温 度 ● 湿 度 √● 露点温度 图2-8 查看选项选择界面记录: 温 度N1 C1285数据:2.9单位:℃图2-9查看记录界面 ――操
超导-Bolometer-太赫兹检测系统应用范围
应用范围:射电天文观测 电子回旋加速喷射和干涉测量太赫兹光谱学 太赫兹成像(安检)拟域显微镜学 激光辐射探测全天候导航系统
利用光遗传方法在FLIPRT-ETRA系统上对Cav1.3通道的研究—2
结果通过ChR2调控Vm通过用FLIPR膜电位染料孵育ChR2转染的HEK-293细胞,验证了光激活ChR2对膜电位的调控。由FLIPRTETRA系统LED发出的蓝光脉冲导致膜去极化,而FLIPR膜电位染料的信号增加了3倍(图3a)。随着时间的推移,膜电位信号的记录显示,当细胞膜重新极化时,从最初的
心肌细胞可制成生物活性二极管
美国诺特丹大学官网2月14日发布公告称,该校研究人员用心肌细胞和心脏成纤维细胞研制出一种生物活性二极管,开创了一种制造细胞电路的全新自组装方法。这项发表在《先进生物系统》杂志上的最新研究,向模拟人体生物系统相互作用和信息处理方式迈出了重要一步,有助于开发新型生物机器人以及为肌肉退行性疾病和心律失
浅谈荧光在酶标仪上的应用以及新一代酶标检测系统...二
荧光蛋白报告基因分析 近几年在生命科学研究中,GFP(一种水母中提取的绿色荧光蛋白)作为一种报告基因以其自身的许多优点越来越受到大家重视,首先GFP无毒,自身在不需要辅酶作用下可以发光,且荧光信号稳定。我们可以用目的基因与GFP基因融合,转染细胞进行表达,通过荧光信号强弱来确定其表达量的高低。 时间
二硫化碳检测仪主机系统说明
二硫化碳检测仪适用于各种工业环境和特殊环境中的二硫化碳浓度连续在线检测,二硫化碳检测仪采用进口电化学传感器和微控制器技术,具有信号稳定,精度高、重复性好等优点,防爆接线方式适用于各种危险场所。二硫化碳检测仪兼容各种控制报警器、PLC、DCS等控制系统,可以实现远程监视,远程控制,远程报警,计算机
实时荧光定量PCR检测系统的应用范围
PCR检测灵敏度高,检测线性范围宽,检测精度和重复性好等突出优势,因此被公认为世界用于临床及科研的最先进核酸分子诊断技术,被美国FDA承认并推崇。检测项目包括:食物等病原菌以及疾病病毒等病原体如:乙肝病毒HBV DNA,丙肝病毒HCV RNA,艾滋病病毒HⅣ RNA,沙眼衣原体CT,淋病双球菌N
用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基...(一)
用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基于细胞实验的表型分析简介当需要持续获得高质量、高精确的数据时,那么迫切需要一台全自动基于细胞检测实验的多参数分析系统。一台紧凑的,全自动微孔板图像分析系统可用于多参数实验,如利用诱导多功能干细胞 (iPSC) 分化为心肌细胞,神经细胞和肝细胞研究中。
消化系统药理实验中的选择与应用(二)
慢性胃溃疡的实验模型常选用大白鼠。可用热烙法或醋酸浸溃造成胃壁损伤形成溃疡。热烙法是在无菌剖腹后,以3mm粗的15W电烙铁加热至45℃左右,灼烙腺胃约5秒种后粘膜出现水肿,6小时后有明显出血。醋酸浸溃法可用10%或20%醋酸溶液0.05ml,用0.01ml刻度的结核菌素注射器利用26号皮内针头作