用线性连续蔗糖梯度快速分离原核细胞的核糖体亚基
大肠杆菌（E. coli ）的核糖体（70S，M＝380万）由50S （M＝180万） 大亚单位及30S小亚单位 （M＝90万）组成，用简单的直线型5—25％蔗糖梯度（在缓冲液中调制）。合适的缓冲液（0.2mM 醋酸镁，10mM Tris—HCL 及60mM 氯化铵）有利于稳定70S核糖体并有利于50S及30S 亚基的分离设备：各型超速离心机（以日立CP—MX为例）但加/减速速率档次必须在5/5以上，日立STF2封管器，取出梯度用日立DGF—U与带流动他的分光光度计配套，自动分部收集器等）转头：各种垂直管，角式及水平转头均可完成此实验，本文以日立P65VT2 垂直管转头（65000rpm，416000xg，16×5ml）和PS65T水平转头 （65000rpm，419000xg， ......阅读全文
用线性连续蔗糖梯度快速分离原核细胞的核糖体亚基
大肠杆菌（E. coli ）的核糖体（70S，M＝380万）由50S （M＝180万） 大亚单位及30S小亚单位 （M＝90万）组成，用简单的直线型5—25％蔗糖梯度（在缓冲液中调制）。合适的缓冲液（0.2mM 醋酸镁，10mM Tris—HCL 及60mM 氯化铵）有利于稳定70S核糖体
用高速固定角转头不连续蔗糖梯度分离细胞器
在例（十）中已介绍了用日立CR22G/21G离心机R18A转头，日立50ml锥底组织培养管分离质膜的方法。下面介绍用一般的圆底离心管（瓶），不连续（阶梯）蔗糖梯度，在高速离心机上分离质膜、内质网、溶酶体、线粒体、过氧化酶体的方法。设备：●主机Hitachi，CR21GⅡ（或21G）高速冷冻离心机●转
核糖体的离心分离
1)概述生物体细胞中除极少数细胞（如精子细胞）外，几乎所有细胞都含有核糖体（ribosome）。核糖体或成群或单个地分布在胞质中或附着在某些膜上（如内质网膜）。电镜观察到核糖体是没有包膜的电子致密颗粒，呈圆或椭圆形，平均直径200A，哺乳动物的真核细胞中核糖体沉降系数为80S，分子量为500万。在原
核糖体的离心分离技术
1)概述生物体细胞中除极少数细胞（如精子细胞）外，几乎所有细胞都含有核糖体（ribosome）。核糖体或成群或单个地分布在胞质中或附着在某些膜上（如内质网膜）。电镜观察到核糖体是没有包膜的电子致密颗粒，呈圆或椭圆形，平均直径200A，哺乳动物的真核细胞中核糖体沉降系数为80S，分子量为500万。在原
细菌细胞的制备实验实验_将核糖体解离为大亚基/小亚基
实验材料核糖体试剂、试剂盒解离缓冲液贮存缓冲液实验步骤1. 通过将核糖体样品对解离缓冲液透析并用 7%~30% 的线性蔗糖梯度离心来将真细菌 70S 核糖体分离为 30S 和 50S 亚基。解离缓冲液：10 mmol/L Tris-HCl，pH 7.51 mmol/L MgOAc100 mmol/L
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
核糖体亚基的概念
核糖体（ribosome）内有大、小两个亚基（subunit）组成。由于沉降系数不同，核糖体又分为70S型和80S型两种。70S型核糖体主要存在于原核细胞的细胞质基质中，其小亚基单位为30S，大亚基单位为50S。80S型核糖体主要存在于真核细胞质中，其小亚基单位为40S，大亚基单位为60S。
染色体分离实验——蔗糖梯度纯化法
实验材料染色质粗品试剂、试剂盒蔗糖分离缓冲液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品溶液轻轻
细菌细胞的制备实验实验——70S核糖体的纯化
实验材料核糖体试剂、试剂盒致密偶联缓冲液仪器、耗材Beckman Vti50 转头实验步骤1. 采用 Beckman Vti50 转头和 7% 至 30% (w/v) 的线性蔗糖梯度沉降来纯化 70S 真细菌的核糖体。这一步可以确保大的蛋白质聚集物不会与 70S 核糖体一起沉淀下来。并可以产生致密偶
用Percoll不连续密度梯度法分离小鼠精原细胞的方法介绍
目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布于位于27
用Percoll不连续密度梯度法分离小鼠精原细胞的方法详解
精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究，精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用，都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化，以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞，用于体外培养。资料表明，从成年啮齿类的睾丸分离粗线期及其后
不连续Nycodenz梯度溶液中原代细胞溶酶体的分离
试剂和器材： 1.匀浆介质：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2.NycoprepTM Universal；3.磷酸缓冲液pH7.4（50mmol/L）4.NycoprepTM Universal稀释剂：6mmol/L乙二胺四
不连续Nycodenz梯度溶液中原代细胞溶酶体的分离
不连续Nycodenz梯度溶液中原代细胞溶酶体的分离试剂和器材：1.匀浆介质：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2.NycoprepTM Universal；3.磷酸缓冲液pH7.4（50mmol/L）4.NycoprepTM
蔗糖梯度为何界面模糊
蔗糖每降低一个浓度梯度,其数量及就降低一个,即低浓度是其相邻的高浓度的1/10,而当这个浓度梯度小数小到一定程度时,就大约相等了,因而一会后界面就会变得模糊了.
蔗糖梯度纯化法实验
实验材料：染色质粗品试剂、试剂盒：聚碳酸酯离心管仪器、耗材：Dounce 匀浆器实验步骤：准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品
梯度离心时为什么会形成蔗糖梯度？
蔗糖溶液在超速离心的状态下，会形成一个连续的梯度。虽然它是溶液，但溶质毕竟是有重量的。你在生活中仔细观察的话，把墨水超速离心，也能看到一个连续的浓淡梯度，原理是差不多的。分子量越大，形成浓度梯度的离心转速就较小一些。除了蔗糖以外，还有氯化铯的浓度梯度，这些都是为了分离不同分子量的物质所存在的。
连续梯度的概念
中文名称连续梯度英文名称continuous gradient定 义在层析、电泳或离心中，由于各组分分离的需要，可将介质或凝胶按密度、成分浓度或pH等制备成连续变化的梯度。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
助力病毒纯化研究——ATAGO折光仪
生物工程是一门新型的跨学科技术，它涉及范围十分广泛，科学家通常把基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程，看成是构成生物工程的4大生物技术。 基因工程主要指基因重组技术。它是根据生物遗传规律，使用类似工程设计的方法，在体外利用限制性内切酶把来自不同生物的遗传基因进行“拼接”，使之重新组合。然后通过基因转
用－BioRad－385－Gradient－F－ormer灌制线性梯度凝胶实验
实验方法原理丙烯酰胺浓度逐渐增加(凝胶孔径线性减小）的线性梯度凝胶有着更多的优点。首先，线性梯度凝胶可以分离更大分子量范围的蛋白质。其次，它还能将分子量非常相近的蛋白质分离开。最常用于梯度胶的丙烯酰胺浓度是4 % 〜20 % ，但具体采用哪一范围的丙烯酰胺浓度还是取决于被分离的蛋白质的大小（见表2.
用－BioRad－385－Gradient－F－ormer灌制线性梯度凝胶实验
基本方案 实验方法原理 丙烯酰胺浓度逐渐增加(凝胶孔径线性减小）的线性梯度凝胶有着更多的优点。首先，线性梯度凝胶可以分离更大分子量范围的蛋白质。其次，它还能将
用－BioRad－385－Gradient－F－ormer灌制线性梯度凝胶实验
实验方法原理 丙烯酰胺浓度逐渐增加(凝胶孔径线性减小）的线性梯度凝胶有着更多的优点。首先，线性梯度凝胶可以分离更大分子量范围的蛋白质。其次，它还能将分子量非常相近的蛋白质分离开。最常用于梯度胶的丙烯酰胺浓度是4 % 〜20 % ，但具体采用哪一范围的丙烯酰胺浓度还是取决于被分离的蛋白质的大小（见
用Nycodenz○R不连续梯度溶液纯化酵母线粒体
试剂和器材： 1. 酵母原生质体制备于山梨醇缓冲液中；2. NycoprepTM Universal（600g/L Nycodenz）；3. Nycodenz○R工作溶液：500g/L Nycodenz；4. 山梨醇缓冲液：0.6mol/L山梨醇、20mmol/L Mes-KOH，pH6.0；5.
速率区带离心法－|你的分离纯化方法选对了吗？
密度梯度离心（isodensity centrifugation method）又称为区带离心。该方法的优点是可以同时使样品中几种或全部组分分离，具有良好的分辨率，分离效果好，可一次获得较纯组分。缺点是离心时间较长，需制备梯度液，操作要求高。按照离心分离原理，密度梯度离心又可分为速率区带离心法（ra
细菌细胞的制备实验实验——核糖体及多核糖体的分离
实验材料细胞试剂、试剂盒蔗糖溶液高盐蔗糖铺垫液蔗糖铺垫缓冲液重悬缓冲液实验步骤1. 为从剩余的细胞组分中分离核糖体，将不含细胞碎片的粗制裂解液以 1：1 的比例铺到 1.1 mol/L 的蔗糖溶液之上。于 4℃ 在Beckinan 50.2 Ti 恒定角度转头中离心，这一过程包括长时间的离心以使 7
密度梯度离心基础知识（二）
（2）各种转头用于等密度离心的优缺点分析： A、固定角式转头：主要用于差分离心的角式转头，在超速离心机上可以很好地用于等密度离心，尤其是 DNA平衡等密度离心，自形成梯度，用快速密封管或厚壁管，常用的单管的容量为 10~40ml。常用转速 40,000~80,000rpm，离心时间较短，分离
关于颗粒状细胞器—核糖体的基本信息介绍
核糖体（Ribosome），旧称“核糖核蛋白体”或“核蛋白体”，普遍被认为是细胞中的一种细胞器，除哺乳动物成熟的红细胞，植物筛管细胞外，细胞中都有核糖体存在。一般而言，原核细胞只有一种核糖体，而真核细胞具有两种核糖体（其中线粒体中的核糖体与细胞质核糖体不相同）。 核糖体的结构和其它细胞器有显著
植物细胞器核糖体的功能
核糖体，旧称“核糖核蛋白体”或“核蛋白体”，普遍被认为是细胞中的一种细胞器，除哺乳动物成熟的红细胞，植物筛管细胞外，细胞中都有核糖体存在。一般而言，原核细胞只有一种核糖体，而真核细胞具有两种核糖体（其中线粒体中的核糖体与细胞质核糖体不相同）。 核糖体的结构和其它细胞器有显著差异：没有膜包被、由
核糖体的简介
核糖体（Ribosome），旧称“核糖核蛋白体”或“核蛋白体”[1]，普遍被认为是细胞中的一种细胞器。 除哺乳动物成熟的红细胞，植物筛管细胞外，细胞中都有核糖体存在。一般而言，原核细胞只有一种核糖体，而真核细胞具有两种核糖体（其中线粒体中的核糖体与细胞质核糖体不相同）。 需要指出的是，因为核
核糖体的介绍
核糖体（Ribosome），旧称“核糖核蛋白体”或“核蛋白体”[1]，普遍被认为是细胞中的一种细胞器。 除哺乳动物成熟的红细胞，植物筛管细胞外，细胞中都有核糖体存在。一般而言，原核细胞只有一种核糖体，而真核细胞具有两种核糖体（其中线粒体中的核糖体与细胞质核糖体不相同）。 需要指出的是，因为核
什么是核糖体？
核糖体（Ribosome），旧称“核糖核蛋白体”或“核蛋白体”[1]，普遍被认为是细胞中的一种细胞器。 除哺乳动物成熟的红细胞，植物筛管细胞外，细胞中都有核糖体存在。一般而言，原核细胞只有一种核糖体，而真核细胞具有两种核糖体（其中线粒体中的核糖体与细胞质核糖体不相同）。 需要指出的是，因为核