YPD培养基
将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。......阅读全文
常用培养基
LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1
酿酒酵母的生长及其DNA的制备
实验方法原理 用这一方法制备的 DNA 适用于琼脂糖凝胶电泳、Southern 印迹、亚克隆、基因组文库构建、PCR 或其他不需要完整的高分子质量 DNA 的方法。实验材料 YAC 克隆的酵母菌落试剂、试剂盒 醋酸铵乙醇酚氯仿TETriton SDS 溶液仪器、耗材 YPD 培养基Sorvall
酿酒酵母的生长及其DNA的制备
实验方法原理 用这一方法制备的 DNA 适用于琼脂糖凝胶电泳、Southern 印迹、亚克隆、基因组文库构建、PCR 或其他不需要完整的高分子质量 DNA 的方法。 实验材料
毕赤酵母表达（pichia－pastoris－expression－）实验手册（4）
三．主要试验环节的操作3.1 酵母菌株的分离纯化接种GS115于5ml YPD液体培养基，30℃，200rpm振荡过夜，涂布 YPD平板，30℃培养48 小时，用 YNB基本培养基和含His的补充培养基作点种分离纯化，挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板，4℃保存。3.
常用培养基配置的配方
LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1m
酵母菌细胞的诱变实验——甲乙硫醚诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材试管摇床离心机平板实验步骤1. 将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基，于30℃继续培养。检查细胞密度，记录并调整到2×108细胞/ml。2. 转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5~10
酵母菌细胞的诱变实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材 试管摇床离心机平板实验步骤 1. 将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基，于30℃继续培养。检查细胞密度，记录并调整到2×108细胞/ml。2. 转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5
酿酒酵母的生长及其DNA的制备
用这一方法制备的 DNA 适用于琼脂糖凝胶电泳、Southern 印迹、亚克隆、基因组文库构建、PCR 或其他不需要完整的高分子质量 DNA 的方法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理用这一方法制备的 DNA 适用于琼脂糖凝胶电泳、Southern 印迹、亚克隆、基因组文库
菌株的构建和四分体孢子分析—在液体培养基中形成孢子
试剂、试剂盒培养基实验步骤1）在合适的培养容器中，加入YPD培养基培养，待形成孢子的二倍体细胞生长至 OD600为 2.5〜3.0 (约为 8×107 细胞/mL)。2)转移1 mL培养液至一支无菌15 mL聚丙烯试管中，1200 g离心5 min。3)倒去上清，用5 mL无菌水重悬细胞，涡旋振荡使
酵母表达外源蛋白（foreign－protein）（1）
1、 菌株用GS115表达不出蛋白，换KM71H后，大部分克隆能表达。2、温度： 在28度和室温下诱导表达，表达水平可能都不低。3、pH手册上用6.0，pH提高到6.8，不表达的蛋白可能就表达出来。BMMY的pH7.0-7.5比较合适。国内外做的最好的rHSA，最适pH大概 5-6左右。pH3的时候
菌株的构建和四分体孢子的分析—二倍体细胞的孢子形成
一种新的酵母菌株的构建方案分为几个不同的步骤：①二倍体的构建，在这里两个单倍体进行交配；②孢子形成，在这里二倍体细胞被诱导形成孢子；③四分体孢子的制备，在这里囊壁被从四分体孢子上除去；④四分体孢子的分离，在这里来自一个单独的四分体 抱子的四个单倍体抱子中的每一个都被明确地安置在一块平板上，并继续生长
毕赤酵母活化不出来是什么原因
活化不出来具体是什么意思，长的不好，还是根本就不长？一般情况下，活化的培养基通常是YPD，筛选或诱导表达时才用BMG的？另外你的菌种是野生菌还是工程菌，BMG里有否添加抗生素？如果有抗生素的话，很可能是质粒丢失了。那还要看是什么保存方法啊？如果你指的是短期保藏，两者都可以，如果是长期保藏，最好是不要
酵母功能互补实验
实验概要本实验将在构建了大蒜重金属抗性基因表达载体并转入大肠杆菌DH5α的基础上，选择鉴定准确的质粒转化酵母细胞，对转化子进行了PCR鉴定和RT-PCR分析，及重金属抗性实验。主要试剂YPD培养基，醋酸锂，PEG(50%)，乙醇，少量酵母菌总RNA快速抽提试剂盒主要设备摇床，离心机，水浴锅，PCR仪
酵母细胞中质粒的加工实验——从酵母细胞中分离质粒
利用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1，它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。它使酵母可以很正常地在30°C生长，而不能在37°C形成菌落。如果用一个酵母菌基因组文库转化cdc101-1菌株，通过分离温度不敏感菌落，那么就可能分离到一个可以互补这种突
技术和方案25－测定铺板效率
实验步骤菌株的铺板效率是以培养基中可形成菌落的活力细胞的百分比衡量的（有时也称为克隆形成单位或 cfu)。测定铺板效率有以下两种简便的方法。间接法1.测定培养物中的细胞密度，用 Coulter 计数仪测定培养物光密度或用血球计数板统计细胞个数。2.确定要将细胞稀释至 103 个/ml 所需要的稀释系
酵母菌细胞的诱变实验——紫外光诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD刀豆氨酸仪器、耗材紫外光杀菌灯紫外光放射量测定器实验步骤1. 将过夜培养的酵母菌培养液接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养。离心5~10 s，用1 ml 无菌水重悬沉淀细胞，重复洗涤1次，再用1 ml 无菌水重悬。 2. 检查细胞密度，记录数据后将细胞密度调
毕赤酵母表达（pichia－pastoris－expression－）实验手册（3）
液体YPD培养基可常温保存；琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。加入Zeocin 100ug / ml，成为YPDZ培养基，可以4℃条件下保存1～2周。2.4 YPDS + Zeocin 培养基（Yeast Extract Peptone Dextrose Medium）：yeast extract
快速制备酵母DNA法
实验概要本实验制备了酵母转化质粒，快速从转化酵母菌中分离了用于Southern分析的基因组DNA。主要试剂2％ Triton X－100，1％SDS，100mmol/L NaCl，10mmol/L Tris-HCl(pH8)，1mmol/L Na2EDTA，苯酚：氯仿：已戊醇（25：24：1），YP
液体培养基—石蕊牛乳培养基
[用途]观察细菌对牛乳的凝固及发酵作用。[配法]新鲜脱脂牛乳1L，20g/L石蕊水溶液10ml(16g/L溴甲酚紫乙醇溶液 1ml)（pH6.8）。将新鲜牛乳隔水煮沸30min，冷却后置4℃冰箱内过夜。用吸管吸出下层乳汁，注入另一烧瓶内，弃去上层乳脂。加入石蕊溶液，分装试管，灭菌113℃15min（
lb培养基是什么培养基？
培养基（Medium）是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。那么LB培养基是什么培养基？LB一般被解释为Luria-Bertani，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语lysogeny broth，即溶菌肉汤。LB
酵母感受态细胞制备实验——试剂盒制备法
实验方法原理酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD培养基酵母化学感受态细胞制备试剂盒仪器、耗材离心管冰箱冷冻管保温冰盒实验步骤一、挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落（4℃放置不超过3周的也可以），接
酵母细胞中质粒的加工实验_穿梭质粒
实验材料带有一个非URA3选择标记YCp载体试剂、试剂盒缺失成分平板+Ura含有5-FOAYCp质粒选择性培养基的平板YPD平板YIP5载体仪器、耗材培养皿实验步骤1) 构建染色体上重要基因被破坏的单倍体菌株以及含有完整重要基因和URA3选择标 记的YEp或YCp质粒。2) 对于诱发突变，将重要基因
面包酵母的性能指标介绍
增殖率:即面包酵母在标准YPD培养基上培养一定时间后菌体量的变化，通常用A660的变化来表示。增殖率低的面包酵母不具有实用价值。产气量:影响面包的结构和疏松程度。延迟期；影响面团的发酵速度,延迟期长的面包酵母不具有实用价值。蔗糖酶活力:影响含糖面团的发酵速度。麦芽糖酶活力:影响无糖面团的发酵速度
45种培养基配方（细菌培养基与植物培养基）－（四）
28. Yeast Extract Peptone （酵母膏、蛋白胨琼脂） Yeast extract （酵母膏） 1g Multi-peptone（多蛋白胨） 2g Beef extract （牛肉膏） 1g Glucose （葡萄糖） 10g Agar （琼脂） 20g Distil
45种培养基配方（细菌培养基与植物培养基）－（一）
THE COMPOSITION OF MEDIA 培养基及成分 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g
146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基]（二）
22、Pine Block or Pine Sowdust Medium （松木条或松木屑培养基）（1）、Cut 1021 cm pine biocks and immerse them in 1-2% sucrose solution . Alow the biocks fully abs
45种培养基配方（细菌培养基与植物培养基）－（二）
10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml 11. Glu
45种培养基配方（细菌培养基与植物培养基）－（三）
19. Filter Paper Medium （滤纸培养基） （NH4）2SO4 1g KH2PO4 1g MgSO4.7H2O 0.7g NaCl 0.5g Distilled water （蒸馏水） 1000ml A strip of filter paper （滤纸条） 6ⅹ1
146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基]（六）
121、营养肉汤和葡萄糖培养基 (AS 100) 牛肉膏 10.0g 蛋白胨 10.0g 葡萄糖 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 15.0-20.0g 蒸馏水 1000ml pH 7.0122、(Trypticase Soya Agar) 胰蛋白胨 17.0g 大豆胨 3.0g 葡萄糖 2.5
146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基]（一）
培养基及成分 1、Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to