实验方法原理酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品。实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD培养基酵母化学感受态细胞制备试剂盒仪器、耗材离心管冰箱冷冻管保温冰盒实验步骤一、挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以),接种到装在50 mL 离心管中的10 mL的自备的YPD培养基中。 二、30℃摇晃培养,摇床速度250 rpm/分钟,直到OD600达到0.6-1.0(相当于0.6-1x107细胞/mL)。 三、室温3 000 rpm离心5 min,弃上清得酵母细胞沉淀。 四、新鲜制备适量的酵母感受态制备工作液。对10 mL酵母需要5.25 mL的工作液,其配制方法是:将4.75 mL制备液A、0.25 mL制备液B和0.25 mL制备液C加入到一个无菌的离心管中后充分震荡混匀即可。酵母感受态制备工作液可放室温待用。&nb......阅读全文
农杆菌感受态细胞制备实验农杆菌感受态细胞制备可以:(1)用于建立农杆菌转化体系;(2)用于农杆菌表达系统构建;(3)用于农杆菌其他分子生物学研究。实验方法氯化钙法电转农杆菌感受态实验方法原理在基因工程操作中,感受态细胞的制备和质粒的转化是一项基本技术。感受态是细菌细胞具有的能够接受外源DNA的一种特
实验材料 载体和酵母菌 试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 SD
实验方法原理 酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致报道基因的转录,可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与 RNA 的相互作用。试剂、试剂盒 YPD 和 SD 培养基鲑
酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致报道基因的转录,可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与 RNA 的相互作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方
氯化钙法 电转农杆菌感受态 实验方法原理 在基因工程操作中,感受态细胞的制备和质粒的转化
酵母感受态细胞制备可以:(1)用于建立酵母转化体系;(2)用于酵母表达系统构建;(3)用于酵母其他分子生物学研究。实验方法实验材料酿酒酵母 试剂、试剂盒YPDA液体培养基 蒸馏水 甘油 二甲基亚砜 仪器、耗材培养皿 离心机 离心管 冰箱 实验步骤一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌
独体—基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟 Akiko Koide and Shohei Koide  
化学法 试剂盒制备法 实验方法原理 感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种
实验材料pAS38pAS45pAS47试剂、试剂盒聚乙二醇(PEG) 氯化钠溶液HEPES 缓冲液涂布溶液Tris 缓冲盐水TBS-Tween-20琼脂糖-磷酸溶液仪器、耗材LBSOCYT实验步骤3.1 实物库构建我们用 Kunkel 突变技术构建大多数的实物库虽然我们证明了 AB 链套
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
一、RNA 制备 模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人
实验概要本实验制备了电感受态大肠杆菌TGl细胞。主要试剂1. 基本培养琼脂板[10.5g K2HPO4、4.5gKH2PO4、1g(NH4)2SO4、0.5g Na3C6H5O72H2O、15g琼脂加水至1L。高压灭菌,冷却至锥形瓶微温;接着加入lml lmol/L MgSO4、0.5ml 1%维生
实验材料 大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3 COS-7 细胞 载体 pBluescriptⅡ
实验材料 大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3COS-7 细胞载体 pBluescriptⅡ大肠杆菌 DH5α试剂、试剂盒 pSPL3 多克隆位点图谱限制性内切核酸酶PvuⅡT4DNA 连接酶LB 琼脂平板黏粒载体TESOC 培养基琼脂糖凝胶LB 肉汤培养基PBS胰酶-EDTA 溶液D
本方案以哺乳动物穿梭载体 pSPL3 为例,描述了外显子扩增的方法,内容分为以下五个阶段。阶段 1: 文库的构建; 阶段 2: 电穿孔法将文库转染 COS-7 细胞; 阶段 3:mRNA 的提取; 阶段 4: 反转录 PCR; 阶段 5: 克隆分析。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:
【实验原理】1.DNA重组技术重组DNA(Recombinant DNA)技术是遗传工程的核心技术,也是人类在基因和DNA分子水平进行操作的技术。它包括以下几个步骤: 1)重组DNA分子的构建:即将目的基因(DNA或cDNA片段)与载体DNA重组,应用TA克隆方法,将PCR扩增产物快速克隆至质粒
枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可以:(1)用于建立枯草芽孢杆菌转化体系;(2)用于其基因改造;(3)用于提高枯草芽孢杆菌生产性能相关研究。实验方法化学法化学改进法实验材料枯草芽孢杆菌168 试剂、试剂盒SPI 培养基 EGTA SPII 培养基 柠檬酸钠 EGTA 氢氧化钠 KH2PO4 K2HPO4
PCR扩增产物的克隆可以:(1)获得目的DNA片段;(2)用于原核表达的研究;(3)广泛应用于分子生物学相关研究。实验方法原理平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头;PCR产物纯化后,可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min(利用