FISH检测乳腺癌中HER2扩增实验

试剂、试剂盒 胃蛋白酶中性福尔马林缓冲液甲酰胺乙醇仪器、耗材 探针试剂盒荧光显微镜实验步骤 一、切片及制片1.从福尔马林固定石蜡包埋的组织块上切厚组织切片,37°C 水浴展片。2.贴在正含电荷的载玻片上。3.另连续切一张相应的组织切片,用苏木素和伊红(H&E) 染色(见注释 2)0二、脱蜡和浸透组织切片1.在 HE 切片上确认适当的肿瘤细胞位置(见注释 3)。2.检查切片组织的成分及固定质量(见注释 4)。3.烤箱或烤片器中烤片 60°C、2 h(见注释 5)。4.将切片放入切片架,二甲苯 3 缸,每缸 5 min,去除石蜡。过 3 遍无水乙醇(见注释 6)。5.用烤片器或电热板 45°C、3 min 干片。6.将切片放入室温下 50 mL0.2mol/LHCl 中 20 min。7.50 ml 蒸馏水洗片 lmin,2XSSC 洗 2 次,每次 3 min。8.放入 81°C 的 lmol/LNaSCN 中,30 mi......阅读全文

ISPCR扩增的产物的杂交和检测实验

实验材料 探针试剂、试剂盒 SSCSDS显影液定影液苏木精PBSAEC封阻液NaClTris·Cl二甲基甲酰胺BCIPNBT乙醇仪器、耗材 培养箱盖玻片载玻片干燥剂加湿盒实验步骤 1.  配如下杂交混合液 (1)2 μl 200 pmol/l 探针(终浓度4 pmol/l) (2)50 μl 去离子

ISPCR扩增的产物的杂交和检测实验

聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction)(又称:多聚酶链式反应),聚合酶链式反应,是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便

基因扩增实验室检测项目及意义

owtext .5pt" width=221>尖锐湿疣同上渗漏出液,破溃组织单纯疱疹病毒DNA感染 (HSV)疱疹感染,优生优育全血,分泌物,脑脊液  项目临床意义标本种类 EB病毒DNA定量检测(EB) 鼻咽癌早期筛查,恶性淋巴瘤传染性核细胞增多症 血清,鼻咽拭子 肺炎 支原

Puma靶向药物Nerlynx获美国FDA批准

  Puma Biotechnology是一家专注于开发和商业化创新产品以加强癌症护理的生物制药公司。近日,该公司宣布,美国食品和药物管理局(FDA)已批准一份补充新药申请(sNDA):将靶向抗癌药Nerlynx(neratinib)联合卡培他滨(capecitabine),用于既往已接受2种或2种

复发/转移性乳腺癌标志物临床应用专家共识(一)

目前临床主要依据肿瘤的雌激素受体(ERα)、孕激素受体(PR)表达及人表皮生长因子受体2(HER2)扩增状态对乳腺癌进行分层管理,选择综合治疗方案。随着分子靶向和免疫药物在乳腺癌临床治疗中的应用,除了ERα、PR和HER-2外,乳腺癌相关基因1(BRCA1)/乳腺癌相关基因2(BRCA2)、PIK3

体外诊断IVD简单了解分子诊断之FISH技术(T15)

分子诊断的主要技术有核酸分子杂交(FISH)、聚合酶链反应(PCR)、基因检测技术和生物芯片技术(gene chip)。荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH):是一种应用非放射性荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示DNA序列位置

FISH-is-not-a-fish荧光原位杂交中手动阅片和自动阅片大比拼

  FISH是什么   FISH是什么?   是一条条欢快的鱼儿吗?   红色、绿色、蓝色、黄色的亮点   是鱼儿身上的五彩斑斓吗?   我们这期讲得FISH可不是彩色的鱼儿   Q   那么,FISH到底是什么呢?   FISH是荧光原位杂交(Fluorescence In S

FISH-is-not-a-fish荧光原位杂交中手动阅片和自动阅片大比拼

  FISH是什么?   是一条条欢快的鱼儿吗?   红色、绿色、蓝色、黄色的亮点   是鱼儿身上的五彩斑斓吗?   我们这期讲得FISH可不是彩色的鱼儿   Q   那么,FISH到底是什么呢?   FISH是荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridiza

核酸突变分析方法抉择:PCR、杂交、NGS?

日前,以“精细管理、精准医疗”为主题的2016届CSCO学术年会在厦门落下帷幕,精准检测作为临床实践中实施精准医学的第一步,成为本届CSCO学术年会的热点话题。来自不同企业的分子诊断技术百花齐放百家争鸣,面对新技术与成熟技术的较量,在“精准医学”时代下,如何选择合适的检测技术,实现精准治疗成为新医学

外泌体LncRNA帮助免疫细胞“叛变”——乳腺癌恶化新机制-2

5.肿瘤缺氧微环境中乳酸在TAM中上调LncRNA通过生信软件预测LncRNA HISLA基因启动子区域与转录因子PU.1有典型结合位点。接着,借助ChIP qPCR实验证实两者是直接结合的。作者又发现LncRNA HISLA在TAM中的表达量远高于其他巨噬细胞MDM,已有研究表明MDM“策

Puma靶向药物Nerlynx治疗HER2阳性乳腺癌III期临床优异

  Puma生物技术公司近日公布了靶向抗癌药PB272(neratinib)治疗HER2阳性乳腺癌III期临床研究NALA的积极顶线数据。  该研究在既往接受2种或多种HER2靶向药物治疗失败(3线疾病)的HER2阳性转移性乳腺癌患者中开展,将neratinib+卡培他滨组合方案与Tykerb(la

德曲妥珠单抗可降低HER2阳性乳腺癌死亡风险

乳腺癌是最常见的癌症,2020年全球确诊乳腺癌病例超过200万,导致近68.5万人死亡。大约五分之一的乳腺癌患者被确诊为HER2阳性。HER2是一种酪氨酸激酶受体促生长蛋白,在多种肿瘤表面表达,包括乳腺癌、胃癌、肺癌和结直肠癌。 近日,2022年圣安东尼奥乳腺癌大会(SABCS)上公布了DEST

病例分析:MET抑制剂带来的惊喜结局,转移性食管癌2

3个月后随访PET-CT显示疾病进展,包括多个肝、肺和肾上腺转移,锁骨上淋巴结、双侧肺门、纵膈、后腹膜和盆腔淋巴结转移(图1D和1E)。由于患者对初始化疗和放疗拮抗,二线化疗作用有限,所以患者进行分子遗传学检查。肿瘤DNA的单核苷酸多态性(SNP)显示:PIK3CA存在突变(c.1624G→A[p.

数字PCR在肿瘤治疗的伴随诊断的应用

 常用体液来源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待检标本中的DNA,有正常脱落体细胞和病变脱落细胞两种来源,前者的量远大于后者。通过微液滴处理能在每个微液滴中有效减少正常体细胞DNA的干扰,实现肿瘤标记物的有效检测,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突变检测、乳腺癌/胃癌的HE

多重-PCR-扩增实验

            实验方法原理 多重PCR(multiplex PCR),其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定。重PCR的特点有:①高效性在同一PCR反应管内同时

多重-PCR-扩增实验

试剂、试剂盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物仪器、耗材 热循环仪实验步骤 一、材料1. 酶和酶缓冲液Taq 聚合酶许多 Taq 聚合酶都可以用;作者发现 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以满足大多数需要. 如果需要提高PCR 产物的特异性,应该使用热启动聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附带的

PCR基因扩增实验

[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍。1.变性:加

多重-PCR-扩增实验

多重PCR扩增实验可以用于:(1)在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物,或对有多个型别的目的基因进行分型,特别是用一滴血就可检测多种病原体;(2)多重PCR很适宜于成组病原体的检测,如肝炎病毒,肠道致病性细菌,性病,无芽胞厌氧菌,战伤感染细菌及细菌战剂的同时侦检;(3)多种病原体在同一反应管内

基于Naica-数字PCR平台三色检测Her2基因拷贝数变异

人表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2,HER2)检测是预测HER2靶向疗法(如曲妥珠单抗)潜在效果的生物标志。为了提高HER2检测有效性和临床实用性,美国临床肿瘤学会(American Society of Clinical On

基于Naica-数字PCR平台三色检测Her2基因拷贝数变异

人表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2,HER2)检测是预测HER2靶向疗法(如曲妥珠单抗)潜在效果的生物标志。为了提高HER2检测有效性和临床实用性,美国临床肿瘤学会(American Society of Clinical On

十九大!看看分子病理领域,未来发展方向!

  今天党的十九大召开,习近平大大指出:中国特色社会主义进入新时代,我国社会主要矛盾已经转化为人民日益增长的美好生活需要和不平衡不充分的发展之间的矛盾。想想都觉得高中政治课本过时了,而考研又多了一道大题。然而这些年,医疗领域进展可不止一点!就让我们一起看看这些年,分子病理领域的发展!  其实相对于其

荧光原位杂交(FISH)之一:实验原理

实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异

Plos-One:-能量如何驱动乳腺癌扩增与恶化

  肿瘤细胞,尤其是更具侵略性的癌细胞-似乎具有通过改变自身,从而达到逃避治疗并成功扩散到全身的能力。  但是,癌细胞如何获得所需的能量呢?在最近的一项研究中,Merajver的实验室研究了癌细胞内部的糖原水平。糖原水平代表了储存的葡萄糖分子集合。  密歇根大学的内科和流行病学以及密歇根大学罗格尔癌

覆盖HER2超低表达乳腺癌!Enhertu新适应症申报上市

  8月19日,第一三共与阿斯利康宣布Enhertu(德曲妥珠单抗)的新适应症上市申请获欧洲药品管理局(EMA)受理,用于单药治疗接受过至少一种内分泌疗法的不可切除或转移性HER2低表达(IHC 1+或2+/ISH-)或HER2超低表达(IHC 0)乳腺癌成人患者。  图片  EMA此次受理主要是基

HER2阴性乳腺癌新药启动关键性3期临床试验

  近日,第一三共株式会社(Daiichi Sankyo)宣布,名为DESTINY-Breast04的一项关键性3期临床试验在全球启动,以评估靶向HER2的抗体药物偶联物DS-8201(trastuzumab deruxtecan)的安全性和有效性,用于治疗HER2低表达、既往已采用标准疗法的不可切

Cell-Metabol:特殊的膳食补充剂有望治疗HER2阳性乳腺癌

  近日,一项刊登在国际杂志Cell Metabolism上的研究报告中,来自梅奥诊所的研究人员通过研究鉴别出了HER2阳性乳腺癌生长的一种重要新型通路,同时他们还发现,一种名为cyclocreatine的膳食补充剂或能有效阻断这类乳腺癌的生长。图片来源:en.wikipedia.org  研究者T

中国医学科学院JBC揭示癌症信号新机制

  来自中国医学科学院的研究人员在新研究中证实,S100蛋白家族成员:S100A14在乳腺癌中过表达,并充当了HER2信号的一个调控因子。这些研究发现在线发表在11月27日的《生物化学杂志》(JBC)上。   论文的通讯作者是中国医学科学院北京协和医学院的刘志华(Zhihua Liu)博士。其

一例乳腺癌术后多发皮肤转移灶病例分析

患者女,69岁,以左乳腺癌术后2年4个月,左乳切口周围多发皮肤结节1年1个月为主诉就诊。2010年11月发现左侧乳腺肿块,在佛山市第一人民医院胸外科行左乳肿物穿刺活检,病理示:浸润性乳腺癌,免疫组织化学:雌激素受体(ER)约95%(+),孕激素受体(PR)约95%(+),CerbB-2(++),Ki

JAMA肿瘤学:黑蝴蝶型乳腺癌复发元凶,可能系免疫反应减弱

  过去几年,科学家已经在癌症治疗的诊断方法、治疗新药方面取得了不少重大进展。然而,由于肿瘤本身包含复杂的异质化,所以完全根除癌变细胞,尤其是乳腺癌,仍然是一个重大挑战。  其中,由以HER2阳性乳腺癌最为凶险。作为“粉红丝带上的黑蝴蝶”,HER2阳性乳腺癌是乳腺癌分型中较为危险的一种亚型。相比于其

北京迈基诺:检测你的癌症基因

  最常见的两个用药检测是罗氏的赫赛汀和阿斯利康的易瑞沙。前者对HER2阳性的乳腺癌患者有效;后者对EGFR突变的非小细胞肺癌患者有效。赫赛汀 1998年就已上市,相应的检测在医院已经很成熟。易瑞沙2008年在国内上市,相应的检测还没能在医院全部推行。今年6月,又一款新药获批在中国上市,用药之前