蛋白激酶C异构体分析实验
实验方法原理 实验材料 有 PKC 活性的酶样品试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反应缓冲液TCASDS - PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管实验步骤 1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 × PKC 反应缓冲液1 μl 10 mg/ml 组蛋白 H11 [γ-32P] ATP 溶液(ATP 终浓度为 5 mmol/L,放射活性为 5 μCi/μl)0~14 μl 水盖好离心管,放入 30℃ 水浴温育 10 min。三个反应为一组设立无底物和酶的对照。每个反应的容积为 20 μl。在步骤 2 中加入水的量取决于所用酶样品的多少。2. 加入 1~14 μl 有 PKC 活性的酶样品到预热的反应混合液中,开始反应。3. 30℃, 温育 10 min。4. 按不同的分析方法加入适当的试剂停止反应:加入 20 μl 10 % 预冷......阅读全文
蛋白激酶C异构体分析实验
实验方法原理 实验材料 有 PKC 活性的酶样品试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反应缓冲液TCASDS - PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管实验步骤 1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 × P
蛋白激酶C异构体分析实验
实验材料有 PKC 活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液PKC 反应缓冲液TCASDS - PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管实验步骤1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 × PKC 反应缓冲液1 μ
蛋白激酶C异构体分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 有 PKC 活性的酶样品
酪蛋白激酶分析实验
基本方案 用 β-酪蛋白 备择方案 用多肽底物 实验方法原理 实验材料 β-酪蛋
酪蛋白激酶分析实验
实验方法原理 实验材料 β-酪蛋白(溶于水)有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCA SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:
人蛋白激酶C-(PKC)酶联免疫分析
人蛋白激酶C (PKC)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中蛋白激酶C(PKC)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人蛋白激酶C (PKC)水平。用纯化的人蛋白激酶C (PKC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往
大鼠蛋白激酶C(PKC)酶联免疫分析
大鼠蛋白激酶C(PKC)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中蛋白激酶C(PKC)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠蛋白激酶C(PKC)水平。用纯化的大鼠蛋白激酶C(PKC)抗体包被微孔板
蛋白激酶C概述(一)
蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是一类Ca2+、磷脂依赖性的蛋白激酶,在跨膜信号传递过程中起着重要作用。PKC通过催化多种蛋白质上Ser/Thr磷酸化,调节多种细胞的代谢、生长、增殖和分化。 表 8-3 哺乳动物组织内的PKC亚类亚类氨基酸残基分子量(kDa)激活剂表达组
蛋白激酶C概述(二)
二、PKC的转位与激活 1.PKC的转位 PKC广泛分布于多种组织、器官和细胞,静止细胞中PKC主要存在于胞浆中,当细胞受到刺激后,PKC以Ca2+依赖的形式从胞浆中移位到细胞膜上,此过程称之为转位(translocation)。一般将PKC的转位作为PKC激活的标志。 2.PKC的激活 P
蛋白激酶C的基本介绍
蛋白激酶C(protein kinase C,PKC) 蛋白激酶C是G蛋白偶联受体系统中的效应物, 在非活性状态下是水溶性的,游离存在于胞质溶胶中,激活后成为膜结合的酶。蛋白激酶C的激活是脂依赖性的,需要膜脂DAG的存在,同时又是Ca2+依赖性的,需要胞质溶胶中Ca2+浓度的升高。当DAG在质
蛋白激酶C的结构介绍
PKC的所有亚类都由一条单肽链组成,分子量大约为67-83kDa,其结构可分为四个保守区C1-C4(mPKC和aPKC缺少C2区)和五个可变区V1-V5。基中C1区可能是膜结合区,并且含有富含半胱氨酸的随机重复序列Cys-X2-Cys-X13(14)-Cys-X2-Cys-X7-Cys-X7-C
关于蛋白激酶C的作用介绍
蛋白激酶C是一种细胞质酶,在未受刺激的细胞中,PKC主要分布在细胞质中, 呈非活性构象。一旦有第二信使的存在,PKC将成为膜结合的酶,它能激活细胞质中的酶,参与生化反应的调控, 同时也能作用于细胞核中的转录因子, 参与基因表达的调控, 是一种多功能的酶。 对糖代谢的控制 在肝细胞中, 蛋白激
酪蛋白激酶分析实验_用多肽底物
实验方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 进行分析,最近酿蛋白激酶 II 也已被特异性的多肽底物分析,如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu(下划线残基是磷酸受体)。两个多肽均可通过精氨酸残基结合到 P81 磷酸纤维
酪蛋白激酶分析实验_用-β酪蛋白
实验材料β-酪蛋白(溶于水)有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCASDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤1. 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 ×
大鼠蛋白激酶C(PKC)ELISA检测法
大鼠蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 PKC 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PKC与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠PKC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strep
大鼠磷酸化蛋白激酶C(PPKC)酶联免疫分析
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)水平。用纯化的大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被
人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒
人蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 PKC 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PKC与单抗结合,加入生物素化的抗人PKC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavi
蛋白激酶C(PKC)的结构特点和作用
蛋白激酶C(PKC)是一个丝氨酸和苏氨酸特异性蛋白激酶家族,可被钙和第二信使二酰甘油激活。pkc家族成员磷酸化多种蛋白质靶点,已知参与多种细胞信号传导途径。PKC家族成员也作为一类肿瘤启动子佛波酯的主要受体。pkc家族的每一个成员都有一个特定的表达谱,并且被认为在细胞中起着独特的作用。该基因编码的蛋
大鼠蛋白激酶C(PKC)酶联免疫分析试剂盒使用说明
本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 48T25pmol/L-800pmol/L 使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中蛋白激酶C(PKC)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体
蛋白激酶C基因的结构特点和主要作用
蛋白激酶C(PKC)是一个丝氨酸和苏氨酸特异性蛋白激酶家族,可被钙和第二信使甘油二酯激活pkc家族成员磷酸化多种蛋白质靶点,参与多种细胞信号传导途径。PKC家族成员也是一类肿瘤促进剂佛波酯的主要受体pkc家族的每个成员都有一个特定的表达谱,并被认为在细胞中发挥着独特的作用。该基因编码的蛋白是pkc家
环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验
实验方法原理 实验材料 具有环核苷酸依赖性蛋白激酶活性的酶样品10 mg/ml 组蛋白 2B(溶于水)试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液5 × 环核苷酸依赖性蛋白激酶反应缓冲液20 × 环核苷酸仪器、耗材 30℃ 水浴实验步骤 1. 每个分析反应按以下比例将反应组分加入 1.5 ml 微量离
环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 具有环核苷酸依赖性蛋白激酶活性的酶样品
环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物,当酶样品中含有磷酸转移酶活性时,蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。实验材料具有环核苷酸依赖性蛋白激酶活性的酶样品10 mg/ml 组蛋白 2B(溶于水)试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液5 × 环核苷酸依赖性蛋白激酶反应缓冲液20 × 环核
关于蛋白激酶C的转位与激活的介绍
转位 PKC广泛分布于多种组织、器官和细胞,静止细胞中PKC主要存在于胞浆中,当细胞受到刺激后,PKC以Ca2+依赖的形式从胞浆中移位到细胞膜上,此过程称之为转位(translocation)。一般将PKC的转位作为PKC激活的标志。 [2] 激活 PKC的活性依赖于钙离子和磷脂的存在,但
顺反异构体的分析测定方法
高效液相色谱法HPLC法在顺反异构体药物的分离分析中应用广泛,其可与多种检测器联用,在分离分析高沸点、大分子、热稳定性差的化合物方面具有极大优势,而其对顺反异构体的分离选择性和检测精确度主要取决于选用合适的色谱柱和检测器。毛细管电泳法CE法对带电荷物质的分离效果显著,但有时为改善峰形或提高分离度,需
发现!“消失的”大碳笼富勒烯C84异构体!
内嵌金属团簇富勒烯因其结构的多样性在近二十年间得到了飞速的发展,单金属氰化物团簇富勒烯是其中重要且特殊的一个分支,它的发现打破了以往内嵌金属团簇富勒烯需要内嵌至少两个金属原子的认知。然而目前仅有基于C76和C82碳笼的原始单金属氰化物团簇富勒烯被报道。同时,在大碳笼富勒烯C84的24种遵守“独立
人磷酸化蛋白激酶C(phosPKC)ELISA试剂盒
人磷酸化蛋白激酶C(phos-PKC)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 phos-PKC 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 phos-PKC与单抗结合,加入生物素化的抗人phos-PKC,形成免疫复合物连接
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪蛋白激酶
试剂、试剂盒酪蛋白激酶分析缓冲液β-酪蛋白β-酪蛋白储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:5X 酪蛋白激酶分析缓冲液 4 μl β-酪蛋白
电荷异构体
对于单抗电荷变异体的测定有多种分析方法,20版中国药典通则3129收录了单抗电荷变异体测定法-全柱成像毛细管等电聚焦电泳法(icIEF法)外,新版中国药典将毛细管等电聚焦电泳(cIEF法)也写入3129通则。 离子交换(IEX)色谱和成像毛细管等电聚焦(iCIEF)或(CIEF),传统上都使用
大鼠蛋白激酶A(PKA)酶联免疫分析
大鼠蛋白激酶A(PKA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中蛋白激酶A(PKA)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠蛋白激酶A(PKA)水平。用纯化的大鼠蛋白激酶A(PKA)抗体包被微孔板,制成固相