酪蛋白激酶分析实验_用多肽底物
实验方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 进行分析,最近酿蛋白激酶 II 也已被特异性的多肽底物分析,如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu(下划线残基是磷酸受体)。两个多肽均可通过精氨酸残基结合到 P81 磷酸纤维素膜上。第一个多肽对酪蛋白激酶 I 相对比较特异,但它的磷酸化反应动力并不理想,其 Km 值大小在毫摩尔范围。因此只有在此酶的纯度很高时用于酪蛋白激酶 I 分析比较理想。实验材料合成肽底物溶液有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCASDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30°C 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:10 μl 5 × 酪蛋白激酶反应缓冲液5 μl 10 mmol/L用于酪蛋白激酶......阅读全文
酪蛋白激酶分析实验_用多肽底物
实验方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 进行分析,最近酿蛋白激酶 II 也已被特异性的多肽底物分析,如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu(下划线残基是磷酸受体)。两个多肽均可通过精氨酸残基结合到 P81 磷酸纤维
酪蛋白激酶分析实验_用-β酪蛋白
实验材料β-酪蛋白(溶于水)有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCASDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤1. 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 ×
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪蛋白激酶
试剂、试剂盒酪蛋白激酶分析缓冲液β-酪蛋白β-酪蛋白储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:5X 酪蛋白激酶分析缓冲液 4 μl β-酪蛋白
酪蛋白激酶分析实验
基本方案 用 β-酪蛋白 备择方案 用多肽底物 实验方法原理 实验材料 β-酪蛋
酪蛋白激酶分析实验
实验方法原理 实验材料 β-酪蛋白(溶于水)有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCA SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:
关于酪蛋白多肽的组成成分—酪蛋白的介绍
酪蛋白是哺乳动物乳汁包括牛奶,羊奶和人奶中的主要蛋白质。牛奶的蛋白质,主要以酪蛋白(Casein)为主,人奶以白蛋白为主。酪蛋白是一种大型、坚硬、致密、极困难消化分解的凝乳(curds)。 牛乳蛋白对人体有过敏不良后果。已有生产工艺,通过将牛乳蛋白彻底酶解为多肽和氨基酸以解决这一问题。但是近来
酪蛋白激酶的基本信息
中文名称酪蛋白激酶英文名称casein kinase;CK定 义催化肽链中邻近酸性氨基酸残基的丝氨酸/苏氨酸磷酸化的酶。包括酪蛋白激酶1(CK1)和酪蛋白激酶2(CK2)。近来发现也能磷酸化酪氨酸残基,具有广谱底物特异性,因而具有多种生物功能。最初因能磷酸化酪蛋白而得此名,事实上CK2在体内并不参
酪蛋白激酶的基本信息
中文名称酪蛋白激酶英文名称casein kinase;CK定 义催化肽链中邻近酸性氨基酸残基的丝氨酸/苏氨酸磷酸化的酶。包括酪蛋白激酶1(CK1)和酪蛋白激酶2(CK2)。近来发现也能磷酸化酪氨酸残基,具有广谱底物特异性,因而具有多种生物功能。最初因能磷酸化酪蛋白而得此名,事实上CK2在体内并不参
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
试剂、试剂盒 ATP储存液实验步骤 一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多数激酶需要 ATP 镁盐作为高效底物。有时可以用锰代替镁。1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合这两种溶液,测 pH 值。慢慢将
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
ATP储存液的配制 依赖环核苷酸的蛋白质激酶 蛋白质激酶C 酪蛋白激酶 酪氨酸激酶 凝胶蛋白质激酶分析
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
ATP储存液的配制依赖环核苷酸的蛋白质激酶蛋白质激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝胶蛋白质激酶分析试剂、试剂盒ATP储存液 实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多
关于酪蛋白多肽的作用机理介绍
1、酪蛋白多肽全面解除代谢紊乱 脂质、糖甚至蛋白代谢紊乱事实上三位一体,互相联系的。高脂血症、高体重(肥胖)、高血糖等代谢综合症的发生,都与代谢进程中吸收、分解、氧化、转运、合成、再分解等各个环节出现障碍所致。 经过严格序列设计及分离纯化多肽细胞因子,有以下功能: (A)使营养物质吸收、能
关于酪蛋白多肽的吸收机制介绍
过去的科学研究认为,蛋白质经消化道酶促水解后,主要以氨基酸的形式被吸收。近两年的科学研究认为,人体吸收蛋白质的主要形式不是以氨基酸,而是以多肽的形式吸收的,这是人体吸收蛋白质机制研究的重大突破。科学试验证明,酪蛋白多肽的的吸收机制具有十大特点: 1、不需消化,直接吸收。通常,多肽是人体自身合成
用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ 利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ 试剂、试剂盒 酪氨酸激酶分析缓冲液
用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验1
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ试剂、试剂盒酪氨酸激酶分析缓冲液酪蛋白激酶肽底物溶液实验步骤1. 在离心管里配制 50 μl 反应混合物:5X 酪氨酸激酶分析缓冲液 10 μl10 mmol/L 酪蛋白激酶肽底物溶液 5
关于酪蛋白多肽的生产工艺介绍
牛乳通常指母牛正常分娩后分泌挤得的乳汁,因营养齐全,蛋白质丰富而受到欢迎。然而牛乳蛋白理化特性又不同于人乳蛋白,服用后遇酸易凝固,不易被婴幼儿消化吸收,此外部分牛乳蛋白对人体有过敏不良后果。已有生产工艺,通过将牛乳蛋白彻底酶解为多肽和氨基酸以解决这一问题。但是近来科学发现牛乳中的乳球蛋白、乳白蛋
关于酪蛋白多肽的基本信息介绍
酪蛋白多肽是一种新型的短肽,拥有发明专利技术,从牛乳酪蛋白中提炼酶解出来的小分子蛋白多肽,可以针对人体免疫细胞(如淋巴细胞专一抗体、T细胞、B细胞等)完成激活、修复、再生、提升活性的全过程,激发自身免疫系统的主动性,从根本上恢复和加固自身免疫系统。
用-PCR-分析连接反应的底物和产物
试剂、试剂盒 ddH2OVent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒 DNA仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备热循环仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ddH2O2. 酶和酶缓冲液10X Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶3. 核酸和寡核苷酸dNTP,各 20 mm
用-PCR-分析连接反应的底物和产物
由 PCR 产生的合成 DNA 文库,可以经过酶切消化,连接到线性化的表达载体系统上。在这里所列的方案中,文库的 5’(NotⅠ)和 3'(ClaⅠ) 末端是不同的酶切位点,也用同样的酶切位点克隆进载体。可以用 PCR 分析线性化反应和连接反应的效率。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版)
用-PCR-分析连接反应的底物和产物
试剂、试剂盒 ddH2O Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪氨酸激酶
试剂、试剂盒烯醇化酶酪氨酸激酶分析缓冲液实验步骤1. 制备酸变性的烯醇化酶从兔肌肉中纯化的烯醇化酶通常以硫酸铵沉淀或者悬液的形式存在。(1) 含 100 μg 的烯醇化酶,于 4℃ 全速离心 5 分钟。(2) 去上清,加入含有 1 mmol/L DTT 的 10 μl 50 mmol/L HEPES
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—蛋白质激酶C
试剂、试剂盒PKC 分析缓冲液组蛋白 HI 储存液磷脂酰丝氨酸甘油二油酸脂实验步骤1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物:5X PKC 分析缓冲液 4 μl10 mg/ml 组蛋白 HI 储存液
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——ATP储存液的配制
试剂、试剂盒ATP储存液实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多数激酶需要 ATP 镁盐作为高效底物。有时可以用锰代替镁。1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合这两种溶液,测 pH 值。慢慢将 p
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—依赖环核苷酸
试剂、试剂盒激酶分析缓冲液组蛋白 2B 储存液环核苷酸依赖的蛋白质激酶分析缓冲液环核苷酸储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:5X 激酶分析缓冲液 4 μl,10 mg/ml 组蛋白 2B 储存液 1 μl,[γ-32P] ATP(终浓度为 5 μCi/5
酪蛋白的制备实验
等电点沉淀法 实验方法原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛
蛋白激酶C异构体分析实验
实验方法原理 实验材料 有 PKC 活性的酶样品试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反应缓冲液TCASDS - PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管实验步骤 1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 × P
蛋白激酶C异构体分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 有 PKC 活性的酶样品
蛋白激酶C异构体分析实验
实验材料有 PKC 活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液PKC 反应缓冲液TCASDS - PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管实验步骤1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 × PKC 反应缓冲液1 μ
关于酪蛋白多肽的成分—生物活性肽的基本介绍
20世纪末,科学家在破解基因的秘密的同时,也对存在于生物体内的另一类奇妙物质的研究发生极大的兴趣。这类物质就是生物活性肽,或称功能肽。 科学家已在人体中发现了100多种生物活性肽,这些多肽具有传递生理信息,调节生理功能的作用,对于人体的神经、消化、生殖、生长、运动、代谢、循环等系统的正常生理活
关于酪蛋白多肽的成分肽对人体的影响介绍
酪蛋白多肽的成分活性肽主要控制人体的生长、发育、免疫调节和新陈代谢,它在人体处于一种平衡状态,若活性肽减少后,人体的机能发生重要变化,对于儿童来说,他的生长、发育变得缓慢,甚至停止,长久下去就形成了侏儒,对成年人或老年人,缺少活性肽后,自身的免疫力就会下降,新陈代谢紊乱,内分泌失调,引起各种疾病