P81磷酸纤维素膜吸附实验
实验方法原理 P81 膜具有离子交换的特性，在较大 pH 范围内带有负电荷。在低 pH 条件下（如在本方案中用于洗膜的 75 mmol/L 正磷酸），激酶分析中过量的 [γ-32P] ATP 并不与 P81 膜结合，而在此条件下带正电荷的磷酸化多肽可结合在膜上。碱性蛋白质比酸性蛋白质更适合吸附在 P81 膜上。组蛋白与膜的结合力较强，因为它是强碱性的，而酪蛋白的结合力很差，几乎为零，因为它是较为酸性的蛋白质。实验材料 样品试剂、试剂盒 正磷酸丙酮仪器、耗材 P81 磷酸纤维素膜500 ml塑料杯（其底被抗溶剂塑料或金属网替换）20 ml 闪烁瓶闪烁计数器实验步骤 1. 将膜裁成 2 cm × 2 cm 大小的小块，在一端折叠，如图 17.7.1，用铅笔标记折线。将膜放置在一块大的无吸收性的物质上，如塑料、丙烯酸膜或铝箔包被的纤维板。2. 从每个样品管中吸取 15 μl 或 30 μl 样品迅速滴在 P81 膜上。迅速将这些膜放置......阅读全文
P81－磷酸纤维素膜吸附实验
实验方法原理 P81 膜具有离子交换的特性，在较大 pH 范围内带有负电荷。在低 pH 条件下（如在本方案中用于洗膜的 75 mmol/L 正磷酸），激酶分析中过量的 [γ-32P] ATP 并不与 P81 膜结合，而在此条件下带正电荷的磷酸化多肽可结合在膜上。碱性蛋白质比酸性蛋白质更适合吸附在 P
P81－磷酸纤维素膜吸附实验
基本方案 实验方法原理 P81 膜具有离子交换的特性，在较大 pH 范围内带有负电荷。在低 pH 条件下（如在本方案中用于洗膜的 75 mmol/L 正磷酸）
P81－磷酸纤维素膜吸附实验
实验方法原理P81 膜具有离子交换的特性，在较大 pH 范围内带有负电荷。在低 pH 条件下（如在本方案中用于洗膜的 75 mmol/L 正磷酸），激酶分析中过量的 [γ-32P] ATP 并不与 P81 膜结合，而在此条件下带正电荷的磷酸化多肽可结合在膜上。碱性蛋白质比酸性蛋白质更适合吸附在 P8
酪蛋白激酶分析实验_用多肽底物
实验方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 进行分析，最近酿蛋白激酶 II 也已被特异性的多肽底物分析，如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu（下划线残基是磷酸受体）。两个多肽均可通过精氨酸残基结合到 P81 磷酸纤维
蛋白激酶C异构体分析实验
实验材料有 PKC 活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液PKC 反应缓冲液TCASDS - PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管实验步骤1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中：4 μl 5 × PKC 反应缓冲液1 μ
蛋白激酶C异构体分析实验
实验方法原理 实验材料 有 PKC 活性的酶样品试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反应缓冲液TCASDS - PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管实验步骤 1. 每个分析反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中：4 μl 5 × P
蛋白激酶C异构体分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 有 PKC 活性的酶样品
用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验
利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ试剂、试剂盒反应缓冲液仪器、耗材磷酸纤维素滤纸离心管实验步骤1. 准备 P81 磷酸纤维素滤纸。(1) P81 磷酸纤维素滤纸切成 2cmX2cm 的方块，折起一个角，用铅笔在这里做个记号。(2) 将膜块放在一大张非吸收性材料上，如有机玻璃或者盖着铝箔的纤维板。2. 设置
钙调蛋白样品的测活实验
钙调蛋白样品的测活实验 试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽 ATP 钙调蛋白储液
钙调蛋白样品的测活实验
试剂、试剂盒MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液MLCK 酶磷酸丙酮（任选）MLCK 测活缓冲液仪器、耗材聚丙烯微量离心管Whatman*P81 磷酸纤维素纸（切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机（任选)实验步骤材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽（10mmol/L
钙调蛋白样品的测活实验
试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液 MLCK 酶磷酸丙酮（任选）MLCK 测活缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管 Whatman*P81 磷酸纤维素纸（切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机（任选)实验步骤 材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽（10m
酪蛋白激酶分析实验
实验方法原理 实验材料 β-酪蛋白（溶于水）有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCA SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中：
酪蛋白激酶分析实验_用－β酪蛋白
实验材料β-酪蛋白（溶于水）有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCASDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤1. 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中：4 μl 5 ×
酪蛋白激酶分析实验
基本方案 用 β-酪蛋白 备择方案 用多肽底物 实验方法原理 实验材料 β-酪蛋
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—依赖环核苷酸
试剂、试剂盒激酶分析缓冲液组蛋白 2B 储存液环核苷酸依赖的蛋白质激酶分析缓冲液环核苷酸储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物：5X 激酶分析缓冲液 4 μl，10 mg/ml 组蛋白 2B 储存液 1 μl，[γ-32P] ATP（终浓度为 5 μCi/5
Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 1 mg ml 钙调蛋白（- 70℃ 小量储存）
Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶分析实验
实验方法原理 实验材料 1 mg ml 钙调蛋白（- 70℃ 小量储存）有 CaM 激酶活性的酶样品10 mmol L 合成肽底物溶液试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液5 × CaM 激酶反应缓冲液仪器、耗材 30℃ 水浴实验步骤 1. 对 1.5 ml 微量离心管做双管标记，每个反应按以下
吸附法纯化病毒实验_凝胶吸附法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒凝胶材料仪器、耗材烧杯实验步骤磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用
Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。实验材料1 mg ml 钙调蛋白（- 70℃ 小量储存）有 CaM 激酶活性的酶样品10 mmol L 合成肽底物溶液试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液5 × CaM 激酶反
吸附法纯化病毒实验——红细胞吸附法
实验方法原理用于某些可与红细胞吸附的病毒的浓缩，如正粘病毒和副粘病毒，由于红细胞吸附法是特异的，故可达到浓缩并纯化的目的。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液鸡红细胞悬液仪器、耗材烧杯水浴锅实验步骤用作吸附病毒的红细胞一般选择适宜动物的红细胞，常用的是鸡红细胞。基本步骤为：① 1%~3% 鸡
活性碳吸附实验选择连续吸附还是间歇吸附要选啥
间歇性吸附。活性炭在液相中的应用，应考虑的因素很多，主要有活性炭添加量、温度、时间、酸碱度、作业方式等，其中在吸附试验中，采用间歇性吸附，间歇吸附指定量的吸附剂和定量的溶液经过长时间的充分接触而达到平衡。
酶联免疫吸附实验
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到
酶联免疫吸附实验
间接细胞ELISA法检测抗细胞表面抗原的特异性抗体实验步骤本检测方法可用来筛选细胞表面抗原的特异性抗体（图 I.L 6)。注意：所有步骤必须在 4°C 、含 有 NaN3 的生理缓冲液中进行。附 加 材 料（其他材料见基本方案，带 V 项 目 见 附 录 1)未混合的细胞样品碱性磷酸酶标记抗体或 F
酶联免疫吸附实验
酶联免疫吸附（ELISA）可以：免疫酶染色各种细胞内成份的定位研究抗酶抗体的合成显现微量的免疫沉淀反应定量检测体液中抗原或抗体成份01实验方法原理双抗体夹心法（常用于测定抗原） 用特异性抗体包被于固相载体，经洗涤后加入含有抗原之待测样品，如待检样品中有相应抗原存在，即可与包被于固相载体上的特
吸附法纯化病毒实验
实验方法原理 实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 凝胶材料仪器、耗材 烧杯实验步骤 磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5
酶联免疫吸附实验
利用标记技术将酶标记到抗体（抗原）上，使待检物中相应的抗原（抗体）与酶标记抗体（抗原）发生特异性反应。（来源：免疫学实习指导——北京大学医学部基础医学院免疫学系）实验方法原理利用标记技术将酶标记到抗体（抗原）上，使待检物中相应的抗原（抗体）与酶标记抗体（抗原）发生特异性反应。在遇到相应的酶底物时，酶
吸附质对实验的影响
77K下的N2是微孔和介孔分析zui常用的吸附质，但同时N2吸附对微孔，特别是在超微孔范围（孔径< 7Å），的定量评估一般不能令人满意。因此，已经建议替代的分子探针为Ar和CO2。尽管N2，Ar和CO2动力学直径类似（分别为0.36，0.34和0.33【1】），但是这三种吸附物质的吸附行为是完全不同
酶联免疫吸附实验
实验方法原理 利用标记技术将酶标记到抗体（抗原）上，使待检物中相应的抗原（抗体）与酶标记抗体（抗原）发生特异性反应。在遇到相应的酶底物时，酶能高效、专一催化、分解底物，生成有颜色的产物。根据颜色的深、浅、可以判断待检物中有无特异的抗原（抗体）以及量的大小。该方法可对待检样品进行定性和定量分析；同时具
酶联免疫吸附实验
实验方法原理利用标记技术将酶标记到抗体（抗原）上，使待检物中相应的抗原（抗体）与酶标记抗体（抗原）发生特异性反应。在遇到相应的酶底物时，酶能高效、专一催化、分解底物，生成有颜色的产物。根据颜色的深、浅、可以判断待检物中有无特异的抗原（抗体）以及量的大小。该方法可对待检样品进行定性和定量分析；同时具有
表面的吸附实验研究
高温高压下烃类气体在储层孔隙介质表面的吸附实验研究是当前石油化工中具有相当难度和较高理论价值与应用价值的前沿性研究课题，是储层孔隙介质中天然气和凝析油气体系相平衡规律以及渗流规律研究的重要基础之一。 近年来，天然气藏储层中烃类气体的吸附实验研究逐渐引起了人们的重视，一些研究者利用类似于储层孔隙