亲和柱的制备实验

实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时,将会有少量配体脱落,所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加,将会影响离子交换作用。为了克服这一影响要在纯化时采用至少 0.1 mol/L 的缓冲盐液。该固相化方法简便廉价,并可广泛用于蛋白质、核酸和凝素。实验材料 溴化氰活化的琼脂糖凝胶试剂、试剂盒 盐酸偶联缓冲液阻断缓冲液仪器、耗材 玻璃漏斗玻璃棒真空泵实验步骤 1. 取 2 g 溴化氰活化的琼脂糖凝胶加入玻璃漏斗内 1 mmol/L 盐酸中,用玻棒轻轻搅动 20 min直至介质完全溶胀。静置待混悬的介质沉降后,用真空泵吸去液体。1 g 干凝胶可以获得 3.5 ml 溶胀胶;2. 用 200 ml 1 mmol/L 盐酸洗介质,共3次,每次洗后吸去液体;3. 用偶联......阅读全文

MVA-病毒储液制备实验

实验材料成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的维持培养基消化 7 瓶

酒剂、酊剂的制备实验

浸渍法             实验材料 谷类酒 试剂、试剂盒

无蛋白血滤液制备实验

无蛋白血滤液制备实验可以用于:(1)蛋白质沉淀剂沉淀蛋白;(2)用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。实验方法原理钨酸法实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。三氯醋酸法实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将

冰冻组织制备及切片实验

实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1.  将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2.  在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3.  保证C

MVA-病毒储液制备实验

实验方法原理 实验材料 成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材 150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml

转运反应成分的制备实验

试剂、试剂盒 APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材 微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤 1. 在一微量离心管中,4℃,10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl

DNA-亲和介质的制备实验

试剂、试剂盒ATP[y-32P]ATPT4多核苷酸激酶乙酸铵乙醇酚 氯仿氯仿 异戊醇NaOAcT4 DNA连接酶酚异丙醇重蒸水Sepharose CL-2B溴化氰NN-二甲基甲酰胺NaOH磷酸钾KClCNBr-活化的Sepharose*.4BHClT4 多核苷酸激酶缓冲液TE接头-激酶缓冲液乙醇胺-

正丁醚的制备实验

实验步骤在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇, 0.8 mL 浓硫酸,两粒沸石,摇动混合均匀,安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热,保持瓶内液体微沸,开始回流,温度控制在134~135 ℃,待分水器已全部被水充满时表示反应已基本

接种环、接种针制备实验

实验方法原理接种环(针)又称白金耳(针),是细菌学检验的常用工具。它的正确使用是一项重要的基本技术。实验步骤接种环(针)由三部分组成。环(针)部分以白金丝制成为佳,因易于传热和散热并不生锈而经久耐用。但因价昂,通常多用镍丝代替。常用环直径约为2-4mm,针长50-80mm,其一端固定于金属柄上,金属

制备DNA测序模板实验

制备单链M13噬菌体DNA 小量裂解物中制备λ噬菌体DNA 双脱氧测序的双链质粒DNA的碱变性             实验材料 大肠杆菌

中国兰琼脂平板制备实验

实验方法原理 1.  中国兰为指示剂,其水溶液煮沸灭菌后备用。蔷薇酸乙醇溶液,无需灭菌,但加入培养基时应避开火焰,以免燃烧。2.  中国兰在酸性环境中呈兰色,在碱性环绕中呈红色,蔷薇酸在酸性环境中呈黄色,在碱性环境中呈淡红色,此培养基制成后,pH 7.4,呈淡紫红色,过碱呈鲜红色,过酸呈兰色都不

散剂的制备实验——示例法

散剂系指药物或与适宜辅料经粉碎、均匀混合而制成的干燥粉末状制剂,供内服或局部用。内服散剂一般溶于或分散于水或其他液体中服用,亦可直接用水送服。局部用散剂可供皮肤、口腔、咽喉、腔道等处应用;专供治疗、预防和润滑皮肤为目的的散剂亦可称撒布剂或撒粉。实验材料碳酸氢钠氧化镁试剂、试剂盒硫酸氢钠仪器、耗材研钵

免疫血清的制备实验

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990)  实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化

转运反应成分的制备实验

制备藻胆色素蛋白标志物胞质液的制备细胞通透化转运反应试剂、试剂盒APC 悬浮液                                                                  HEPES                                        

SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验

实验方法原理 用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验步骤 材料:缓冲液和溶液:碱裂解液 I:50 mmol/L 葡萄糖25 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)10 mmol/L EDTA(

转运反应成分的制备实验——胞质液的制备

实验材料血试剂、试剂盒酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、网状细胞和红细胞胞质液的制备1. 自动物身上采血,每 7 ml 血加 1 ml 酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液(ACD;75 mmol/L 柠檬酸三钠,38 mmol/L 柠檬酸,136 mmol/L 葡萄糖,pH 5.0

SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验

用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验方法原理用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验步骤材料:缓

质粒DNA的小量制备实验——碱裂解小量制备法

实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱,在特定的条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS乙酸甲乙醇仪器、耗材离心机漩涡混合器分光光度计实验步骤1

SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验

            实验方法原理 用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化 实验步骤

实验动物组织标本的制备实验_解剖法

通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔

免疫亲和柱荧光计快速测定法

  (1)试剂与设备   ①4-系列真菌毒素专用荧光计。   ②均质器(250mL)。   微量移液器(0.5mL)。   涡流混合器。   ⑤塑料注射器(60mL)。   ⑥VICAM T-2毒素亲和柱。   ⑦聚乙二醇(PEG),相对分子质量8000。   色谱级甲醇。   ⑨

赭曲霉毒素A免疫亲和柱操作说明

【概要】赭曲霉毒素A (Ochratoxin A)是曲霉属和青霉属的真菌形成的次级代谢产物,属烈性的肾脏毒和肝脏毒,广泛存在于各种食物中,谷物及其副产品是赭曲霉毒素A的主要来源。动物实验表明摄入了被这种毒素污染的饲料后,会发生急性或慢性中毒症。防止污染赭曲霉毒素A的食品和饲料直接或间接地进入

T2毒素免疫层析亲和柱说明

1、 用途:免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的T2毒素,从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。2、 概述:T2毒素(T2)是由多种镰刀菌产生的一种霉

怎样利用色谱仪分析药材中的黄霉曲素

一、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素实验材料: 1.1免疫亲和柱:黄曲霉毒素总量免疫亲和柱 1.2色谱柱:Venusil MP C18 (4.6*150mm, 5μm), 二、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素实验方法:1.1 混合对照品溶液的制备 精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、B2、G1、G

方案11-利用脱水胰酶亲和捕获蛋白质实验

试剂、试剂盒乙酸牛胰酶CaCl2溴化氰活化的 Sepharose 4BHClKOHNaHCO3NaOHPMSFPBS硫酸鲑精蛋白乙酸钠三氟乙酸Tris-Cl仪器、耗材透析膜烧结的玻璃漏斗水浴锅实验步骤一、ST-Sepharose 亲和树脂的制备二、脱水胰酶的制备三、脱水胰酶亲和柱的制备四、样品制备、

杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备

实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

抗原和免疫血清的制备实验——抗菌血清的制备

抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。实验材料家兔试剂、试剂盒普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪

感受态制备:酵母感受态细胞制备实验

酵母感受态细胞制备可以:(1)用于建立酵母转化体系;(2)用于酵母表达系统构建;(3)用于酵母其他分子生物学研究。实验方法实验材料酿酒酵母 试剂、试剂盒YPDA液体培养基 蒸馏水 甘油 二甲基亚砜 仪器、耗材培养皿 离心机 离心管 冰箱 实验步骤一、试剂与耗材 1.  试剂 细菌用-酵母提取物(Fi

哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA

在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp,可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、

杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备

实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1