亲和柱的制备实验
实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时，将会有少量配体脱落，所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加，将会影响离子交换作用。为了克服这一影响要在纯化时采用至少 0.1 mol／L 的缓冲盐液。该固相化方法简便廉价，并可广泛用于蛋白质、核酸和凝素。实验材料 溴化氰活化的琼脂糖凝胶试剂、试剂盒 盐酸偶联缓冲液阻断缓冲液仪器、耗材 玻璃漏斗玻璃棒真空泵实验步骤 1. 取 2 g 溴化氰活化的琼脂糖凝胶加入玻璃漏斗内 1 mmol/L 盐酸中，用玻棒轻轻搅动 20 min直至介质完全溶胀。静置待混悬的介质沉降后，用真空泵吸去液体。1 g 干凝胶可以获得 3.5 ml 溶胀胶；2. 用 200 ml 1 mmol/L 盐酸洗介质，共3次，每次洗后吸去液体；3. 用偶联......阅读全文
反义RNA的制备实验
RNA 也可以由线状 DNA 为模板，通过 RNA 聚合酶（如T3、T7 或 SP6 ) 在体外合成。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验材料限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐
T2毒素免疫层析亲和柱
1、 用途： 免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的T2毒素，从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用，过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。 亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。 2、 概述： T2毒
动物实验技术：转基因小鼠制备实验
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，
细菌中制备基因组DNA实验——小量制备
真核生物的一切有核细胞（包括培养细胞）都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，因此，制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持DNA分子的完整。实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液
质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法
实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA，尽管该方案十分快捷，但制备的DNA的
质粒DNA的小量制备实验
实验方法原理 碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 培养基试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇VTE仪器、耗材 平板实验步骤 1. 接种一个单菌落于5 ml无菌LB培养液中，在37°C培养至饱和状态（过夜）。2. 取1.5 ml培养液以最大转速离心20 S。弃上清。3. 沉淀用10
转运反应成分的制备实验
试剂、试剂盒 APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材 微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤 1. 在一微量离心管中，4℃，10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟，吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES（pH 7.4），0.1 mol/L NaCl
DNA－亲和介质的制备实验
试剂、试剂盒ATP[y-32P]ATPT4多核苷酸激酶乙酸铵乙醇酚 氯仿氯仿 异戊醇NaOAcT4 DNA连接酶酚异丙醇重蒸水Sepharose CL-2B溴化氰NN-二甲基甲酰胺NaOH磷酸钾KClCNBr-活化的Sepharose*.4BHClT4 多核苷酸激酶缓冲液TE接头-激酶缓冲液乙醇胺-
冰冻组织制备及切片实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤 1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。 3.
制备DNA测序模板实验
制备单链M13噬菌体DNA 小量裂解物中制备λ噬菌体DNA 双脱氧测序的双链质粒DNA的碱变性 实验材料 大肠杆菌
MVA－病毒储液制备实验
实验材料成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的维持培养基消化 7 瓶
正丁醚的制备实验
实验步骤 在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇， 0.8 mL 浓硫酸，两粒沸石，摇动混合均匀，安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热，保持瓶内液体微沸，开始回流，温度控制在134~135 ℃，待分水器已全部被水充满时
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物胞质液的制备细胞通透化转运反应试剂、试剂盒APC 悬浮液 HEPES
中国兰琼脂平板制备实验
实验方法原理 1. 中国兰为指示剂，其水溶液煮沸灭菌后备用。蔷薇酸乙醇溶液，无需灭菌，但加入培养基时应避开火焰，以免燃烧。2. 中国兰在酸性环境中呈兰色，在碱性环绕中呈红色，蔷薇酸在酸性环境中呈黄色，在碱性环境中呈淡红色，此培养基制成后，pH 7.4，呈淡紫红色，过碱呈鲜红色，过酸呈兰色都不
酒剂、酊剂的制备实验
浸渍法 实验材料 谷类酒 试剂、试剂盒
鲑精担体DNA制备实验
利用这一方案可获得剪切好的高质量鲑精担体DNA，它可用于转化实验和其他需要高质量担体DNA的实验中。实验材料鲑精DNA试剂、试剂盒TE酚氯仿乙酸钠仪器、耗材离心机摇床超声仪实验步骤1. 将TE缓冲液加入装有干燥鲑精DNA的烧杯中，至鲑精DNA浓度为5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反复吹打后
冰冻组织制备及切片实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。 3. 保证C
正丁醚的制备实验
实验步骤在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇， 0.8 mL 浓硫酸，两粒沸石，摇动混合均匀，安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热，保持瓶内液体微沸，开始回流，温度控制在134~135 ℃，待分水器已全部被水充满时表示反应已基本
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物 胞质液的制备 细胞通透化 转运反应 试剂、试剂盒 APC 悬浮液
肉汤培养基制备实验
仪器、耗材鲜牛肉末蛋白胨氯化钠蒸馏水实验步骤去脂、去筋鲜牛肉末50g，加水100ml，搅匀，放冰箱过夜，取出煮沸30分钟，用纱布过滤，补足水量为100ml，即为牛肉浸液。加入蛋白胨1g，氯化钠0.5g，加热溶解。调整PH值为7.6，煮沸10分钟，过滤，分装，高压灭菌备用。
免疫血清的制备实验
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂（如用于制备免疫标记抗体等），也可供特异性免疫治疗用。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990） 实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化
接种环、接种针制备实验
实验方法原理接种环（针）又称白金耳（针），是细菌学检验的常用工具。它的正确使用是一项重要的基本技术。实验步骤接种环（针）由三部分组成。环（针）部分以白金丝制成为佳，因易于传热和散热并不生锈而经久耐用。但因价昂，通常多用镍丝代替。常用环直径约为2-4mm，针长50-80mm，其一端固定于金属柄上，金属
DNA－亲和介质的制备实验
DNA 亲和介质的制备实验 试剂、试剂盒 ATP [y-32P]ATP T4多核苷酸激酶
制备DNA测序模板实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LBTEM13聚乙二醇容易让顶层琼脂乙酸钠乙醇仪器、耗材 巴斯德吸管试管离心机实验步骤 1. 如果起始用M13复制型DNA或M13单链DNA，以0.5 ng 重组M13mp复制型DNA或5~10 ng 单链DNA转化40 μl 感受态大肠杆菌DH5αF'株
无蛋白血滤液制备实验
无蛋白血滤液制备实验可以用于：（1）蛋白质沉淀剂沉淀蛋白；（2）用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。实验方法原理钨酸法实验原理：钨酸钠与硫酸混合，生成钨酸，钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀，经离心将蛋白质除掉。三氯醋酸法实验原理：血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀，经离心将
质粒DNA的小量制备实验——
实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱，在特定的条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间，结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒LB培养基卵清溶菌酶异丙醇TE仪器、耗材离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤一、实验步骤1. 接种一
抗肽抗体的制备实验
提高免疫原性肽的抗血清，是最简单的方法，获得非隔离的蛋白质的抗体，例如，对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的，当隔离的抗原是困难或费时，或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。实验步骤： 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠
质粒DNA的小量制备实验
实验方法原理 当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 细菌克隆试剂、试剂盒 LB培养基抗生素葡
质粒DNA的大量制备实验
碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法 实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制
质粒DNA的大量制备实验
实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行，但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验