由非变性凝胶电泳迁移率法评估均一性实验
试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物σ32 非变性胶样品缓冲液储存缓冲液考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液仪器、耗材 非变性凝胶电泳装置实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物,由免疫亲和柱洗脱所得σ32,由 POROS 50S 阳离子交换柱洗脱所得非变性凝胶电泳装置试剂非变性胶样品缓冲液(2X)(同 SDS 样品缓冲液,但不含 SDS。)储存缓冲液考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液(配方,见"试剂的配制",PP.184~189)操作程序1) 制备非变性胶(如,4%?12% 胶),带 10 个泳道。注:有几家制造厂商(如,NOVEX) 出售的供 SDS-PAGE 用的梯度 Tris-甘氨酸小胶 (minigel) 实际上是不含 SDS 的。逋常,电泳过程中 SDS 是从电极液和样品缓冲液进入凝胶的,只要这些缓冲液中不含 SDS, 这......阅读全文
不均一核糖核蛋白复合物的制备实验
实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 结合形成 hnRNP 复
不均一核糖核蛋白复合物的制备实验
实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 结合形成 hnRNP 复合物。实验材料 HeLa S3 细胞抗体试剂、试剂盒 免疫
不均一核糖核蛋白复合物的制备实验
在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 结合形成 hnRNP 复合物。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理在核内
如何提高-3D-细胞培养技术的均一性?
提高 3D 细胞培养技术均一性的方法:优化培养体系设计:选择合适的支架材料或基质,确保其物理和化学性质均匀一致。精心设计培养容器的结构,促进营养物质和气体的均匀分布。控制细胞接种密度和分布:使用精确的细胞计数方法,保证每次接种的细胞数量一致。采用均匀的接种技术,如借助自动化设备或特定的接种工具,使细
如何检测-3D-细胞培养技术的均一性?
用于检测 3D 细胞培养技术均一性的方法:组织学分析:对 3D 培养物进行切片和染色,如苏木精 - 伊红(H&E)染色、免疫组织化学染色等,观察细胞的分布、形态和组织结构在不同区域的一致性。荧光标记和成像:用荧光标记的抗体或染料标记特定的细胞成分或标志物,然后通过共聚焦显微镜或荧光显微镜进行成像,分
果蝇的伴性遗传实验_杂交法
实验方法原理果蝇的红眼与白眼是一对由性染色体上的基因控制的相对性状。用红眼雌果蝇与白眼雄果蝇交配,F1代雌雄均为红眼果蝇,F1代相互交配,F2代则雌性均为红眼,雄性红眼:白眼=1:1;相反用白眼雌果蝇与红眼雄果蝇交配,F1代雌性均为红眼,,雄性都是白眼,F1相互交配得F2代,雌蝇红眼与白眼比例为1:
细菌运动性观察实验——压滴法
实验材料苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒硝酸银鞭毛染色液Leifson 氏鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤玻片的准备、菌种材料的准备同鞭毛染色实验。1. 制片在洁净载玻片上加一清无菌水,挑取一环菌液与水混合,再加一环 0.01%
细菌运动性观察实验——悬滴法
鞭毛是细菌的运动器官,细菌是否具有鞭毛,以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。一般细菌的鞭毛只能用电子显微镜观察,进行鞭毛染色后可用普通光学显微镜观察。细菌运动性的观察可用压滴法和悬清法。观察时,要适当减弱光强度以增加反差,若光线太强。细菌和周围的液体难以区分。实验材料苏云金芽孢杆菌假单
电泳迁移率变动分析的实验方法介绍
通常用32P标记DNA分子,而不标记蛋白质。电泳结束后,用放射自显影技术显现具放射性标记的DNA条带位置。如果细胞蛋白提取物中不存在与同放射性标记的DNA探针结合的蛋白质,那么所有放射性标记都将出现在凝胶的底部;反之,将会形成DNA-蛋白质复合物,由于受到凝胶阻滞的缘故,放射性标记的DNA条带就
凝胶迁移率变动分析
中文名称凝胶迁移率变动分析英文名称gel mobility shift assay定 义利用凝胶进行的电泳迁移率变动分析。不同大小的分子在凝胶中电泳移动的速度不同,当某种分子与另一种分子特异性结合后,它在非变性凝胶电泳带中的位置就发生了变化,由此可以分析不同分子间的相互作用。如待检测DNA样品与核
凝胶迁移率变动分析的特点
中文名称凝胶迁移率变动分析英文名称gel mobility shift assay定 义利用凝胶进行的电泳迁移率变动分析。不同大小的分子在凝胶中电泳移动的速度不同,当某种分子与另一种分子特异性结合后,它在非变性凝胶电泳带中的位置就发生了变化,由此可以分析不同分子间的相互作用。如待检测DNA样品与核
鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳实验
试剂、试剂盒:十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液 TritonX-100 增溶液
鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳实验
试剂、试剂盒十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黄阜苷增溶液考马斯亮蓝染色液丙烯酰胺溶液BN 凝胶缓冲液实验步骤3.1 BN-PAGE 样品的制备所有样品制备步骤必须在 4°C 下操作,在开始制备样品前(见 26.3.1 节 1 和 26. 3.1 节 2) ,要制备好
鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳实验
试剂、试剂盒 十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黄阜苷增溶液考马斯亮蓝染色液丙烯酰胺溶液BN 凝胶缓冲液实验步骤 3.1 BN-PAGE 样品的制备所有样品制备步骤必须在 4°C 下操作,在开始制备样品前(见 26.3.1 节 1 和 26. 3.1 节 2) ,要制
江苏常州可靠性测试与寿命评估实验室建立
日前,国家半导体照明产品质检中心(筹)可靠性测试与寿命评估实验室揭牌仪式在江苏常州市科教城举行。 该实验室是国家半导体照明产品质检中心(筹)与中科院上海技物所合作共建的。两部门将依托上海技物所在航天领域应用LED(发光二极管)取得的技术优势,在研发高端LED照明产品、开展产品工程化检
蛋白质纯度测定实验
蛋白质纯度测定实验 实验步骤 在评价样品纯度之前,首先需要鉴定待测杂质的类型,如核酸、碳水化合物、脂
蛋白质纯度测定实验
实验步骤在评价样品纯度之前,首先需要鉴定待测杂质的类型,如核酸、碳水化合物、脂质、无关蛋白质、同工酶类、失活蛋白质,进而确定在特定溶液条件中, 能够区分假定杂质和目标蛋白质的理化特性 (化学分析或物理特征)。而纯度则是指待测杂质含量低于某个特定水平。需要注意的是,上述说明中并没有要求描述杂质的性质。
新研究揭示青藏高原南部地幔的不均一性
中国科学院广州地球化学研究所同位素地球化学国家重点实验室、深地科学卓越创新中心副研究员周金胜、研究员王强等科研人员利用钾质岩橄榄石及其熔体包裹体成分揭示青藏高原南部地幔的不均一性。相关研究发表于Journal of Petrology。 约束地幔的不均一性对理解地球内部的分异和循环十分重要,碱性
食品总细菌含量水平由3M菌落总数测试片来评估
3M菌落总数测试片是在一定条件下(例如培养基,培养温度和培养时间等)对食品试样进行处理和培养后,每克(毫升)试样中形成的微生物菌落总数。它适用于所有食品,主要用于评估大多数食品的总细菌含量水平。 3M菌落总数测试片的检测方法具有操作简单,检测周期短的优点。一旦投入使用,它将大大缩短检测周期,简
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验原理介绍
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和巯基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁
电泳迁移率的概念
带电粒子在单位时间内移动的距离称为电泳迁移率。溶液中带电粒子在电场 (E)中向着与它相异电荷的电极移动,它的移动速度(V)是电场(E)和粒子的有效迁移率(m)的乘积,即:V=mE离子的有效迁移率是一个由许多因素(包括离子半径、溶剂化作用、介电常数、溶剂粘度、离子形状和电荷、pH、解离度和温度等)决定
蛋白质单向SDS凝胶电泳实验——连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
电泳可用于分离复杂的蛋白质混合物,研究蛋白质的亚基组成以及证实蛋白质的均一性等,还能纯化出蛋白质用于后续的研究工作。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的孔径,蛋白质的电荷、大小、性质等因素共同决定了蛋白质的电泳迁移率。实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS磷酸仪器、耗材电泳仪离心机实验步骤1. 按“Laemm
古脊椎所等揭示原始鸟类演化速率的不均一性
近年来,随着大量特征矩阵和谱系关系的获得,对生物大类群在长时间尺度上的演化模式进行量化分析成为了重要的研究方向。鸟类的起源与早期演化一直以来都是脊椎动物演化研究的重点。然而,原始鸟类各支系的演化模式,如形态特征的变化快慢、不同类群的演化模式异同等,由于长期缺乏量化分析,仍不清楚。 4月5日,最
非变性凝胶电泳的的定义和特点
中文名称非变性凝胶电泳英文名称nondenaturing gel electrophoresis;native gel electrophoresis定 义不含变性剂,以聚丙烯酰胺、琼脂糖等凝胶为分离介质的电泳。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
本节介绍一种利用结合细菌蛋白质的基质去除粗制免疫球蛋白中与细菌编码蛋白质发生反应成分的方法(de Wet et al.1984)。该方法也适用于利用培养的细胞或组织抽提物去除交叉反应抗体。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒缓冲液和
肿瘤蛋白疫苗预防性实验——Elisa检测法
肿瘤蛋白疫苗预防性实验旨在考查疫苗的靶点是否针对多种抗原,可以覆盖90%甚至是100%的不同肿瘤亚型患者以及是否能在肿瘤形成之前提高机体的免疫系统。实验材料小鼠试剂、试剂盒肿瘤蛋白疫苗Elisa试剂盒消毒酒精碘酒仪器、耗材注射器针头一次性手套剪刀镊子动物固定架塑料放血管试管血管夹离心机 冰箱 手术器
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 细胞裂解缓冲液 NaOH Tris-缓冲盐溶液 TBS Triton X-100 溶菌酶
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 缓冲液和溶液细胞裂解缓冲液NaOHTris-缓冲盐溶液TBSTriton X-100 溶菌酶胰 DNA 酶 I制备用于文库筛选的抗体大肠杆菌培养液仪器、耗材 离心和转子亲和层析柱溴化氢活化的 Sepharose 4B实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的组分请见附录 12将贮
伏安法由欧姆定律所推公式的介绍
1、伏安法由欧姆定律所推公式:串联电路 I总=I1=I2(串联电路中,各处电流相等) U总=U1+U2(串联电路中,总电压等于各处电压的总和) R总=R1+R2+......+Rn U1:U2=R1:R2 2、伏安法由欧姆定律所推公式:并联电路 I总=I1+I2(并联电路中,干路电流
来看看激光诱导荧光光谱法评估息肉的准确性
为了减少时间,成本和小型的结直肠息肉切除的风险,美国胃肠内镜学会(ASGE)最近提出了性能阈值,新技术应满足对结直肠息肉组织实时准确的评估。 近期在线发表于Endoscopy杂志上的研究中,研究者前瞻性地评估了使用新的WavSTAT4光学活检系统,激光诱导荧光光谱(LIFS)是否可满足ASGE