细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 μg/ml 浓度的工作液,备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破膜,作用 10 min,使 FITC 染料能进入到细胞中。3. 用离心法以 PBS 液洗去破膜剂,离心收集细胞。4. 再取 FITC 工作液 2 ml 加入样品中,混匀,置 4℃ 冰箱中反应 30 min。5. 用 PBS 液以 1500 r/min 离心 5 min,洗去染色液,再离心去上清。6. 再加 0.5 ml PBS,混匀,上机检测。......阅读全文
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓度的工作液,备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 μg/ml 浓度的工作液,备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素,加 20 ml 无水乙醇,使 FITC 充分溶解,即为染色液的原液,保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下:1. FITC 贮存液的稀释:用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓
细胞RNA含量样品的制备及分析
实验材料单细胞悬液试剂、试剂盒PY 试剂醋酸缓冲液磷酸缓冲液DNA 酶消化液实验步骤一、试剂配制1. PY 试剂的配制:PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解,配成母液,置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液:取 1 ml PY 母液,加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100 ml
细胞RNA含量样品的制备及分析
实验材料 单细胞悬液 试剂、试剂盒 PY 试剂 醋酸缓冲液 磷酸缓冲液 DNA
细胞RNA含量样品的制备及分析
细胞RNA含量样品的制备及分析 实验材料 单细胞悬液 试剂、试剂
细胞RNA-含量样品的制备及分析
实验材料 单细胞悬液试剂、试剂盒 PY 试剂醋酸缓冲液磷酸缓冲液DNA 酶消化液实验步骤 一、试剂配制1. PY 试剂的配制:PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解,配成母液,置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液:取 1 ml PY 母液,加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血情况。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进入
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血情况。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进入血循环,可
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中,其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代,因此,检测红细胞中 RNA 的含量多少,就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备
LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式,这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中,如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液,能和蛋白质形成加和离子,使数据解析更加复杂,同时,这些盐类也抑制
蛋白质组学的样品制备
想要研究蛋白质,首先要得到高度纯化且具有生物活性的目的物质,因此,蛋白样品的制备是重要前提。蛋白提取的质量和效果对后续的研究分析有重要影响。不同种类的样本在制备过程中,存在一些差异,要根据样本特征调整实验方案和操作细节。基本原则样品处理尽量简单,减少蛋白损失;尽量避免蛋白的降解;尽可能提高样品蛋白的
样品的采取及制备
首先明确的是食品分析的一般程序为:样品的采集、制备和保存,样品的预处理、成分分析、分析数据处理及分析报告的撰写。 那么什么是样品的采集呢?所谓采样就是从整批产品中抽取一定量具有代表性样品的过程。一. 采样的目的意义 首先正确采样,必须遵守两个原则:第一,采集的样品要均匀,有代表性,能
SDSPAGE-蛋白质样品的制备
试剂、试剂盒 SDS-PAGE Loading BufferddH2O30%丙烯酰胺混合液1.5M Tris(pH8.8) 10%SDS10%过硫酸铵TEMEDTris-甘氨酸电泳缓冲液溴酚蓝考马斯亮蓝 R-250 染色液考马斯亮蓝脱色液仪器、耗材 离心机冷室水浴锅电泳装置微量移液器水平摇床滤纸实验
SDSPAGE-蛋白质样品的制备
SDS-PAGE 蛋白质样品的制备 试剂、试剂盒 SDS-PAGE Loading Buffer ddH2O
试述蛋白质样品制备技术的原则
1.避免冷冻干燥尽管有一些蛋白是经冷冻干燥处理后长出了晶体,但是大多数情况下并非如此。所以要尽可能避免冷冻干燥。如果蛋白已经这样了,准备点晶体之前,要用水或者缓冲液透析,除掉非挥发性的试剂和其他化学物质。2.避免硫酸铵沉淀避免硫酸铵沉淀法作为纯化的最后一步或使用硫酸铵沉淀法来浓缩蛋白。因为硫酸铵很难
蛋白质印迹法的样品制备
1、单层贴壁细胞总蛋白的提取: (1)倒掉培养液,并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液(或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走)。 (2)每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放轻轻摇动1min洗涤细胞,然后弃去洗液。重复以上操作两
SDSPAGE-蛋白质样品的制备
试剂、试剂盒SDS-PAGE Loading BufferddH2O30%丙烯酰胺混合液1.5M Tris(pH8.8)10%SDS10%过硫酸铵TEMEDTris-甘氨酸电泳缓冲液溴酚蓝考马斯亮蓝 R-250 染色液考马斯亮蓝脱色液仪器、耗材离心机冷室水浴锅电泳装置微量移液器水平摇床滤纸实验步骤实
蛋白质谱样品制备指南(一)
研究过蛋白的人都能深刻体会其复杂性和多功能性,为解决蛋白研究的困境,应运而生了一系列技术、方法、仪器等。质谱技术就是其中一个典型代表,常被用于几个蛋白研究的重要方向:蛋白基础功能探究(结构、相互作用核酸/蛋白/蛋白组、修饰功能等),蛋白鉴定(定位、机理等),蛋白定量等。 很多初入门者一般谈“谱”色变
蛋白质谱样品制备指南(二)
1 蛋白提取 1. 细胞或组织样品裂解细胞裂解及高效地蛋白提取对于高质量的蛋白纯化至关重要。以下提供针对细菌、哺乳动物、酵母和植物细胞的裂解方案,以取得较之传统物理裂解法更高的蛋白得率,甚至可从细胞样品中选择性提取目的蛋白及总蛋白的、亚组分蛋白,以及线粒体、叶绿体、细胞核、高尔基体及溶酶体等重要的细
蛋白质组样品制备程序1
一、样品制备试剂的准备二、细菌细胞样品的裂解处理步骤三、人培养细胞样品的裂解处理步骤四、膜蛋白裂解方法步骤一、样品制备试剂的准备1、裂解缓冲液储备液的准备下述本样品制备方法已经过优化, 并被证明配合使用PF-2D 试剂盒可获得最佳的结果。您若选择其他的样品处理和细胞裂解方法,请务必避免使用离子型的表
蛋白质组样品制备程序2
2)在4℃条件下以20000g的离心力冷冻离心60分钟 (离心力务必达到或大于20000g)。3)移取上清溶液。若上清样品不立即使用,则须储存于-80℃(最佳条件)或-20℃的无霜冰箱中以防止蛋白质的降解。2、用初始缓冲液(Start buffer)交换处理细胞裂解液1)在上述细胞裂解液中,加入初始
脱落细胞单细胞悬液的制备——冲洗液细胞样品的制备
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料膀胱试剂、试剂盒生理盐水PBS仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 用 300~500 ml 生理盐水冲洗膀胱,冲洗一定时间后
流式细胞术的样品制备
样本制备的基本原则:1.使各种液体和悬浮细胞样本新鲜,尽快完成样本制备和检测;2.针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化或EDTA处理,以清除杂质,使粘附的细胞彼此分离而形成单细胞状态;3.对新鲜实体瘤组织可选用或联用酶消化法,机械打散法和化学分散法来获得足够数量的单细胞悬液;4.对石蜡包埋组织应先
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗...
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗材介绍LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式,这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中,如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液,能和蛋白
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗材
LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式,这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中,如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液,能和蛋白质形成加和离子,使数据解析更加复杂,同时,这些盐类也
药物分析样品制备智能化时代(二)中药样品制备
中药是世界医药宝库中的瑰宝,也是我国重要的支柱产业之一。中药与西药相比,成分更加复杂,在研发和质量控制过程中涉及的制备过程更为复杂,步骤更为复杂,操作的标准化和操作溯源则更为更为重要。莱伯泰科最新为您带来的MultiTasker智能化制备平台,可以有效的解决这些问题。MultiTasker智能化
流式细胞术的样品制备(七种样品的制备方法)(二)
四、外周血单个核细胞的制备1.取外周血2ml,肝素抗凝,用生理盐水将血稀释成4ml,混匀;2.将稀释后的血液沿试管壁徐徐加入4ml淋巴细胞分离液ficoll到液面之上,勿用力过大,以免造成血液与分离液混合,保持清晰地分层状态;3.离心2000r/min,30min,室温18~20℃,离心后可见试管内