生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗...
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗材介绍LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式，这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中，如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液，能和蛋白质形成加和离子，使数据解析更加复杂，同时，这些盐类也抑制了ESI-MS分析时的离子化效率。因此，质谱分析之前，蛋白质的非挥发性盐类的去除是重要的一步。沃特世公司的MassPREPTM 在线脱盐小柱（2.1X10 mm，Part number186004032）为客户提供了简单易行，快速（小于5分钟的液相梯度，如图1），及重现性高的有效脱盐方法[1]。并成功应用于12KDa~150KDa分子量范围的完整蛋白质的脱盐LC-MS分析（如图2）展示了这种除盐柱用在细胞色素 C（分子量约12KDa），牛血清白蛋白BSA(......阅读全文
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗...
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗材介绍LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式，这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中，如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液，能和蛋白
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗材
LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式，这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中，如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液，能和蛋白质形成加和离子，使数据解析更加复杂，同时，这些盐类也
生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备
LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式，这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中，如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液，能和蛋白质形成加和离子，使数据解析更加复杂，同时，这些盐类也抑制
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤取 20 mg 异硫氰酸荧光素，加 20 ml 无水乙醇，使 FITC 充分溶解，即为染色液的原液，保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下：1. FITC 贮存液的稀释：用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓度的工作液，备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精破
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素，加 20 ml 无水乙醇，使 FITC 充分溶解，即为染色液的原液，保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下：1. FITC 贮存液的稀释：用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 μg/ml 浓度的工作液，备用。2. 被染色细胞首先用 70% 酒精
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素，加 20 ml 无水乙醇，使 FITC 充分溶解，即为染色液的原液，保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下：1. FITC 贮存液的稀释：用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓
细胞蛋白质总量样品的制备及分析
实验步骤 取 20 mg 异硫氰酸荧光素，加 20 ml 无水乙醇，使 FITC 充分溶解，即为染色液的原液，保存于 4℃ 冰箱待用。具体荧光染色步骤如下：1. FITC 贮存液的稀释：用 pH 7.4 的 PBS 液稀释成 50 ug/ml 浓
蛋白质透析除盐的原理
缓冲液使用的是梯度浓度溶液，当然是通过渗透作用，让透析袋中高密度的蛋白溶液浓度最后与烧杯溶液浓度趋于一致，期间盐等小分子会从透析袋微孔中出来，从而达到除盐的作用。
蛋白质除盐的方法有哪几种
蛋白质除盐的方法有哪些？如何做能够在除盐的过程中不过分的稀释蛋白质？答题思路：首先，当遇到分离纯化题目的时候，我们脑海中先归纳出分离纯化的各种方法以及依据。根据分子大小不同：透析、超过滤、密度梯度离心、凝胶过滤、SDS-PAGE凝胶电泳。根据溶解度差别：等电点沉淀、盐溶、盐析、有机溶剂分离沉淀。根据
蛋白质除盐的方法有哪几种
蛋白质在用盐析沉淀分离后 需要将蛋白质中的盐除去 常用的办法是透析 即把蛋白质溶液装入秀析袋内（常用的是玻璃纸）用缓冲液进行透析 并不断的更换缓冲液 因透析所需时间较长 所以最好在低温中进行 此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐 所用的时间就比较短2、等电点沉淀法蛋白质在静电状态时颗
蛋白质组学肽段除盐吸头免费领取！
开学焕新 科研加速高质量的样品前处理是确保实验成功与数据可靠的关键。C18肽段除盐吸头作为蛋白质组学(尤其是基于LC-MS/MS的肽段分析)中常用的脱盐耗材，亦可用于部分蛋白/肽类相关的生物分析质谱前处理，能够帮助科研人员高效实现样品富集与脱盐，提升质谱检测的灵敏度与准确性。新学期伊始，Open
多肽制备
固相多肽合成就是不断地在固相载体上加入α-氨基和侧链基团被保护的氨基酸。FMOC基团是用来保护α-氨基中的N的，去除保护基团后，再加入第二个氨基酸。产生的多肽通过一个连接臂将C端连接在树脂上，它可以被裂解下来。通常情况下，在多肽从树脂上裂解下来的同时去除侧链保护基团，一般采用哌啶去 FMOC保护基团
细胞RNA含量样品的制备及分析
实验材料单细胞悬液试剂、试剂盒PY 试剂醋酸缓冲液磷酸缓冲液DNA 酶消化液实验步骤一、试剂配制1. PY 试剂的配制：PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解，配成母液，置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液：取 1 ml PY 母液，加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100 ml
细胞RNA含量样品的制备及分析
实验材料 单细胞悬液 试剂、试剂盒 PY 试剂 醋酸缓冲液 磷酸缓冲液 DNA
细胞RNA－含量样品的制备及分析
实验材料 单细胞悬液试剂、试剂盒 PY 试剂醋酸缓冲液磷酸缓冲液DNA 酶消化液实验步骤 一、试剂配制1. PY 试剂的配制：PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解，配成母液，置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液：取 1 ml PY 母液，加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100
细胞RNA含量样品的制备及分析
细胞RNA含量样品的制备及分析 实验材料 单细胞悬液 试剂、试剂
NQI专项－“高纯多肽及蛋白质中杂质精确分析计量”－通论证
8月1日，“十三五”国家重点研发计划“国家质量基础的共性技术研究与应用” 重点专项（以下简称“NQI专项”）“高纯多肽及蛋白质中杂质精确分析计量装置开发与应用”项目实施方案论证会在中国计量科学研究院（以下简称“中国计量院”）召开。来自清华大学、中国航天员科研训练中心、军事医学研究院生命组学研究所、中
蛋白质谱样品制备指南（一）
研究过蛋白的人都能深刻体会其复杂性和多功能性，为解决蛋白研究的困境，应运而生了一系列技术、方法、仪器等。质谱技术就是其中一个典型代表，常被用于几个蛋白研究的重要方向：蛋白基础功能探究（结构、相互作用核酸/蛋白/蛋白组、修饰功能等），蛋白鉴定（定位、机理等），蛋白定量等。 很多初入门者一般谈“谱”色变
蛋白质谱样品制备指南（二）
1 蛋白提取 1. 细胞或组织样品裂解细胞裂解及高效地蛋白提取对于高质量的蛋白纯化至关重要。以下提供针对细菌、哺乳动物、酵母和植物细胞的裂解方案，以取得较之传统物理裂解法更高的蛋白得率，甚至可从细胞样品中选择性提取目的蛋白及总蛋白的、亚组分蛋白，以及线粒体、叶绿体、细胞核、高尔基体及溶酶体等重要的细
蛋白质组样品制备程序2
2）在4℃条件下以20000g的离心力冷冻离心60分钟 （离心力务必达到或大于20000g）。3）移取上清溶液。若上清样品不立即使用，则须储存于-80℃（最佳条件）或-20℃的无霜冰箱中以防止蛋白质的降解。2、用初始缓冲液（Start buffer）交换处理细胞裂解液1）在上述细胞裂解液中，加入初始
蛋白质组样品制备程序1
一、样品制备试剂的准备二、细菌细胞样品的裂解处理步骤三、人培养细胞样品的裂解处理步骤四、膜蛋白裂解方法步骤一、样品制备试剂的准备1、裂解缓冲液储备液的准备下述本样品制备方法已经过优化, 并被证明配合使用PF-2D 试剂盒可获得最佳的结果。您若选择其他的样品处理和细胞裂解方法，请务必避免使用离子型的表
蛋白质组学的样品制备
想要研究蛋白质，首先要得到高度纯化且具有生物活性的目的物质，因此，蛋白样品的制备是重要前提。蛋白提取的质量和效果对后续的研究分析有重要影响。不同种类的样本在制备过程中，存在一些差异，要根据样本特征调整实验方案和操作细节。基本原则样品处理尽量简单，减少蛋白损失；尽量避免蛋白的降解；尽可能提高样品蛋白的
如何制备tem/sem生物样品
透射电镜和扫描电镜制样方法很多，透射电镜的注意重金属染色，扫描电镜注意样品干燥和导电性能良好，而且针对不同的样品和观察效果有不同的制样方法
生物芯片技术样品制备
RNA样品通常需要首先逆转录成cDNA并进行标记后才可进行检测。目前，由于检测灵敏度所限，尚难以普通探针对极少量的核酸分子进行杂交和检测，所以需要对样品或后续测试信号进行适当的放大。多数方法需要在标记和分析前对样品进行适当程度的扩增，例如通过PCR方法，以使样品核酸的拷贝数有所提高达到检测的灵敏度。
如何制备tem/sem生物样品
透射电镜和扫描电镜制样方法很多，透射电镜的注意重金属染色，扫描电镜注意样品干燥和导电性能良好，而且针对不同的样品和观察效果有不同的制样方法，
现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用
摘要：蛋白质是生物体的重要组成部分，在现代生物制药领域有着重要的作用，本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词：蛋白质 反胶束萃取 双水相萃取 电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展，尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中，其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代，因此，检测红细胞中 RNA 的含量多少，就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血情况。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进入
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中，其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代，因此，检测红细胞中 RNA 的含量多少，就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中，其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代，因此，检测红细胞中 RNA 的含量多少，就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓红细胞系统造血情况。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进入血循环，可
网织红细胞样品的制备及分析
实验方法原理 网织红细胞是一种未完全成熟红细胞。在细胞成熟过程中，其胞质中的 RNA 含量逐渐被血红蛋白所取代，因此，检测红细胞中 RNA 的含量多少，就代表了红细胞的成熟程度。从而成为检测网织红细胞的重要方法。网织红细胞计数可以判断骨髓