酵母菌四分体的制备与剖分实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 酵母裂解酶山梨糖仪器、耗材 解剖显微镜解剖针实验步骤 1a. Glusulase酶处理：用无菌水洗涤孢子3次，再用5 ml 无菌水重悬并取30 μl 稀释在270 μl 无菌水中。在光学显徽镜下观察细胞，检测完整的子囊，加3 μl 稀释的Glusulase酶到孢子制备液中，用旋涡混合器轻轻振荡混匀，室温温育2 min，然后在显微镜下观察细胞，继续于室温温育，直到Glusulase酶处理完全。 1b. 酵母裝解酶-100T处理：细胞用50 μl 酵母裂解酶-100T溶液重悬。在光学显微镜 下观察完整的子囊。30℃温育10 min，沿试管壁缓缓地加入0.8 ml 无菌水。 2. 将消化管置于冰浴中，用接种环蘸取处理过的孢子在YPD剖分平板表面划两条平行线。3. 在解剖显微镜下观察倒置平板，可观察......阅读全文
酵母菌四分体的制备与剖分实验
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酵母裂解酶山梨糖仪器、耗材解剖显微镜解剖针实验步骤1a. Glusulase酶处理：用无菌水洗涤孢子3次，再用5 ml 无菌水重悬并取30 μl 稀释在270 μl 无菌水中。在光学显徽镜下观察细胞，检测完整的子囊，加3 μl 稀释的Glusulase酶到孢子制备液中，用
酵母菌四分体的制备与剖分实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 酵母裂解酶山梨糖仪器、耗材 解剖显微镜解剖针实验步骤 1a. Glusulase酶处理：用无菌水洗涤孢子3次，再用5 ml 无菌水重悬并取30 μl 稀释在270 μl 无菌水中。在光学显徽镜下观察细胞，检测完整的子囊，加3 μl 稀释的Glusulase酶到
技术和方案23－制备四分体解剖针
实验步骤各种型号的显微操作平台所附带的显微针在四分体解剖、分离合子以及操作单个细胞都十分有用。显微针可以从商业公司购买。或者，将细的玻璃纤维粘在弯的玻璃毛细吸液管上，自己制作显微针，下面介绍两种方法：方法一：显微针是用直径 2 mm 的玻璃丝在酒精喷灯上拉出来的（Scott and Snow 197
衣藻的遗传技术(四分体分析)－实验
实验材料 细胞苔层试剂、试剂盒 蒸馏水仪器、耗材 培养基实验步骤 1. 在含 M 或 TAP 培养基的琼脂平板上生长细胞苔层。配子最容易从成熟但不老的细胞苔层获得。2 周以内的培养物最好，但较老的平板培养物常与一些细胞株一起使用。2. 用接种环取 1 环细胞，重悬在 1 ml 灭菌蒸馏水中。3. 光
衣藻的遗传技术(四分体分析)－实验
配子发生 交配 合子成熟 合子萌发 实验材料 细胞苔层
衣藻的遗传技术(四分体分析)－实验
配子发生 交配 合子成熟 合子萌发 实验材料 细胞苔层
菌株的构建和四分体孢子的分析实验
实验方法原理 实验材料 酵母菌细胞试剂、试剂盒 孢子形成平板或孢子形成培养基适当的营养成分YPD培养基仪器、耗材 平板实验步骤 1）挑YPD或选择性平板上的酵母菌单菌落接种在孢子形成平板上。如果无需选择的话，细胞在转移到孢子形成平板之前，可以在YPD平板上先培养几天。单个菌落在YPD平板上生长3〜4
衣藻的遗传技术(四分体分析)－实验——交配
实验材料mt+ 和 mt- 配子仪器、耗材96 孔皿相差显微镜或 DIC 显微镜实验步骤1. 在 96 孔皿的 1 个孔中混合基本等量的 mt+ 和 mt- 配子。2. 光照 2 小时，用相差显微镜或 DIC 显微镜取 1 滴交配混合液分析交配效果。3. 将 1 滴交配混合液滴到琼脂平板中心。4.
衣藻的遗传技术(四分体分析)－实验——合子成熟
实验材料合子仪器、耗材平板铝箔实验步骤1. 光照 18~24 小时孵育合子。2. 再强力塑料包装材料包裹平板，再用铝箔封好，放黑暗中至少 5 天。平板可在黑暗中数月保持活力，也不会干燥。如果 5 天后所有合子萌发形成八细胞，将细胞在黑暗处放更长的时间。黑暗孵育更长时间通常会得到更高的四细胞萌发百分率
衣藻的遗传技术(四分体分析)－实验——合子萌发
实验材料合子仪器、耗材平板立体解剖显微镜实验步骤1. 打开平板包装，将表面用灭菌的单刃剃刀片刮几次。2. 平板光照至少 18 小时。3. 用立体解剖显微镜将合子放到平板上，用纤维光源照亮平板。4. 用圆头玻璃针，将萌发的四分体的 4 个细胞推压分开大约 5 mm，形成一个圆圈。5. 平板光照 1 周
衣藻的遗传技术(四分体分析)－实验——配子发生
实验材料细胞苔层试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材培养基实验步骤1. 在含 M 或 TAP 培养基的琼脂平板上生长细胞苔层。配子最容易从成熟但不老的细胞苔层获得。2 周以内的培养物最好，但较老的平板培养物常与一些细胞株一起使用。2. 用接种环取 1 环细胞，重悬在 1 ml 灭菌蒸馏水中。3. 光照下 3
简述花粉母细胞的四分体
1个花粉母细胞经减数分裂之后，形成4个子细胞。刚形成的4个子细胞是连在一起的，叫做四分体。四分体中4个子细胞的排列方式，因植物种类（连续型、同时型）而异，这与减数分裂过程中，不同植物新壁形成的方式有关。如多数单子叶植物，其花粉母细胞减数分裂中，第一次分裂即产生新壁，形成二分体，第二次的分裂面与第
酵母菌RNA制备实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材 离心管离心机摇床实验步骤 1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水
技术和方案22－四分体解剖
实验步骤各种型号的显微操作平台所附带的显微针在四分体解剖、分离合子以及操作单个细胞都十分有用。显微针可以从商业公司购买。或者，将细的玻璃纤维粘在弯的玻璃毛细吸液管上，自己制作显微针，下面介绍两种方法：方法一：显微针是用直径 2 mm 的玻璃丝在酒精喷灯上拉出来的（Scott and Snow 197
酵母菌DNA制备实验2
实验材料酵母试剂、试剂盒TERNA酶乙酸铵无水乙醇仪器、耗材离心机培养箱玻璃培养管实验步骤1. 在18 mm×150 mm 无菌玻璃培养管或17 mm×100 mm 无菌聚丙烯酰胺管中用10 ml YPD培养基过夜培养酵母菌至静止期。2. 培养物室温下在台式离心机上1 200 g 离心5 min
酵母菌DNA制备实验1
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落，在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。 2. 将1.5 ml 的过夜培养物转移
实验常用试剂的制备与储藏（四）
三.常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 用水补足体积到1L。分成100
基因测定的方法四分体分析法
四分体分析法由于子囊菌减数分裂所形成的四分体包被在一个子囊里，所以判断两个基因是否连锁，只需计算出各种类型的四分体数（即子囊数）。如果其中一个基因所属的连锁群已经知道，便很容易测定另一基因是否属于同一连锁群。四分体有三种，即亲代二型(PD)、非亲代二型(NPD)和四型(T)。如果有关的两个基因是连锁
基因测定方法四分体分析法
由于子囊菌减数分裂所形成的四分体包被在一个子囊里，所以判断两个基因是否连锁，只需计算出各种类型的四分体数（即子囊数）。如果其中一个基因所属的连锁群已经知道，便很容易测定另一基因是否属于同一连锁群。表一四分体有三种，即亲代二型(PD)、非亲代二型(NPD)和四型(T)。如果有关的两个基因是连锁的，即P
酵母菌RNA制备实验—poly（A）+法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤一、热酸酚方案（基本方案1）1. TES及酸酚溶液的体积增加到4 ml。2. 操作时使用50 ml 聚丙烯离心管。3. 将得到大约10 mg RNA。 二、玻璃珠方案（备择方案1）1. 将体积增加到15 ml
实验动物的剖检方法
实验概要本文介绍了实验动物的剖检方法。实验步骤动物尸体取仰卧位，将四肢固定，用水浸湿被毛。从下颌中央开始到耻骨联合正中垂直切口，用骨剪把左右肋骨剪断后，将胸骨向前下方翻开，即可暴露胸、腹腔。按胸腔、腹腔、颅腔的次序观察各脏器位置、形状及彼此相互关系，然后分别取下。先在胸腔入口处切断食道和气管，将心和
基因定位方法介绍四分体分析法
由于子囊菌减数分裂所形成的四分体包被在一个子囊里，所以判断两个基因是否连锁，只需计算出各种类型的四分体数（即子囊数）。如果其中一个基因所属的连锁群已经知道，便很容易测定另一基因是否属于同一连锁群。四分体有三种，即亲代二型(PD)、非亲代二型(NPD)和四型(T)。如果有关的两个基因是连锁的，即PD是
酵母菌RNA制备实验—玻璃珠法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 培养并收集酵母菌细胞，冷冻细胞沉淀。2. 用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。 3. 加1体积冷的酸洗玻璃珠（体积与约200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25：24 ：1酚/
酵母菌DNA制备
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材 玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤 1. 注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落，在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。2. 将1.5 ml 的过夜培养
实验室试剂四甲基硅烷的制备与保存
制备可由四氯硅烷或正硅酸乙酯与甲基碘化镁反应来制取。也可由氯甲烷和硅粉,在铜催化剂存在下反应而制取。在高温下反应然后仔细分馏制得。由于硅的电负性较低,对四个甲基上的氢原子影响较小,所以在核磁共振谱中能给出较强的信号和一个锐利的吸收峰,而其他一般有机化合物中的质子吸收峰都出现于它的左面。因此,在核磁共
酵母菌的鉴定（四）
注意事项附1麦芽汁培养基的制备：麦芽汁制备俗称糖化。所谓糖化是指将麦芽和辅料中高分子贮藏物质（如蛋白质、淀粉、半纤维素等机器分解中间产物）通过麦芽中各种水解酶类（或外加酶制剂）作用降解为低分子物质并溶于水的过程。溶解于水的各种干物质称为浸出物，糖化后未经过滤的料液称为糖化醪，过滤后的清夜称为麦芽汁，
酵母菌菌株的保存与复苏实验
酵母菌菌株可于-70℃保存在15%甘油中（可存活5年以上），或于4℃保存在添加马铃薯淀粉的丰富培养基斜面上（可存活1~2年）。实验材料酵母菌试剂、试剂盒甘油DMSO仪器、耗材冻存管实验步骤1. 配制30%的甘油溶液，在每个15 mm×45 mm，4 ml 的带盖的冻存管中加入1 ml 甘油溶液，轻
酵母菌菌株的保存与复苏实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 甘油DMSO仪器、耗材 冻存管实验步骤 1. 配制30%的甘油溶液，在每个15 mm×45 mm，4 ml 的带盖的冻存管中加入1 ml 甘油溶液，轻轻拧上螺盖，高压灭菌15 min。 2. 为了在冻存管中配制冻存菌液，加入1 ml 对数后期或静止早期的培养液，混匀
酵母菌RNA制备实验—热酸性酚抽提法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材离心管离心机摇床实验步骤1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水重悬，转
酵母菌随即孢子分析实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 2-疏基乙醇乙醇酵母裂解液仪器、耗材 超声发生器探头离心机实验步骤 1. 制备可供剖分四分体用的细胞。如果孢子在平板上形成，可用牙签挑起孢子放入装有5 ml 水的50 ml 烧瓶中；如果孢子在液体培养基中形成，可将1 ml 培养液加入5 ml 水中。然后加入0