DNA化学合成的应用

随着DNA合成技术的发展,特别是自动化合成技术的引入,人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DNA片段。目前,DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段,并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中的应用 1.1合成基因 目前有许多基因和蛋白质的核苷酸和氨基酸序列已得到阐明,人们已经可以根据需要合成出具有实际应用和研究价值的多肽和蛋白质基因。已报道的合成基因有人生长激素、干扰素、胰岛素、表皮生长因子、白细胞介素II、集落刺激因子等,这些基因均已被克隆,绝大多数已在原核和真核系统中获得表达。我国上海生物化学研究所等单位于19841年首次在世界上合成了具有生物学活性的酵母丙氨酸转移核糖核酸,为人类文明作出了应用的贡献。 目前,合成基因的方式有2种。①全基因合成:一般对于分子较小而又不易得到的基因采用该方式。可将双链基因分......阅读全文

DNA聚合酶及其应用

(一)大肠杆菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先从大肠杆菌E。Coli 细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶,包括 3种不同的酶活力:5′→ 3′聚合酶活性(模板, 带3′-OH游离基团的引物、4dNTPs、 Mg2+ )。双链特异性的5'→3'核酸外切酶活性。

DNA连接酶及其应用

(一)DNA连接酶的发现环形DNA分子的发现使科学家相信一定有一种能连接这种切口的酶存在。首个DNA连接酶(ligase)——大肠杆菌DNA连接酶,是1967年发现的,是大肠杆菌基因编码。1970年,发现了T4DNA连接酶,由大肠杆菌T4噬菌体基因编码的。(二) DNA连接酶作用特点1. 连接的两条

青蒿素的化学合成的相关介绍

  1983年,化学家HofheinzW等通过化学研究发现了青蒿素的化学合成方法,以(-)-2-异薄勒醇为原料,利用光氧化反应引进氧基得到中间体,再经过环合反应合成了最终产物。合成倍半萜内酯,主要有两个限速步骤:倍半萜母核的折叠和环化;含过氧桥的倍半萜内酯的形成程。  1986年,中国科学家周维善以

耐热DNA聚合酶的应用介绍

  DNA序列测定中应用的耐热DNA聚合酶  1.Promega公司测序级TaqDNA聚合酶  是在TaqDNA聚合酶的基础上对它进行修饰,去除5'-3'外切酶活性,保证测序记过的高度准确性,可产生强度均一的测序条带,背景清晰。  2.Bca Best DNA 聚合酶  从Bacil

DNA酶足迹法的原理和应用

DNA酶足迹法是一种用来测定DNA-蛋白质专一性结合的方法。用于检测与特定蛋白质结合 的DNA序列的部位,可展示蛋白质因子同特定DNA片段之间的结合区域。其原理为:DNA和蛋白质结合以后便不会被DNAase分解,在测序时便出现空白区(即蛋白质结合区),从而了解与蛋白质结合部位的核苷酸对数目。在用酶移

DNA亲和层析的相关应用介绍

  DNA亲和层析是利用亲和层析的原理与技术分离能与特定DNA序列相互作用的技术方法。总的过程包括两步,即:  一、将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱,用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白,用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。  二、将第一步得到的

DNA甲基化的原理和应用

DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

  近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

细胞化学基础卫星DNA的标记应用

卫星标记应用遗传多样性的分析与评估,生物个体表现出的各种遗传变异,在本质上就是DNA的差异,因此通过研究DNA的变异来分析群体的遗传结构及遗传多样性则更为直接,Arranz等(1996)对牛的卫星DNA和蛋白质标记的比较研究发现卫星标记比蛋白质标记具有更加丰富的多态性,且其两者所得到的系统发生树基本

氮杂环化学合成难题破解

  日前,困扰有机化学界多年的一个氮杂环化学合成难题,被南开大学的科研团队攻克。该校陈弓、何刚团队首次实现了对具有高“环张力”的苯并氮杂环丁烷类化合物的高效合成,填补了含氮杂环分子研究的一项重要空白。近日出版的英国《自然·化学》杂志发表了介绍该成果的论文。   杂环化合物是由碳原子和非碳原子共同组成

化学合成法合成阿魏酸

化学合成法阿魏酸的化学合成法是以香兰素为基本原料,主要应用的有机反应有Wittig-Horner反应和Kneoevenagel反应。1、Wittig-Horner反应合成阿魏酸亚磷酸三乙酯乙酸盐和乙酰香兰素在强碱体系中发生Wittig-Horner反应,再用浓盐酸酸化得到阿魏酸。该法需要预先保护酚羟

关于阿魏酸的化学合成法介绍

  阿魏酸的化学合成法是以香兰素为基本原料,主要应用的有机反应有Wittig-Horner反应和Kneoevenagel反应。  1、Wittig-Horner反应合成阿魏酸  亚磷酸三乙酯乙酸盐和乙酰香兰素在强碱体系中发生Wittig-Horner反应,再用浓盐酸酸化得到阿魏酸。该法需要预先保护酚

化学合成P3HB的新技术

  聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由自然界糖类或脂类经过细菌发酵而形成的线性聚酯,具有生物可降解性以及生物相容性,在生物可降解的包装材料、组织工程材料以及医疗材料方面具有广阔的应用前景。聚-3-羟基丁酸酯(P3HB)是最常见以及广泛研究的聚羟基脂肪酸酯,其中微生物合成的聚-R-3-羟基丁酸酯P[(R)-

脯氨酸的化学合成方法介绍

  1、明胶、干酪素之类蛋白质的水解物,用离子交换树脂处理,再用苦味酸或雷因克特盐(Reineckeatesalt)处理中性氨基酸部分,仅使L-脯氨酸沉淀,最后用无水乙醇加异丙醇重结晶而得。由嗜乙酰乙酸棒杆菌(Corynebacteriumacetoacidophilum)XQ-3(由无锡轻工大学中

关于多肽药物的制备—化学合成法的介绍

  (1)多肽合成的保护剂  多肽由氨基酸组成,不论是生物体产生的天然多肽还是人工合成的多肽,都有不同氨基酸按照一定的顺序以酰胺键连接而成。酰胺键则有一个氨基酸的氨基和另一个氨基酸的羧基脱去一分水形成。因此,多肽的化学合成重点在于在恰当的位置和时机活化或保护氨基、羧基。多肽的合成包括3个步骤:第1步

DNA微阵列技术介绍及其应用

DNA微阵列技术(microarray)指在固体表面(玻璃片或尼龙膜)上固定成千上万DNA克隆片段,人工合成的寡核苷酸片段,用荧光或其他标记的mRNA,cDNA或基因组DNA探针进行杂交,从而同时快速检测多个基因表达状况或发现新基因,快速检测DNA序列突变,绘制SNP遗传连锁图,进行DNA序列分析等

DNA合成仪特点、性能与应用

设计用于合成结构上类似DNA或RNA的寡核苷酸的自动化仪器。一般应用于固相合成法,每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上,加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。所用化学反应和操作细节随不同的仪器而改变,最广泛应用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。

微卫星DNA分子标记及其应用

  微卫星(Microsatellite,MS)又称短串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单序列重复(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因组中以少数几个核苷酸(多数为2-4个)为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核苷酸

PCR检测输血传播病毒DNA的临床应用

在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎、急性重型肝炎及肝硬化病例中,有部分病例无法用已建立的甲、乙、丙、丁、戊型肝炎的实验室诊断方法进行病原学分型。继1995年发现庚型肝炎病毒(HGV)后,1997年日本学者Nishizawa等[1]报道了应用代表性分析法发现了一种可能与输血后肝炎相关的病毒,暂时称为输血传

DNA指纹在生物学领域的应用

DNA指纹技术能够从DNA分子水平给每个玉米品种一个“身份证号码”,以其准确可靠、简单快速、易于自动化的优点越来越多的应用于品种管理。玉米DNA指纹,是从DNA分子水平给予每个玉米品种一个能够准确表明其身份的代码,就像每个人都有一张身份证,DNA指纹就是玉米的“分子身份证”。玉米的‘分子身份证’则是

PCR技术应用社会学DNA的检测

目前广泛采用的 DNA 测序方法有化学法和双脱氧法两种,它们对模板的需要量比较大。利用 PCR 方法可以比较容易地测定位于两个引物之间的序列。利用 PCR 测序有下列几种方法。(1)双链直接测序将 PCR 产物进行电泳回收或利用分子筛等方法除去小分子物质。采用热变性或碱变性的方法使双链 DNA 变成

DNA指纹在法医学领域的应用

DNA指纹技术具有许多传统法医检查方法不具备的优点,如它从四年前的精斑、血迹样品中,仍能提取出DNA来作分析;如果用线粒体DNA检查,时间还将延长。此外千年古尸的鉴定,在俄国革命时期被处决沙皇尼古拉的遗骸,以及最近在前南地区的一次意外事故中机毁人亡的已故美国商务部长布朗及其随行人员的遗骸鉴定,都采

DNA片段探针的应用实验——甲酰胺法

所谓探针,一般是指用来检测某一特定核苷酸序列或基因序列的DNA片段或RNA片段。但要使探针DNA片段能实际应用,必须使DNA或RNA分子带上可识别的信号标志,以便跟踪观察探针与其同源的核苷酸序列发生杂交反应的位置,被探测DNA或RNA片段上的大小、杂交信号的强弱等。目前应用最多的是核素标记方法或非核

DNA分型技术的法医学应用

  刑事侦查  DNA分型技术一种新的侦查手段,在侦查的旧技术时代,不完整或不清晰的指纹无法分辨指纹所有者的确切身份而失去作用,而通过DNA分型技术则可以通过分析指纹所留的油脂,汗液,皮屑等物的DNA以确定指纹所有者的确切身份,从而帮助分析案情。  亲子鉴定  自从杰弗里斯等人于1985年首次对一起

DNA测序的方法和应用领域介绍

DNA测序(DNA sequencing,或译DNA定序)是指分析特定DNA片段的碱基序列,也就是腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)与鸟嘌呤(G)的排列方式。快速的DNA测序方法的出现极大地推动了生物学和医学的研究和发现。在基础生物学研究中,和在众多的应用领域,如诊断,生物技术,法医生物学,

法医物证检测中DNA分析技术的应用

法医物证检测中DNA分析技术的应用摘 要:本文以DNA 分析技术为研究对象,对其常见技术在法医物证检测中的应用进行了探究,以期拓 展法医鉴定范围、增强物证检测质量的目的。   随着现代生物学和医学的发展, 逐步形成了许 多DNA提取、鉴定和分析技术。 这些技术在多个领 域中得到了广泛推广和应用;[1

化学合成不冻液制冷机

 高低温湿热交变试验箱适用于航空航天产品、信息电子仪器仪表、材料、电工、电子产品、各种电子元气件在高低温或湿热环境下、检验其各项性能指标。大家可以把无锡冠亚的高低温湿热交变试验箱设备对比下市场上的高低温湿热交变试验箱,看看产品特点进行对比:  1、高低温湿热交变试验箱具有较宽的温度控制范围,可满足用

ELISA试剂盒化学合成方法

1、标本采集:1.1当标本采集保存不当产生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应"(蛋白质间相互吸附的现象)结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性1.2标本采集保存不当致细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,会产生假阳性反应;标本在冰箱中保存时间

详细了解化学合成水溶性肥料

 水溶性肥料的推广一直深受国家重视,其原因就在于水溶肥速溶、易吸收,并且能广泛应用于喷滴灌等设施农业,实现水肥一体化。此外,水溶性肥料能够让种植者更快地看到肥料的效果和表现,从而根据作物不同长势对肥料配方作出调整。  水溶肥好处多多,前景广阔,吸引了越来越多的生产厂家来此分羹,这也导致了市面上水溶肥