分离的细胞核的染色质的微球菌核酸酶消化实验
实验方法原理 实验材料 动物组织 ［如肝、肾和（或）脾］试剂、试剂盒 核缓冲液 A、B、C 无 Ca 和 Mg 离子（CMF） 的 PBSNaOH 2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶（MNase） 储液仪器、耗材 剃刀刀片或解剖刀培养皿带有聚四氟乙烯包被的磨棒的组织匀浆器电动组织磨碎机 相差显微镜 轻薄棉布玻璃离心管（如 Corex）带有定角转子的冷冻高速离心机超速离心机和超净管紫外分光光度实验步骤 1. 处死动物或获得活体解剖后，将分离的组织放在置于冰上的 100 ml 烧杯中，马上用 25 ml 核缓冲液 A 冲洗。2. 将组织转移到 100 mm 塑料培养皿中，置冰上，按以下量加入核缓冲液 A： 肝，8 ml；肾，5 ml； 脾，4 ml。将组织用剃刀刀片或解剖刀切割成大小为几毫米的小块。3. 将每个小块移入不同的匀浆器。对于上述大小的组织，如果是肝或肾组织，用 15 ml 的匀浆器；如果是脾组织，用 10 ml ......阅读全文
染色质的实验依据介绍
1、用温和的方法裂解细胞核,将染色质铺展在电镜铜网上,通过电镜观察,未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝,经盐溶液处理后解聚的染色质呈现一系列核小体彼此连接的串珠状结构,串珠的直径为10nm。 2、用非特异性微球菌核酸酶消化染色质时,经过蔗糖梯度离心及琼脂糖凝胶电泳分析,发现绝大多数DNA
染色质的研究方法及实验依据
1、用温和的方法裂解细胞核，将染色质铺展在电镜铜网上，通过电镜观察，未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝，经盐溶液处理后解聚的染色质呈现一系列核小体彼此连接的串珠状结构，串珠的直径为10nm。2、用非特异性微球菌核酸酶消化染色质时，经过蔗糖梯度离心及琼脂糖凝胶电泳分析，发现绝大多数DNA被降解成
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验
实验方法原理 实验材料 重组的 NAP－1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒 HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液 EDTARNase A糖原终止缓冲液 酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分，以了解其原理及过程。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过
细胞核与线粒体的分级分离
一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
原代细胞核孔复合物的分离
试剂和器材： 1. 肝素；2. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（溶于乙醇中配制成1mol/L储存液）；3. 纯化的核膜；4. 提取缓冲液（EB）：含1%（体积分数）Triton X-100的10mmol/L Tris-HCl，（pH7.4）、0.1mmol/L苯甲基磺酰氟；5. Tris缓冲液：2mmol
特定细胞类型标记的细胞核分离
从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因，如癌细胞与正常细胞，或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell)，人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要掌握细胞核与线粒体的分级分离的实验技术。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究亚细胞成分的化
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验1
实验材料重组的 NAP－1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液EDTARNase A糖原终止缓冲液酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗材27℃ 和 30℃
关于藤黄微球菌的基本介绍
藤黄微球菌，为细菌微球菌科，微球菌属。为革兰氏染色阳性、接触酶阳性、不分解葡萄糖，氧化酶和 6.5 %NaCl 试验均为阳性，胆汁七叶昔、精氨酸双水解酶、拘橡酸盐和硝酸盐还原试验均为阴性，好氧或兼性厌氧的球状细菌，不运动的专性好氧细菌。
BAL31－核酸酶消化法产生双向缺失突变体实验
本方案使用核酸酶 BAL31(从海洋细菌 Alteromonas espejiana BAL31 中纯化）在克隆的 DNA 片段中产生单向或双向缺失。BAL31 是一个复合酶，它以非同步的方式消化双链靶 DNA。因此与诸如外切核酸酶Ⅲ这类的加工酶相比，BAL31 产生的缺失更具有不均一性（请见方案
BAL31－核酸酶消化法产生双向缺失突变体实验
试剂、试剂盒 BAL31 缓冲液 EGTA 乙醇酚 氯仿 醋酸钠 蔗糖凝胶上样缓冲液 TE 噬菌体 T4D
BAL31－核酸酶消化法产生双向缺失突变体实验
试剂、试剂盒 BAL31 缓冲液EGTA乙醇酚氯仿醋酸钠蔗糖凝胶上样缓冲液TE噬菌体 T4DNA 聚合酶BAL31 核酸酶大肠杆菌 DNA 聚合酶 IKlenow 片段限制性内切酶琼脂糖凝胶用于凝胶电泳的 DNA 分子量标准仪器、耗材 计时钟水浴实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试剂的成分请
染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟，用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20
克氏微球菌
克氏微球菌(Micrococcus Kristinae)主要分布在自然环境及哺乳动物皮肤，是一种极罕见的机会致病菌。 一、 病例 男19岁，因全身浅粉红色皮疹，伴恶心、发热，于1998年6月19日入院。入院时T 38.6℃，WBC 13.6×109/L，N 0.89，Hb 135 g/L，PLT 2
简述消化链球菌属的临床意义
临床标本中以厌氧消化链球菌和大消化链球菌最常见，其次是微小消化链球菌。可引起人体各部组织和器官感染，混合感染为多见，如腹腔、盆腔、阴道感染、肝脓肿、肺部、胸膜感染、颅内感染及皮肤和软组织感染等。厌氧消化链球菌常可引起细菌性心内膜炎，与金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌可引起严重的创伤感染即厌氧链球菌肌
关于消化链球菌属的形态描述介绍
细胞球状，直径0.8～1.5 μm，有时椭圆形。排列可变，成对、四联、成团或短链。革兰氏阳性，不运动，不产芽孢。严格厌氧。化能有机营养，发酵代谢，培养要求丰富营养；分解蛋白胨主要产乙酸，通常很少或不利用碳水化合物。接触酶通常阴性，但可能产生弱的假接触酶。有些种产生吲哚并还原硝酸盐。最适生长温度3
病原性球菌(pathogenic－cocci)的分离鉴定
病原性球菌主要包括3个属，即葡萄球菌属、链球菌属、和奈瑟球菌属。目的要求1、掌握葡萄球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性2、掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性材料浓汁标本（痰、分泌物、穿刺物）或血、尿、胆汁标本等革兰染液，血液培养基，兔血浆、生理盐水等
淋球菌分离培养的注意事项
1.培养要获得成功，取材是关键之一。取材的深度一定要够，因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。男性尿道前端包括舟状窝都为复层鳞状上皮覆盖，所以要深人到尿道内2cm～4cm处，并蘸取少量粘膜，阳性率才高。女性病人取材时，要求将棉拭插入宫颈管，转动并停留10s～30s也是这个道理。有些人只
华人科学家Nature公布核小体分布图
来自美国西北大学分子生物学系，统计系等处的研究人员发表了题为“A map of nucleosome positions in yeast at base-pair resolution”的文章，通过建立了一种新方法，在全基因组范围内分析核小体分布的位置，这将有助于揭示体内与转录相关的核
聚胺法分离染色质
聚胺法分离染色质试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液实验步骤：有丝分裂中细胞的同步化37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮
水相法分离染色质
水相法分离染色质试剂、试剂盒：水相裂解缓冲液仪器、耗材：离心机实验步骤：像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃，1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮，典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少
核酸酶保护实验
实验材料核酸酶试剂、试剂盒ATPCTPGTPMUTPEDTANaCl甲酰胺Tris-HClRNase ARNase T1RNasinDTTUTPT7RNA聚合酶DNaseⅠ饱和酚氯仿酵母tRNANaAc无水乙醇SDS蛋白酶K异丙醇丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺TBE尿素过硫酸胺TEMED仪器、耗材低温离心机
核酸酶保护实验
实验材料 核酸酶 试剂、试剂盒 ATP CTP GTP MUTP
核酸酶保护实验
实验材料 核酸酶试剂、试剂盒 ATPCTPGTPMUTPEDTANaCl甲酰胺Tris-HClRNase ARNase T1RNasinDTTUTPT7RNA聚合酶DNaseⅠ饱和酚氯仿酵母tRNANaAc无水乙醇SDS蛋白酶K异丙醇丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺TBE尿素过硫酸胺TEMED仪器、耗材 低温
核糖核酸酶（胰腺）的测定实验
实验方法原理RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸，以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2'，3'-环状磷酸中间体。实验材料酶样品试剂、试剂盒乙酸缓冲液乙酸铀酰-高氯溶液RNA（酵母）溶液核酸核酸酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「
核糖核酸酶（胰腺）的测定实验
基本方案 实验方法原理 RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸，以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2'