肝脏药物代谢酶CYP450含量测定实验

实验方法原理 药物的体内代谢过程可分为I相反应(分解代谢)及II相反应(合成代谢)。I相反应包括氧化、还原和水解反应,主要由细胞色素P450(CYP450)酶催化。CYP450酶主要分布在肝脏,故又称作肝药酶。CYP450酶的诱导和抑制具有重要的临床意义,可导致临床上的药物相互作用。苯巴比妥钠为CYP450酶的诱导剂,而放线菌素D为CYP450酶的抑制剂。本实验通过测定苯巴比妥钠和放线菌素D对肝脏CYP450酶含量的影响,介绍了肝药酶诱导剂及抑制剂的筛选方法之一。CYP450酶含量的测定:CYP450为血红素蛋白,其还原型与CO结合后,在波长450nm处出现吸收峰,故可通过测定溶液的吸光度值,反映溶液中CYP450酶的含量。仪器、耗材 苯巴比妥钠溶液放线菌素D溶液0.25mol L蔗糖溶液Tris-HCl缓冲液连二亚硫酸钠生理盐水分光光度计天平低温离心机制冰机CO气瓶玻璃匀浆器漏斗移液管冰盒实验步骤 1. 分组 先将小鼠逐一称重......阅读全文

异构酶的测定实验_葡萄糖异构酶的测定实验

实验方法原理D-葡萄糖 ⇌ D-木果糖实验材料酶溶液试剂、试剂盒TES NaOHD-葡萄糖CoCl2半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」实验步骤与木糖异构酶基本相同,唯一不同的是在酶反应以及加完半胱氨酸后,咔唑和硫酸混合物可以放置 30 min 进行

肝脏药物有望抑制细菌感染

  北卡罗莱纳州立大学的研究人员发现,常用的由仲胆汁酸制成的药物可以在体外影响艰难梭菌(C. diff)的生命周期,并降低小鼠对艰难梭菌的炎症反应。这些发现有助于了解如何将该药物用于未来的人类C. diff感染治疗。  熊二醇,熊去氧胆酸或UDCA-是由肠道细菌产生的仲胆汁酸,并且还被FDA批准用于

抗菌药物与肝脏损害

  目前抗菌药物应用越来越多,很多药物容易引起肝脏损害,而临床在应用抗菌药物时经常有不规范的现象,必须引起重视。易引起肝脏损害的抗菌药物主要有大环内酯类、氯霉素类、四环素类、氨基苷类、喹诺酮类、磺胺类、硝基呋喃类、β-内酰胺类、抗结核类、抗真菌类等,笔者针对这些抗菌药物引起肝损害的不同机制和程度

简述药物代谢酶细胞色素P450的原理

  药物代谢酶细胞色素P450不仅可以代谢药物,还可以作为各种物质氧化的催化剂。科学家已经知道,P450在体内的表达随各种疾病的发生而变化,这种变化会影响患者体内相关代谢物的数量和质量。为此,日本研究团队首次将“P450抑制试验”用于诊断帕金森病。  在此项试验中,12种不同的人类P450分别与血清

恩甘定的药物相互作用介绍

  体内和体外试验评价了恩替卡韦的代谢情况。恩替卡韦不是细胞色素P450(CYP450)酶系统的底物、抑制剂或诱导剂。在浓度达到人体内浓度约10000倍时,恩替卡韦不抑制任何主要的人CYP450酶:1A2、2C9、2C19、2D6、3A4、2B6和2E1。在浓度达到人体内浓度约340倍时,恩替卡韦不

概述恩替卡韦片的药物相互作用

  体内和体外试验评价了恩替卡韦的代谢情况。恩替卡韦不是细胞色素P450(CYP450)酶系统的底物、抑制剂或诱导剂。在浓度达到人体内浓度约10000倍时,恩替卡韦不抑制任何主要的人CYP450酶:1A2、2C9、2C19、2D6、3A4、2B6和2E1。在浓度达到人体内浓度约340倍时,恩替卡韦不

Ⅱ相代谢稳定性研究原理及实验方法

Ⅱ相代谢稳定性研究原理及实验方法1 概述1.1 药物代谢研究简介药物代谢研究是创新药物研发的重要内容,它不仅决定了创新药物制剂研发的成败,而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。因而,药物代谢研究在新药研发工程中具有不可或缺的重要作用,研究药物代谢对于了解药物在体内的变化过程至关重要。药物代谢研究

酶测定法实验

试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素(DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (

酶测定法实验

酶测定法实验             试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品

酶测定法实验

在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

血糖测定实验——酶法

实验方法原理血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料葡萄糖试剂、试剂盒邻联甲苯胺

异构酶的测定实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏异构酶的测定实验标签:D-木糖异构酶 葡萄糖异构酶 酶学实验手册 第三章葡萄糖异构酶是应用最多的酶之一,本质上它是木糖异构酶而非葡萄糖异构酶。它从各种各样的微生物中分离得来,它在微生物体内作为木糖代谢物。半纤维素,像木聚糖或阿拉伯糖,是最丰富的自然营养物质之

异构酶的测定实验

实验方法原理 D-木糖 ⇌ D-木酮糖实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 TES NaOHD-木糖MnSO4半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液(各自用 20 ul TES 缓冲液作对照)混合,并在测定

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

卫计委解读:药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南

  近年来,随着人类基因组学的发展,药物基因组学领域得到了迅猛发展,越来越多的药物基因组生物标记物及其检测方法相继涌现。  药物基因组学已成为指导临床个体化用药、评估严重药物不良反应发生风险、指导新药研发和评价新药的重要工具,部分上市的新药仅限于特定基因型的适应症患者。  药物体内代谢、转运及药物作

概述马来酸恩替卡韦片的药物相互作用

  体内和体外试验评价了恩替卡韦的代谢情况。恩替卡韦不是细胞色素P450( CYP450)酶系统的底物、抑制剂或诱导剂。在浓度达到人体内浓度约10000倍时,恩替卡韦不抑制任何主要的人CYP450酶: 1A2、2C9、2C19、2D6、3A4、286和2E1。在浓度达到人体内浓度约340倍时,思替卡

薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

试剂、试剂盒 CAT 反应混合物 1乙基乙酸裂解缓冲液不含钙盐和镁盐的磷酸盐缓冲液薄层层析(TLC) 溶剂Tris-Cl放射性墨水仪器、耗材 干冰 乙醇浴不溶于乙醇的墨水的记号笔旋转真空蒸发器橡胶棒 薄层层析板薄层层析槽预设为 65°C 的水浴实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的组分请见

薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的组分请见附录 1。贮存液稀释到适当浓度。CAT 反应混合物 11mol/LTris-Cl(pH7.8)50ul[14C] 氯霉素 (60mCi/mmol, 用水稀释到 0.1mCi/ml)10ul乙酰辅酶 A(新鲜

薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

本方案中,我们列出了三种不同的分析方法,可以用来测定报道基因载体 pCAT3 转染哺乳动物细胞后表达的 CAT 酶活性(请见图 17-3)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料用携带感兴趣 DNA 的 pCAT 载体转染的哺乳动物培养细

关于细胞色素P450的简介

  细胞色素P450(cytochromeP450或CYP450,简称CYP450)代表着一个很大的可自身氧化的亚铁血红素蛋白家族,属于单氧酶的一类,因其在450纳米有特异吸收峰而得名。它参与内源性物质和包括药物、环境化合物在内的外源性物质的代谢。根据氨基酸序列的同源程度,其成员又依次分为家族、亚家

因子Ⅶ相关抗原含量测定实验

实验方法原理凝血因子Ⅷ相关抗原(ⅧR;Ag)与其相应特异抗体产生免疫复合物的浊度用透射法同定,其浊度高低与血清中四ⅧR:Ag浓度正比.实验步骤实验方法:手工、半自动测定混匀37℃水浴20分钟,340nm处以抗血清调零点测定各管A值D数据处理:ⅧR:Ag含量=(测定管 A值/参比管 A值)×100%正

蛋白质含量测定实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 牛血清NaCl考马斯亮蓝仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤   分别在两组微量离心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl补足至100 μl,同时以两管100 μl 的0.15 mmol/l NaCl作空白对照。2.  每管各加

因子Ⅶ相关抗原含量测定实验

实验方法原理凝血因子Ⅷ相关抗原(ⅧR;Ag)与其相应特异抗体产生免疫复合物的浊度用透射法同定,其浊度高低与血清中四ⅧR:Ag浓度正比.实验步骤实验方法:手工、半自动测定混匀37℃水浴20分钟,340nm处以抗血清调零点测定各管A值D数据处理:ⅧR:Ag含量=(测定管 A值/参比管 A值)×100%正

植物蔗糖含量的测定实验

实验方法原理植物体内可溶性糖包括还原糖和非还原糖(主要是蔗糖)。因此测定蔗糖时,须先用盐酸将其水解为还原糖,再测定水解后的总还原糖含量,然后从总还原糖含量减去水解前还原糖含量即为蔗糖含量。实验材料马铃薯                                                

总糖含量的测定实验

实验方法原理 苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490 nm处(戊糖及糖醛酸在480 nm)有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。实验材料 葡萄糖试剂、试剂盒 浓硫酸 苯酚仪器、耗材 试管 试管架 移液管 量筒 烧杯 离心管 玻璃碾磨器 离心机 分

蛋白质含量测定实验

Bradford法             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

植物蔗糖含量的测定实验

实验方法原理 植物体内可溶性糖包括还原糖和非还原糖(主要是蔗糖)。因此测定蔗糖时,须先用盐酸将其水解为还原糖,再测定水解后的总还原糖含量,然后从总还原糖含量减去水解前还原糖含量即为蔗糖含量。实验材料 马铃薯水果试剂、试剂盒 盐酸溶液氢氧化钠溶液酚酞指示剂仪器、耗材 分光光度计电子分析天平恒温水浴锅2

植物蔗糖含量的测定实验

实验方法原理植物体内可溶性糖包括还原糖和非还原糖(主要是蔗糖)。因此测定蔗糖时,须先用盐酸将其水解为还原糖,再测定水解后的总还原糖含量,然后从总还原糖含量减去水解前还原糖含量即为蔗糖含量。实验材料马铃薯水果试剂、试剂盒盐酸溶液氢氧化钠溶液酚酞指示剂仪器、耗材分光光度计电子分析天平恒温水浴锅25 ml

总糖含量的测定实验

苯酚-硫酸法             实验方法原理 苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490 nm处(戊糖及糖醛酸在480 nm)