基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒使用说明
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒是一种旨在通过设计符合胞嘧啶转化的特殊引物,对转化基因组的CpG岛区域进行PCR扩增,探测基因甲基化信息的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于父母印记、X染色体研究、肿瘤抑制基因等表观遗传学研究。产品即到即用,性能稳定,操作简便,扩增效率显著。 技术背景 在基因的启动子区域(promotor region)通常存在一些富含重复双核苷酸“CG”的区域,称为“CpG岛”(CpG island)。在人类基因组内,存在有近3万个CpG岛。这些CpG岛不仅是基因的一种标志,而且还参与基因表达的调控和影响染色质的结构,更是DNA甲基化的唯一位置。CpG岛甲基化形态的扫描分析是基因表达和表观基因组学的主要课题。 产品内容 扩增液(Reagent A)......阅读全文
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒使用说明
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒是一种旨在通过设计符合胞嘧啶转化的特殊引物,对转化基因组的CpG岛区域进行PCR扩增,探测基因甲基化信息的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒使用说明
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒是一种旨在通过设计符合胞嘧啶转化的特殊引物,对转化基因组的CpG岛区域进行PCR扩增,探测基因甲基化信息的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒使用说明
主要用途基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒是一种旨在通过设计符合胞嘧啶转化的特殊引物,对转化基因组的CpG岛区域进行PCR扩增,探测基因甲基化信息的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于父母印记、X染色体研究、肿瘤抑制基因等表观遗传学研究。产品即到即用,性能稳定
MSP(甲基化特异性PCR)介绍
甲基化特异性 PCR(Methylmion Specific PCR,MSP)及其改进方法是检测基因甲基化的经典方法.MSP法的原理是首先用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶都被转化为 尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。然后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物并进行聚合酶链反应(P
甲基化特异性PCR——亚硫酸氢钠法
甲基化特异性PCR主要用于特意位点甲基化的检测。实验方法原理MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因 组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变,然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳,
甲基化特异性PCR
亚硫酸氢钠法 实验方法原理 MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因 组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶
关于基因表观修饰的方式—甲基化检测的程序介绍
1.甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP) 用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能
关于甲基化检测的检测程序介绍
1.甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP) 用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能
甲基化特异性PCR
实验方法原理 MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因 组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变,然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳,凝胶扫描观察分析结果。实验材料 DNA
甲基化检测方法介绍
(1) 甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP)用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到
甲基化的检测方法
(1) 甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP)用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃
甲基化特异性的PCR
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在甲基化;反之,说明被检测的位点不存在甲基化。
甲基化特异性-PCR-实验
实验材料 样本 DNA试剂、试剂盒 NaOH对苯二酚重亚硫酸钠矿物油DNA Wizard cleanup kit (Promega) 或等同物异丙醇 糖苷配糖基乙酸胺乙醇10 X PCR 扩增缓冲液4dNTP 混合物Taq DNA 聚合酶仪器、耗材 水浴设备Vacuum manifold带控制管温度
基因扩增PCR的扩增出现非特异性扩增带的原因和解决办法
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一
PCR基因扩增1
一、实验原理 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一种体外核酸扩增系统,其原理类似DNA分子的天然复制过程,是将在待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两个寡聚核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增 2n 倍。该技术已成为分子生物学中
PCR基因扩增2
(4)引物的熔点温度(Tm值)要适当。Tm值与引物的碱基组成和长度有关;PCR引物的GC/AT应与要扩增的模板DNA相当或略高些。一般熔点温度以大于55℃为宜。(5)引物的3,末端必须与模板严格互补,而5,末端的要求可灵活些。(6)目前在引物选择中已广泛应用计算机软件,从EMBL或Genebank中
PCR基因扩增实验
[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍。1.变性:加
PCR基因扩增原理
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每1
如何提高PCR的扩增特异性?
疫情当下,最热频的词汇莫过于核酸检测了。而核酸检测最核心的技术也越来越被大众所熟知,就是我们高中就学过的聚合酶链式反应,又称为PCR。 自从1983年,Kary Mullis才发明出这个用于扩增目标DNA的研究工具—PCR技术后,其逐渐成为分子生物学研究必不可少的一部分
甲基化特异性的PCR检测
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在甲基化;反之,说明被检测的位点不存在甲基化。
关于甲基化特异性的PCR介绍
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在甲基化;反之,说明被检测的位点不存在甲基化。
表观遗传学分子生物学软件——DNA甲基化分析工具
第一类:基于引物设计功能的软件。此类软件主要是针对重亚硫酸盐序列进行甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MS-PCR or MSP)和重亚硫酸盐测序(bisulfite sequencing, BS)引物的设计。由于重亚酸盐修饰的特殊性,使常规的分子生物学
基因扩增梯度PCR仪
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,简称PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观
PCR基因扩增仪简介
分类: PCR仪的种类总体来说可以分为两大类:PCR扩增仪和实时荧光定量PCR仪。用途: PCR仪是医学,农业,食品,医药,检验检疫等领域的实验室常规仪器设备。PCR仪原理: 为双链dna在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在dna聚合酶的作用下,以单链为模版,根据碱基互补配对
PCR基因扩增仪简介
聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction)聚合酶链式反应 聚合酶链式反应,简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应
目的基因的PCR扩增
实验概要进行目的基因的PCR扩增实验原理PCR(聚合酶链式反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。它包括3个基本步骤:⑴变性:目的双链DNA片段在94℃下解链;⑵退火:两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;⑶延伸:在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适
浅谈PCR基因扩增仪
聚合酶链式反应,简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。生命科学仪器
PCR扩增制备目的基因
1.目的学会PCR操作的基本技术。2.原理是将待扩增的DNA模板加热变性,与其两侧互补的寡聚核苷酸引物复性,然后经过耐热的DNA聚合酶延伸。再进入下一轮变性—复性—延伸的循环,n次循环后DNA可被扩增(1+X)n倍。其中
甲基化特异性-PCR-确定-DNA-甲基化的模式
用 PCR 来分析 DNA 甲基化的方法可以运用于:(1)对基因组中任何位置的 CpG 甲基化的分析;(2)检测肿瘤患者的基因改变以及介人被印的基因的固定遗传障碍的研究。实验方法原理DNA甲基化(DNA methylation)是最早发现的修饰途径之一,大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、D