TAILPCR（TermalAsymmetricInterlacedPCR）基础知识
很早就有用随机引物的PCR，但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生，所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL- PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR，则解决了这个问题，后来有研究表明，经改良过的TAIL-PCR成功地从突变体中克隆到外源插入基因的旁侧序列，从而为启动子的克隆提供了有效的新方法。在利用特异引物和随机引物进行PCR中一般有3种产物生成：(1)由特异性引物和简并引物扩增出的产物； (2)由同一特异性弓l物扩增出的产物；(3)由同一简并引物扩增出的产物。在TAIL-PCR反应中，其中后2种目标产物可以通过以嵌套的特异性引物进行的后续反应来消除。TAIL-PCR的基本原理是利用目标序列旁的已知序列设计3个嵌套的特异性引物(specialprimer，简称 sp1，sp2，sp3，约20bp)，用它们分别和1个具有低Tm值......阅读全文
TAILPCR（Termal－Asymmetric－Interlaced－PCR）基础知识
很早就有用随机引物的PCR，但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生，所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL- PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR，则解决了这个问题，后来有研究表明，经改良过的TAIL-
TAILPCR（thermal－asymmetric－interlaced－PCR)简介
在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列，TAIL-PCR又叫热不对称交错PCR，能够较好地解决上述难题。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环，利用不同的退火温度选择性地扩增目标片段，所获得的片段可以直接用做探针标记
启动子克隆方法研究进展（4）
1.6 TAlL-PCR 很早就有用随机引物的PCR，但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生，所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL-PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR，则解决了这个问题，后来有研究表明，经
Activation－Tagging
Insertional mutagenesis is one of the most effective approaches to determine the function of plant genes. However, due to genetic redundancy, loss
PCR基础知识指南
近年来，PCR技术在“微量证据”方面大放异彩，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。然而这仅仅只是我们对PCR技术探索、应用的一小部分，它的潜在价值不可限量，还需要人类的不断研究。聚合酶链式
Realtime－PCR－基础知识
理论基础 聚合酶链式反应作为一种革命性的方法在生物学研究的历史中占据了重要的地位。以此为基础发展出包括real-time PCR在内的多项应用技术。自诞生后real-time PCR技术持续发展，从简单的增扩到整个PCR过程，real-time PCR表现出比PCR更敏感、更明确的定量分析特
5端RACE升级版
实验概要完成这个RACE需要全套反转录系统，当然选一个好的反转录酶（无RNase H），dUTP，taq酶，Uracil DNA glycosylase ，还有这几条引物： Adapter A AUCUCGAGUUCGCGCCGGAUCC(T) 25 VN cDNA synthesis and ad
几种常用特殊PCR技术
几种常用特殊PCR技术（一）逆转录PCR（Reverse transcription－PCR,RT-PCR）RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR（RT－PCR）常用于基因表达研究（定量PCR）和逆病毒检测．设计RT－PCR引物时，应使引物分别位于不同的外显子中，以便区别cDNA和gDNA
几种常用特殊PCR技术
几种常用特殊PCR技术（一）逆转录PCR（Reverse transcription－PCR,RT-PCR）RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR（RT－PCR）常用于基因表达研究（定量PCR）和逆病毒检测．设计RT－PCR引物时，应使引物分别位于不同的外显子中，以便区别cDNA和gDNA
几种常用特殊PCR技术
几种常用特殊PCR技术 （一）逆转录PCR（Reverse transcription－PCR,RT-PCR） RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR（RT－PCR）常用于基因表达研究（定量PCR）和逆病毒检测． 设计RT－PCR引物时，应使引物分别位于不同的外显子中，以便区别cDNA和
不对称PCR技术的定义和方法介绍
不对称PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一对引物，PCR扩增后产生大量的单链DNA(SSDNA)。这对引物分别称为非限制引物与限制性引物，其比例一般为50——100:1。在PCR反应的最初10——15个循环中，其 扩增产物主要是双链DNA，但当限制性引物(低浓度引物)消耗完后，非限制
什么是不对称PCR？
不对称PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一对引物，PCR扩增后产生大量的单链DNA(SSDNA)。这对引物分别称为非限制引物与限制性引物，其比例一般为50——100:1。在PCR反应的最初10——15个循环中，其扩增产物主要是双链DNA，但当限制性引物(低浓度引物)消耗完后，非限制性
反向PCR－（inversePCR）实验步骤
inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多，而Inverse-PCR一般只要有特异条带，基本上就是目的片段。基本步骤如下：1、反向PCR（Inverse PCR）原理：反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。a. 选择合适
反向PCR－（inversePCR）实验步骤
nverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多，而Inverse-PCR一般只要有特异条带，基本上就是目的片段。基本步骤如下：1、反向PCR（Inverse PCR）原理：反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。a. 选择合适的
HPLC基础知识
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 （一）概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary ph
HPLC基础知识
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 （一）概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的
水质基础知识
一、9种水中的杂质二．10种常见的水处理方法三、各种水处理方法与处理对象的比较四、水处理常用名词解释 一、9种水中的杂质1、微粒物质（Particulate Matter）包括泥沙、铁锈、藻类、悬浮物、微纤维等微粒杂质，肉眼可见。这些微粒常常悬浮在水流之中，水产生的浑浊现象。这些微粒很不稳定，可以
ELISA基础知识
ELISA原理与分类1. ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载
生物光学基础知识
光的概念光是一种电磁波，它具有波动和微粒的双重性。与其它所有的波一样，光波也具有波长，波长用λ表示。光波最常用的单位是纳米(nm)。把光波波长按照从短到长的顺序进行排列就得到了光谱。光谱中随着波长由短到长依次出现ґ射线、x射线、紫外线、可见光、红外线、无线电波等。 可见光可见光就是不需借助任何仪器设
HPLC基础知识（七）
V．HPLC应用一、样品测定1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱。2．样品配
病毒基础知识（9）
五、病毒的非增殖性感染病毒对敏感细胞的感染并不一定都能繁殖病毒，产生有感染性的病毒子代。由于病毒或细胞的原因，使病毒的复制在病毒进入敏感细胞后的某一阶段受阻，导致病毒感染的不完全循环，不产生有感染性的病毒子代。1． 缺损病毒 有些病毒由于缺乏某些基因，单独感染细胞时不能复制出完整的、具 有感染性的
病毒基础知识（7）
三、病毒的化学组成及其功能 病毒的基本化学组成是核酸和蛋白质。有包膜的病毒和某些无包膜的病毒除核酸和蛋白质外，还含有脂类和糖类。有的病毒还含有聚胺类化合物，无机阳离子等组分。1.病毒的核酸： 核酸是病毒的遗传物质，是病毒遗传和感染的物质基础。一种病毒的病毒颗粒只含有一种核酸，DNA或者RNA。除
离心的基础知识
Centrifugation is a process used to separate or concentrate materials suspended in a liquid medium. The theoretical basis of this technique is the eff
XRF选购基础知识
1.仪器品牌&公司实力这点和购买其他商品一样,我们都会注意到这点,购买XRF我们要看这个品牌是不是在RoHS指令执行期间才冒出来的,大家都知道仪器技术都是要靠积累和沉淀的,还有大家关心的是会不会这个公司应为RoHS而生,因为RoHS而亡.如果这个公司赚够钱,突然蒸发了,那用户怎么办,售后服务由谁来负
滴定分析基础知识
1、滴定管应用硫酸重铬酸钾洗液洗涤，用自来水冲洗干净后，再用蒸馏水洗涤3次以上，以内壁不挂水珠为原则。使用前再用滴定标准溶液洗3次。（当滴定管是即洗即用，未经控干时，应增加标准溶液洗涤次数）。 2、酸式滴定管下端的玻璃活塞，洗净以后取出用滤纸将其擦干，涤上一层凡士林，（注意不要将小孔堵塞）再套
QPCR的基础知识
问：什么是QPCR？答：QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？答：聚合酶链式反应（Polymerase C
病毒基础知识（6）
病毒的基本特性一、病毒的定义和特点病毒的定义：是一类比较原始的、有生命特征的、能够自我复制和严格细胞内寄生的非细胞生物。病毒的特点：① 形体微小，具有比较原始的生命形态和生命特征，缺乏细胞结构；② 只含一种核酸，DNA或RNA；③ 依靠自身的核酸进行复制，DNA或RNA含有复制、装配子代病毒所必须的
HPLC基础知识（六）
三、流动相1．流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数
病毒基础知识（1）
病毒的发现与研究历史一、病毒病由来已久地球上的人类，其他动物和植物遭受病毒病的折磨已有许多世纪。许多记述表明至少在公元前二至三个世纪印度和中国就存在天花，中国从公元十世纪宋真宗时代就有接种人痘预防天花的记载了。在明代隆庆年间（1567-1572），人痘预防天花推行甚广，先后传至俄国、日本、朝鲜、土耳
病毒基础知识（2）
三、病毒学的发展历程病毒病害的病原研究阶段； 病毒化学和结构研究阶段。（一）病毒病害的病原研究阶段 自病毒发现直到上个世纪30年代初，病毒学研究主要集中在：分离和鉴定引起各种病毒性疾病的病毒；病毒对疾体所引起的特异性病理效应；病毒的传播方式和感染宿主范围；各种理化因子对病毒感染的影响等方面。 在