辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序
1．组织切片脱蜡处理等同前； 2．流水冲洗5分钟，3％H2O2孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶，避免假阳性)； 3．漂洗3次，每次5分钟； 4．1％牛血清白蛋白孵育，室温20分钟，移去多余液体； 5．加入稀释的辣根过氧化物酶—凝集素，置湿盒内孵育。室温1．5小时； 6．漂洗3次．每次5分钟； 7．呈色 DAB液(配制：DAB 5mg，pH 7．6 Tris—HCl 10ml，3％H2O2 40ul)室温暗处10—15分钟； 8．蒸馏水洗5分钟，流水短暂冲洗后，常规乙醇脱水，二甲苯透明，封片； 9．光镜观察?阳性反应部位呈棕褐色。 10．注意事项 (1)为防止染色过程中切片脱落，载玻片可用铬矾/明胶或赖氨酸等黏片剂处理； (2)脱水时与普通石蜡切片不同，70％乙醇时间不宜太长，以免阳性反应褪色； (3)辣根过氧化物酶—凝集素的最佳工作浓度亦需经预实验确定； ......阅读全文
细菌染色的基本程序中革兰染色的用途
先干燥就是为了染色时标本不易脱落。固定不仅能杀死细菌，改变细菌对染料的通透性，还能使细菌吸附在玻片上，保持原有的形态结构。媒染其作用是增强染料与细菌的亲和力，更好地加强染料与细胞的结合。常用的媒染剂是碘液。脱色帮助染料从被染色的细胞中脱色。利用细菌对染料脱色的难易程度不同，而将细菌加以区分。革兰阳性
细菌染色的基本程序中革兰染色的用途
先干燥就是为了染色时标本不易脱落。固定不仅能杀死细菌，改变细菌对染料的通透性，还能使细菌吸附在玻片上，保持原有的形态结构。媒染其作用是增强染料与细菌的亲和力，更好地加强染料与细胞的结合。常用的媒染剂是碘液。脱色帮助染料从被染色的细胞中脱色。利用细菌对染料脱色的难易程度不同，而将细菌加以区分。革兰阳性
免疫组织化学常用染色方法
根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原（抗体）在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸；染色架；保湿盒；晾片盘；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟；2. 脱蜡和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤
1．一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。2．二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫
标记染色体的相关介绍
染色体（Chromosome ）是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，所以叫染色体（染色质）；其本质是脱氧核甘酸，是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体，是遗传物质基因的载体。 染色体只是染色质的另外一种形态。它们的组成成分是一样的，但是由于构型不一样，所以还是有
标记信息素的概念
标记信息素(markpheromone)：Salt于1934年首先发现广赤眼蜂具有识别被寄生卵与未被寄生卵的能力后来证明被寄生卵上存在标记化学因子,以控制其再次产卵。这种标记化学因子就称为标记信息素。又称产卵驱避信息素。
非同位素标记探针酶法检测实验——辣根过氧化物酶法检测
实验材料探针试剂、试剂盒PBS链亲和素HRPODAB双氧水甘油二氨基联苯胺仪器、耗材盖玻片水浴锅实验步骤1. 以生物素酰化探针与载玻片上样品杂交并洗片（“荧光原位杂交实验”基本方案1~6步）。2. 由1×SSC中取出玻片，尽可能吸去残留玻片上的缓冲液，但不要使玻片干涸。加200 μl 封阻液于玻
免疫细胞或组织化学染色的相关问题
附上我们这里的组化步鄹：（切片复温凉干完毕）1。加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液（甲醇80ml＋0.01MPBS 20ml＋30%过氧化氢 1ml）30min，以消除内源性过氧化物酶的影响，0.01MPBS清洗5min×3；2。加入配好的0.3% Triton X100（30% Triton X
微生物常用染色法及染色程序
微生物染色的基本原理，是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附，且吸附作用稳固；同样，碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化
辣根过氧化物酶(HRP)标记试剂盒的应用
活化的过氧化物酶是辣根过氧化物酶（HRP），其天然碳水化合物（糖）已被高碘酸盐轻度氧化以产生胺反应性醛基。 活性过氧化物酶的这些羰基自发地、有效地与抗体或其它蛋白质上的伯胺交联。该方法比其它胺反应性化学试剂，如戊二醛偶联更有效，戊二醛偶联常常导致聚合反应和更高程度的偶联失活。 预活化的酶消除
免疫组织化学技术按照标记物的种类分类
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
免疫金组织化学染色实验——CIGSS－法
实验方法原理彩色免疫金银染色方法（coloured IGSS，CIGSS）是由 Frite 和 Hoenes 等（1986）建立的一种新方法，刘彦仿等1988）在《中华病理学杂志》上也报道了改进后的 CIGSS 方法。其基本原理是在 IGSS 法的基础上，根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的，即 I
光镜免疫金组织化学染色方法
一、原理本法是由Geoghegan等（1978）首次应用金标探针检测B淋巴细胞表面抗原，将胶体金颗粒（大于20nm）标记在第二抗体或SPA分子上，制备成金标二抗。其原理是当特异性抗体与抗原结合后，用金标二抗或金标SPA与特异性抗体结合，形成抗原-抗体-金标抗体复合物，此时在光镜（10X100倍）下可
免疫金组织化学染色实验——IGSS－法
实验方法原理免疫金银染色（immunogold silver staining；IGSS）的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用，用对苯二酚还原剂将银离子（Ag+）还原成银原子（Ag），被还原的银原子围绕金颗粒形成一个「银壳」，「银壳」一旦形成本身亦具有催化作用，从而使
常用免疫组织化学染色方法－2
五)免疫组化双染色法。(ⅰ) (Ionmuno- Histochemistry double staimimg method) 1.切片脱蜡至水。2.0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。3.水洗。4.抗原修复。5.PBS洗3次，每次1分钟。6.加入非免疫性动物血清，孵育 10分钟。7.PBS洗3次
免疫组织化学染色注意事项
一、抗体的保存 浓缩抗体，在有效期以内，一般只需放在普通4 ℃冰箱内保存，保存时间可达5-10年以上（免疫荧光试剂例外）。最好不要用塑料管分装，因为塑料对抗体有吸附作。用-20℃至-40℃低温冰箱冷冻，避免反复冻融使抗体效价降低。而即用型抗体保存时间一般在一年以内。 用TBS稀释的抗体，一般
常用免疫组织化学染色方法－1
一)、ABC法： (注，下面各种方法，均为手工操作，如没特别说明，均在室温下进行)1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。3. 无水酒精Ⅰ 30秒。4. 无水酒精Ⅱ 30秒。5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。6. 95%酒精Ⅱ 30秒。7. 90%酒精 30秒。8.80%酒精 30秒。9
免疫荧光组织化学染色法
一)免疫荧光组织化学原理 将已知抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受到激发光的照射会发出明亮的荧光(黄绿色或橘红色)，荧光素受激发光照
免疫组化技术的原理、分类和优点介绍
一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半
免疫组化技术的原理、分类和优点
一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半
免疫组化技术的原理、分类和优点
一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半
非标记抗体免疫酶组织化学实验——ABPAP－法
实验方法原理ABPAP 法是 PAP 法和 ABC 法的联合应用，使更多的酶分子结合到抗原-抗体复合物上，目的就是增加方法的敏感性。其原理见图 4-11。作者应用了 30 余种特异性一抗、鼠源性和兔源性 PAP 复合物以及 ABC 检测系统，结果 ABPAP 法比单一的 PAP 法要敏感 7～8 倍
非标记抗体免疫酶组织化学实验——PAP－法
实验方法原理与酶桥法相似，不同的是酶桥法分四步，而 PAP 法分三步。PAP 法将酶桥法的步骤（3）、步骤（4）合二并为一，用 PAP 复合物替代，故称 PAP 法（图 4-9）。PAP 复合物中的抗 HRP 抗体和第一抗体必须为同一种属动物的 IgG，这样桥抗体才能作为「桥」将 PAP 复合物连接
免疫细胞化学SP法与SABC法的区别
免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。免疫组织化学的方法有多种，其实都大同小异，不同点只是在于显色基团！SP法1）脱蜡、水化；2）PBS洗2～3次各5分钟；3）3%H2O2（80%
酵母人工染色体的标记方法
YAC 载体的选择标记主要采用营养缺陷型基因，如色氨酸、亮氨酸和组氨酸合成缺陷型基因 trp 1、 leu 2和 his 3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等，以及赭石突变抑制基因 sup4 。与 YAC 载体配套工作的宿主酵母菌（如AB1380）的胸腺嘧啶合成基因带有一个赭石突变ade 2-1。
生物素亲和素标记缺点
灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合，形成的生物素衍生物，不仅保持了大分子物质的原有生物活性，而且比恬度高，具多价性。此外，每个亲和素分子有四个生物素结合部位，可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此，BAS具有多级放大作用，使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异
免疫金标记检测方法标准操作程序
【目的】保证免疫金标技术检验准确性【本SOP 适用范围】免疫金标技术【该SOP 变动程序】本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【原理】氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒，颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥，使其保持一个比较稳定的胶
免疫金标记检测方法标准操作程序
【目的】 保证免疫金标技术检验准确性 【本SOP适用范围】 免疫金标技术 【原理】 氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒，颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥，使其保持一个比较稳定的胶体状态，故称作胶体金。利用胶体金颗粒的高电子密度及其表面能结合生物大分子(如抗体、SPA、植物血凝素和
Factor－VIII－相关抗原的免疫组织化学染色
Immunostaining for Factor VIII Related Antigen (endothelium):Deparaffinize and rehydrate tissue sections. Rinse 3 times with PBS.0.1%Pepsin in 0.1N HC